【摘 要】目的：探討長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）肌球蛋白輕鏈激酶反義RNA1（myosin light chain kinaseantisense RNA1，MYLK-AS1）調(diào)節(jié)miR-141-3p/微管不穩(wěn)定蛋白1（stathmin 1，STMN1）軸對胃癌細胞增殖、凋亡和侵襲的影響。方法：將HGC27 細胞分為NC 組、si-NC 組、si-MYLK-AS1 組、si-MYLK-AS1+inhibitor NC 組、si-MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor組。雙螢光素酶報告基因?qū)嶒灆z測LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的關(guān)系；qRT-PCR檢測HGC27細胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表達；CCK-8法檢測HGC27細胞增殖情況；流式細胞術(shù)檢測HGC27細胞凋亡；使用Tran?swell實驗評估了HGC27細胞的侵襲和遷移能力，并統(tǒng)計了穿透基質(zhì)膜的細胞數(shù)量；同時采用Western blot技術(shù)檢測了HGC27細胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin 及N-cadherin 這幾種蛋白表達量的變化。結(jié)果：HGC27 細胞中LncRNA MYLK-AS1、STMN1水平高于GES-1細胞（Plt;0.05），miR-141-3p水平低于GES-1細胞（Plt;0.05）。si-MYLK-AS1組HGC27細胞A450 nm值、遷移、侵襲細胞數(shù)量、LncRNA MYLK-AS1 表達量、STMN1、N-cadherin、Vimentin 蛋白水平低于NC 組、si-NC 組（Plt;0.05），HGC27細胞凋亡率、miR-141-3p表達量、E-cadherin蛋白水平高于NC組、si-NC組（Plt;0.05）；而miR-141-3p低表達減弱了沉默LncRNA MYLK-AS1抑制HGC27細胞發(fā)展的作用；LncRNA MYLK-AS1靶向調(diào)節(jié)miR-141-3p/STMN1軸。結(jié)論：LncRNAMYLK-AS1可能通過上調(diào)microRNA-141-3p的表達水平，間接導(dǎo)致STMN1基因表達受到抑制，這一過程可能對胃癌細胞的增殖、凋亡及侵襲特性產(chǎn)生明顯影響。

【關(guān)鍵詞】長鏈非編碼RNA肌球蛋白輕鏈激酶反義RNA1；微小RNA-141-3p/微管不穩(wěn)定蛋白1軸；胃癌；增殖；凋亡；侵襲

【中圖分類號】R735.2 【文獻標志碼】A 【收稿日期】2023-06-27

胃癌是一種起源于胃黏膜上皮的消化道惡性腫瘤。截至2020年，新增病例超過100萬例，死亡病例為76.9萬例。在癌癥中，胃癌發(fā)病率排名第5，死亡率排名第4[1]。胃癌早期沒有明顯癥狀，由于缺乏有效的早期診斷分子，大多數(shù)患者在診斷時已處于晚期[2]。盡管化療可延長患者生存時間，但預(yù)后仍不容樂觀。因此，迫切需要尋找有效的靶向分子，以改善患者預(yù)后。已有研究證實長鏈非編碼RNA（long non coding RNA，lncRNA）可用作診斷和治療胃癌的生物標志物[3]。有研究通過體內(nèi)外實驗發(fā)現(xiàn)，沉默LncRNA 肌球蛋白輕鏈激酶反義RNA1（myosinlightchainkinaseantisenseRNA1，MYLK-AS1）可以抑制胃癌小鼠腫瘤生長，抑制胃癌細胞遷移和侵襲[4]。Target Scan網(wǎng)站及雙螢光素酶報告基因?qū)嶒灠l(fā)現(xiàn)，LncRNA MYLK-AS1 可以靶向調(diào)節(jié)miR-141-3p/STMN1 軸。上調(diào)miR-1-141p 水平可以抑制胃癌細胞活力、遷移和侵襲[5]，而STMN1與胃癌患者化學(xué)抵抗和預(yù)后不良有關(guān)[6]。本研究對LncRNAMYLK-AS1是否可以通過調(diào)節(jié)miR-141-3p/微管不穩(wěn)定蛋白1（stathmin1，STMN1）軸對胃癌細胞增殖、凋亡和侵襲產(chǎn)生影響，進行研究報道如下。

1 材料與方法

1.1 主要材料

HGC27人胃癌細胞株是從賽百慷生物技術(shù)（上海）有限公司獲得的，GES-1人胃黏膜上皮細胞是由上海致備生物科技有限公司提供的。此外，實驗中使用的si-NC、si-MYLKAS1、inhibitor NC和miR-141-3p inhibitor等產(chǎn)品均購于上海生工生物科技有限公司。用于檢測細胞增殖能力的CCK-8試劑盒，由無錫菩禾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司生產(chǎn)。實行雙熒光素酶報告基因分析和細胞凋亡檢測的試劑盒，包括膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙錠（annexin V-FITC/PI）雙染試劑盒，是北京百奧萊博科技有限公司所供應(yīng)的。針對STMN1、E鈣黏蛋白（E-cadherin）、N 鈣黏蛋白（N-cadherin）及波形蛋白（vimentin）的專用抗體，是由Abcam公司銷售的。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養(yǎng)及分組[7-8] 所有細胞種類在添加了1%的青霉素/鏈霉素和10%胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）的杜爾伯科改良伊格爾培養(yǎng)基（Dulbecco’s modified eagle medium，DMEM）里進行了培養(yǎng)。這些細胞在37 ℃、含有5% CO2的飽和濕度條件下的穩(wěn)定溫度培養(yǎng)箱中進行了培養(yǎng)。在6孔培養(yǎng)板上，每孔種植3×104個HGC27細胞。接下來，根據(jù)轉(zhuǎn)染試劑盒的指導(dǎo)說明，分別將si-NC、si-MYLK-AS1、si-MYLK-AS1與inhibitor NC組合，以及si-MYLK-AS1與miR-141-3p inhibitor組合轉(zhuǎn)染入HGC27細胞。這些處理分別標識為si-NC組、si-MYLK-AS1組、si-MYLK-AS1+inhibitor NC組和si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor組。同時，設(shè)置一組未接受任何處理的HGC27細胞作為對照組，此組被稱為NC組。轉(zhuǎn)染完成后，所有細胞繼續(xù)在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)48 h。

1.2.2 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1 關(guān)系 為了探究MYLK-AS1和STMN1基因與miR-141-3p的相互作用，首先構(gòu)建MYLK-AS1 的野生型載體（MYLK-AS1-WT）及其突變型載體（MYLK-AS1-MUT），并將這2個質(zhì)粒分別與mimic NC 或miR-141-3p mimic 共同轉(zhuǎn)染至HGC27 細胞中，由此形成了4 個實驗組：miR-NC+MYLK-AS1-WT 組、miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-WT組、miR-NC+MYLK-AS1-MUT組及miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-MUT組。同時，構(gòu)建STMN1基因的野生型質(zhì)粒（STMN1-WT）和突變型質(zhì)粒（STMN1-MUT），同樣將這2 類質(zhì)粒各自與mimic NC或miR-141-3p mimic共轉(zhuǎn)染至HGC27細胞內(nèi)，從而設(shè)立了以下4 個對照組：miR-NC+STMN1-WT 組、miR-141-3p mimic+STMN1-WT 組、miR-NC+STMN1-MUT 組及miR-141-3p mimic+STMN1-MUT組。轉(zhuǎn)染48 h后，對HGC27細胞中的熒光素酶活性變化進行評價分析[7-8]。

1.2.3 qRT-PCR 檢測LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p 表達 采用Trizol試劑，依據(jù)產(chǎn)品說明書進行操作，從HGC27和GES-1 細胞樣本中提取總RNA。挑選純度和濃度接近2.0的樣本，進而使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將其轉(zhuǎn)化為cDNA，以分析LncRNA MYLK-AS1 和miR-141-3p 的表達。配置包含cDNA、引物、MIX的混合溶液20 μL，置于qRT-PCR儀擴增。qRT-PCR的條件如下：95 ℃持續(xù)10 min，40個循環(huán)（95 ℃持續(xù)15 s，60 ℃持續(xù)1 min）。采用GAPDH 和U6 作為參考基因，通過2?ΔΔCt 技術(shù)評估LncRNA MYLK-AS1與miR-141-3p的相對表達水平。引物如下。miR-141-3p，F(xiàn)：5’-GCGCGTAACACTGTCTGG-3’，R：5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’；LncRNA MYLK-AS1，F(xiàn)：5’-TCTCCTTGTGCAAACCTCC-3’，R：5’-CCCACATTGAGCGAATGCC-3’；U6，F(xiàn)：5’-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3’，R：5’-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3’；GAPDH，F(xiàn)：5’-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3’，R：5’-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3’。

1.2.4 Western blot 檢測STMN1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin 蛋白表達[7-8] 使用RIPA 裂解緩沖液對轉(zhuǎn)染HGC27 細胞進行裂解后，樣本在4 ℃下進行12 000 g 離心15 min。隨后，BCA 蛋白質(zhì)定量試劑盒用于測定總蛋白濃度。等量的蛋白樣品通過10% SDS-PAGE進行分離，并轉(zhuǎn)印至PVDF膜上，維持2 h。PVDF膜隨后用5%脫脂牛奶封閉1 h，室溫條件下。之后，膜在4 ℃條件下與以下初級抗體孵育過夜：E-cadherin（稀釋比1∶2 000）、vimentin（稀釋比1∶2 000）、N-cadherin（稀釋比1∶1 000）、STMN1（稀釋比1∶1 000）和GAPDH（稀釋比1∶1 000）。次日，繼續(xù)在室溫下使膜與辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔二抗孵育2 h。最后，添加ECL 試劑以實現(xiàn)目標條帶的化學(xué)發(fā)光顯色，應(yīng)用Image J軟件對目的條帶的灰度值進行量化分析。

1.2.5 CCK-8法檢測HGC27細胞增殖情況 在96孔板上，每孔接種4×103 個轉(zhuǎn)染HGC27 細胞，并在培養(yǎng)48 h 后，在37 ℃下向每孔添加10 μL CCK-8試劑，孵化4 h。隨后，使用酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）儀器，測定450 nm波長下的吸光度（absorbance，A）值。

1.2.6 流式細胞術(shù)檢測HGC27細胞凋亡 HGC27細胞在6孔板中以每孔4×105細胞的密度種植并培養(yǎng)。24 h培養(yǎng)后，收集浮游細胞，并將這些細胞暴露于含有各5 μL AnnexinV-FITC和PI的混合溶液中，避光孵育15 min。接著，利用流式細胞分析儀準確評估HGC27細胞的凋亡比例[7-8]。

1.2.7 Transwell試驗測定HGC27細胞遷移和侵襲[7-8] 檢測遷移和侵襲性能時，使用了Matrigel基質(zhì)涂層的Transwell室（用于侵襲性評估）和未經(jīng)Matrigel基質(zhì)覆蓋的Transwell室（用于遷移性評估）。對已轉(zhuǎn)染的HGC27細胞進行收集，并將其重新溶解于不含血清的DMEM培養(yǎng)基中。將5×104個/mLHGC27細胞接種在上室，將含有20%FBS的DMEM培養(yǎng)基作為化學(xué)引誘劑添加到Transwell下室。將細胞培養(yǎng)24 h后，用棉簽去除聚碳酸酯膜上表面的細胞，在Transwell室內(nèi)，遷移和侵襲的細胞用4%的多聚甲醛進行固定后，再用0.05%的結(jié)晶紫溶液進行染色。接下來，在顯微鏡下捕獲圖像，并從中隨機選擇5個有代表性的區(qū)域，以便對這些區(qū)域內(nèi)的侵襲或遷移細胞進行計數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

利用SPSS 25.0對全部數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計學(xué)處理。在經(jīng)過正態(tài)性及方差齊性驗證之后，符合要求的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示。2組之間的比較，采用獨立樣本t 檢驗方法；多組數(shù)據(jù)的比較時，首選單因素方差分析。為進一步明確各組之間的差異，使用SNK-q 檢驗進行兩兩比較。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 LncRNA MYLK-AS1靶向調(diào)控miR-141-3p/STMN1軸

使用TargetScan 預(yù)測工具分析顯示，LncRNA MYLKAS1與miR-141-3p，以及miR-141-3p與STMN1之間存在潛在的相互作用結(jié)合位點。在HGC27 細胞中，miR-141-3pmimic+MYLK-AS1-WT組顯示出的熒光素酶活性明顯低于miR-NC+MYLK-AS1-WT組的活性（[ 0.37±0.03） vs.（ 1.06±0.14）]，有明顯差異（q=14.852，Plt;0.001）。另一方面，miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-MUT 組共轉(zhuǎn)染至HGC27 細胞時，所測定的熒光素酶活性為（1.04±0.12），與miR-NC+MYLK-AS1-MUT 組的活性（1.07±0.13）相比并無差異（q=0.656，P=0.968）。

相似地，相較于miR-NC+STMN1-WT組的熒光素酶活性（1.06±0.13），miR-141-3p mimic+STMN1-WT 組HGC27細胞的熒光素酶活性降低至（0.44±0.05）（q=12.463，Plt;0.001）。然而，miR-141-3p mimic+STMN1-MUT組的熒光素酶活性（1.08±0.16）相較于miR-NC+STMN1-MUT組（1.05±0.12）并無差異（q=0.603，P=0.973），見圖1。

2.2 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1在細胞中的表達

相較于GES-1細胞，HGC27細胞內(nèi)LncRNA MYLK-AS1和STMN1 的表達水平均有所上調(diào)（t=6.736、9.321，均P=0.000），而miR-141-3p的表達在HGC27細胞中則表現(xiàn)為下調(diào)（t=15.513，P=0.000），見圖2、3。

2.3 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1蛋白在HGC27細胞中的表達

相較于NC 組和si-NC 組，si-MYLK-AS1 組中LncRNAMYLK-AS1及STMN1的表達水平均下調(diào)（q=34.721、18.924，36.168、19.840，均Plt;0.05），miR-141-3p 的表達量卻上調(diào)（q=14.374、14.209，均Plt;0.05）；與MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor組相比較，si-MYLK-AS1組、si-MYLK-AS1+inhibi?tor NC 組STMN1 水平下降（q=21.366、21.061，均Plt;0.05），miR-141-3p 表達量上升（q=13.878、14.374，均Plt;0.05），見圖4、5。

2.4 沉默LncRNA MYLK-AS1或下調(diào)miR-141-3p對HGC27細胞增殖的影響

與NC 組和si-NC 組相比，si-MYLK-AS1 組在HGC27細胞的A450 nm 值觀測到減少（q=18.152、17.859，均Plt;0.05）。進一步，與si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor 組進行比較時，si-MYLK-AS1 組和si-MYLK-AS1+inhibitor NC 組的A450 nm 值同樣表現(xiàn)出下降（q=15.517、16.102，均Plt;0.05），見圖6。

2.5 沉默LncRNA MYLK-AS1或下調(diào)miR-141-3p對HGC27細胞凋亡的影響

相較于si-MYLK-AS1 處理的組別，未處理的NC 組及si-NC 處理的HGC27 細胞組展現(xiàn)了更低的細胞凋亡率（q=42.675、42.836，均Plt;0.05）；與si-MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor組相比較，si-MYLK-AS1組、si-MYLK-AS1+inhibi?tor NC 組HGC27 細胞凋亡率上升（q=33.004、33.907，均Plt;0.05），見圖7、8。

2.6 沉默LncRNA MYLK-AS1或下調(diào)miR-141-3p對HGC27細胞侵襲、遷移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）相關(guān)蛋白的影響

在NC組和si-NC組中，相比于si-MYLK-AS1組，HGC27細胞的遷移和侵襲能力及N-cadherin和Vimentin蛋白的水平有所增加（q=14.726、10.898、25.852、17.000 和14.033、11.587、24.961、17.667，均Plt;0.05），而E-cadherin 蛋白水平則表現(xiàn)為下降（q=23.668、24.083，均Plt;0.05）。另一方面，與si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor組相比，si-MYLK-AS1組和si-MYLK-AS1+inhibitor NC組在HGC27細胞遷移和侵襲能力及N-cadherin 和Vimentin 蛋白水平上明顯下降（q=6.207、4.061、14.263、14.667和7.656、3.546、15.601、16.000，Plt;0.05），而E-cadherin 蛋白水平則呈現(xiàn)上升趨勢（q=17.024、17.440，均Plt;0.05），見圖9～13。

3 討論

近幾年，胃癌發(fā)病率及死亡率在持續(xù)增長，研究報道稱，胃癌患者死亡率高的主要原因是發(fā)生轉(zhuǎn)移[9]。有大量研究報道稱，lncRNA可以調(diào)控胃癌進展。例如，LINC01116可以促進胃癌細胞增殖，抑制胃癌細胞凋亡[10]。LncRNA MYLK-AS1是各種人類癌癥中的癌基因，LncRNA MYLK-AS1沉默對腎母細胞瘤細胞體內(nèi)致瘤能力起抑制作用[11]。LncRNAMYLK-AS1上調(diào)可以促進肝癌腫瘤進展和血管生成[12]。近期，還有研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA MYLK-AS1沉默抑制胃癌細胞增殖、細胞周期、遷移和侵襲[4]。由此可見，LncRNA MYLK-AS1可能是胃癌分子診斷的潛在標志物。本項研究揭示了在HGC27細胞中，LncRNA MYLK-AS1的表達水平較高，暗示LncRNAMYLK-AS1有可能在胃癌的發(fā)展過程中起促進作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)，當LncRNA MYLK-AS1被沉默之后，HGC27細胞的A450 nm 值降低，凋亡率提高，這表明通過抑制LncRNA MYLK-AS1的表達，可以抑制胃癌細胞的增殖并促進其凋亡，從而可能對胃癌的發(fā)展產(chǎn)生抑制作用。

在胃癌細胞的轉(zhuǎn)移和侵襲過程中，EMT 被激活。在EMT中，上皮細胞失去其特有的上皮特性，例如E-cadherin的下調(diào)，而獲得間質(zhì)細胞的特征，表現(xiàn)為N-cadherin和Vimentin的上調(diào)，并激活一系列下游轉(zhuǎn)錄因子，如Snail、Slug、Twist等[13]。通過EMT過程，胃癌細胞獲得了向周圍基質(zhì)遷移和侵入的能力，之后可以通過血液和淋巴管擴散到相鄰組織[14]。

鑒于抑制EMT對防止胃癌進展至關(guān)重要，本研究所揭示的結(jié)果表明，在沉默LncRNA MYLK-AS1后，HGC27胃癌細胞的遷移和侵襲潛能明顯減弱，表現(xiàn)為遷移和侵襲細胞的數(shù)量減少，同時Ncadherin和Vimentin這2種間質(zhì)標志蛋白的表達下調(diào)。另一方面，E-cadherin這一上皮標志蛋白的表達水平則得到了提升。據(jù)此可以推斷，沉默LncRNAMYLK-AS1能夠有效阻止胃上皮細胞向間質(zhì)表型轉(zhuǎn)變，從而有效限制胃癌細胞向周圍組織的擴散和侵入，最終有助于抑制胃癌病情的惡化和發(fā)展。

生物信息學(xué)分析揭示了LncRNA MYLK-AS1與miR-141-3p 之間存在結(jié)合位點。此外，miR-141-3p在肺癌中的低表達已被證實具有臨床意義。例如，Chen DL 等[15]的研究表明，降低miR-141-3p的表達可以促進胃癌的進展和化療耐藥性，指出了miR-141-3p 在腫瘤發(fā)展中的潛在作用。Zhou YC等[16]發(fā)現(xiàn)，miR-141-3p不僅可限制胃癌細胞遷移和侵襲，還抑制正常成纖維細胞向癌癥相關(guān)成纖維細胞的轉(zhuǎn)變。以上研究均表明上調(diào)miR-141-3p可以對胃癌的發(fā)展起到抑制作用。本研究所揭示的數(shù)據(jù)指出，miR-141-3p在HGC27細胞系中呈現(xiàn)低表達狀態(tài)。在對miR-141-3p的功能抑制后，發(fā)現(xiàn)其削弱了LncRNA MYLK-AS1對胃癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的抑制效應(yīng)。這一現(xiàn)象暗示，LncRNAMYLK-AS1 可能借助上調(diào)miR-141-3p 的表達途徑，來有效地阻抑胃癌的惡性進展。另外，通過生物信息學(xué)手段已確認miR-141-3p與STMN1基因存在相互作用的結(jié)合位點，這為進一步理解兩者間的調(diào)控關(guān)系提供了依據(jù)。有研究報道稱，STMN1的異常表達可能通過影響EMT促進腫瘤進展[17]。STMN1基因沉默可以抑制胃癌細胞增殖、遷移和侵襲[18]。

研究揭示了STMN1在胃癌細胞中表達水平偏高，而在對HGC27細胞進行LncRNA MYLK-AS1沉默處理后，miR-141-3p表達量增加，同時STMN1蛋白水平下降。反之，如果miR-141-3p表達下調(diào)，則STMN1蛋白水平上升，上述實驗結(jié)果揭示了這樣一個機制可能性：即LncRNA MYLK-AS1可能通過介導(dǎo)miR-141-3p的上調(diào)作用，間接導(dǎo)致STMN1表達下調(diào)，這一系列連鎖反應(yīng)可能對HGC27細胞的增殖潛能、EMT進程及遷移和侵襲能力產(chǎn)生抑制效應(yīng)，并且有利于促進此類細胞發(fā)生凋亡。此外，雙熒光素酶實驗進一步確認了LncRNA MYLK-AS1直接靶向調(diào)控miR-141-3p與STMN1之間的相互作用。

綜上所述，通過沉默LncRNA MYLK-AS1，可能會導(dǎo)致miR-141-3p 的表達水平提升，進而抑制STMN1蛋白的表達。這一連串的分子事件有助于有效抑制HGC27胃癌細胞的增殖、阻斷EMT進程，以及減少細胞的遷移和侵襲能力，同時促進細胞凋亡。鑒于這些發(fā)現(xiàn)，本課題組計劃在未來的研究中使用小鼠模型進行體內(nèi)實驗，以進一步驗證這些結(jié)果和探索LncRNA MYLK-AS1 在胃癌發(fā)展中的作用機制。

參考文獻

[1] Sung H，F(xiàn)erlay J，Siegel RL，et al. Global cancer statistics 2020：

GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 can?

cers in 185 countries[J]. CA Cancer J Clin，2021，71（3）：209-249．

[2] Tan ZY. Recent advances in the surgical treatment of advanced

gastric cancer：a review[J]. Med Sci Monit，2019，25：3537-3541．

[3] Yang YJ，Luo S，Wang LS. Effects of lncRNA-HEIH on prolifera?

tion，apoptosis and invasion of gastric cancer cells[J]. Eur Rev Med

Pharmacol Sci，2020，24（18）：9400-9407．

[4] Luo J，Xiang HF. LncRNA MYLK-AS1 acts as an oncogene by epi?

genetically silencing large tumor suppressor 2（LATS2） in gastric cancer

[J]. Bioengineered，2021，12（1）：3101-3112．

[5] Liu Y，Lin WJ，Dong YY，et al. Long noncoding RNA HCG18 upregulates

the expression of WIPF1 and YAP/TAZ by inhibiting miR-

141-3p in gastric cancer[J]. Cancer Med，2020，9（18）：6752-6765．

[6] Bai TY，Yokobori T，Altan B，et al. High STMN1 level is associ?

ated with chemo-resistance and poor prognosis in gastric cancer patients

[J]. Br J Cancer，2017，116（9）：1177-1185．

[7] 魏丕喜，鄧 玉，任雙雙，等. lncRNA FGD5-AS1 調(diào)節(jié)miR-

129-5p/SOX4軸對子宮內(nèi)膜癌細胞惡性生物行為的影響[J]. 中國優(yōu)

生與遺傳雜志，2023，31（12）：2413-2419．

Wei PX，Deng Y，Ren SS，et al. Impact of lncRNA FGD5-AS1 on the

malignant biological behavior of endometrial cancer cells via regulation

of miR-129-5p/SOX4 axis[J]. Chin J Birth Health Hered，2023，31

（12）：2413-2419．

[8] 王金禮，陳登峰. 沉默lncRNA MCF2L-AS1 通過miR-138-5p/

AnxA2 軸抑制乳腺癌細胞增殖、遷移和侵襲[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，

2024，32（2）：240-248．

Wang JL，Chen DF. Silencing lncRNA MCF2L-AS1 inhibits prolifera?

tion，migration and invasion of breast cancer cells via miR-138-5p/

AnxA2 axis[J]. J Mod Oncol，2024，32（2）：240-248．

[9] Li Y，Yan XL，Shi JJ，et al. Aberrantly expressed miR-188-5p pro?

motes gastric cancer metastasis by activating Wnt/β-catenin signaling

[J]. BMC Cancer，2019，19（1）：505．

[10] Chen J，Yuan ZH，Hou XH，et al. LINC01116 promotes the prolif?

eration and inhibits the apoptosis of gastric cancer cells[J]. Eur Rev Med

Pharmacol Sci，2020，24（4）：1807-1814．

[11] Zhu SB，Zhang JQ，Gao XF，et al. Silencing of long noncoding

RNA MYLK-AS1 suppresses nephroblastoma via down-regulation of

CCNE1 through transcription factor TCF7L2[J]. J Cell Physiol，2021，

236（8）：5757-5770．

[12] Teng F，Zhang JX，Chang QM，et al. LncRNA MYLK-AS1 facili?

tates tumor progression and angiogenesis by targeting miR-424-5p/

E2F7 axis and activating VEGFR-2 signaling pathway in hepatocellular

carcinoma[J]. J Exp Clin Cancer Res，2020，39（1）：235．

[13] Liu MY，Zhang MK，Yin HS. Linc-ROR promotes invasion and

metastasis of gastric cancer by activating epithelial-mesenchymal transi?

tion[J]. Indian J Pathol Microbiol，2022，65（3）：545-550．

[14] Yonemura Y，Ishibashi H，Mizumoto A，et al. The development of

peritoneal metastasis from gastric cancer and rationale of treatment ac?

cording to the mechanism[J]. J Clin Med，2022，11（2）：458．

[15] Chen DL，Sheng H，Zhang DS，et al. The circular RNA circDLG1

promotes gastric cancer progression and anti-PD-1 resistance through

the regulation of CXCL12 by sponging miR-141-3p[J]. Mol Cancer，

2021，20（1）：166．

[16] Zhou YC，Zhong JH，Gong FS，et al. MiR-141-3p suppresses gas?

tric cancer induced transition of normal fibroblast and BMSC to cancerassociated

fibroblasts via targeting STAT4[J]. Exp Mol Pathol，2019，

107：85-94．

[17] Ke B，Guo XF，Li N，et al. Clinical significance of Stathmin1 ex?

pression and epithelial-mesenchymal transition in curatively resected

gastric cancer[J]. Mol Clin Oncol，2019，10（2）：214-222．

[18] Shu F，Zou XQ，Tuo H，et al. Stathmin gene silencing suppresses

proliferation，migration and invasion of gastric cancer cells via AKT/

sCLU and STAT3 signaling[J]. Int J Oncol，2019，54（3）：1086-1098．

（責任編輯：曾 玲）