摘要：

目的" 探討H3.3G34W、p63及SATB2在骨巨細(xì)胞瘤（giant cell tumor of bone，GCTB）中的表達(dá)情況及其聯(lián)合應(yīng)用對(duì)GCTB的診斷作用和價(jià)值。方法" 收集西安交通大學(xué)附屬紅會(huì)醫(yī)院病理科2020年至2022年診斷的54例GCTB、83例非骨巨細(xì)胞瘤（non-giant cell tumor of bone，NGCTB）（包含14例動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、16例軟骨母細(xì)胞瘤和53例非骨化性纖維瘤）患者的樣本和病歷資料，采用免疫組織化學(xué)EliVision法檢測(cè)H3.3G34W、p63及SATB2的表達(dá)情況。通過(guò)χ2檢驗(yàn)判斷H3.3G34W、p63及SATB2的陽(yáng)性率在各組間是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；通過(guò)Logistic回歸分析建立包括 H3.3G34W、p63及SATB2的聯(lián)合診斷模型，通過(guò)受試者工作特征（ROC）曲線分析評(píng)價(jià)模型的診斷價(jià)值。結(jié)果" H3.3G34W、p63及SATB2在GCTB組中陽(yáng)性率分別為81.5%、90.7%、92.6%；在NGCTB組中陽(yáng)性率分別為2.4%、28.9%、62.7%。與NGCTB組相比，GCTB組患者年齡顯著較大［（41.222±14.849） vs." （16.566±9.439）；Plt;0.001］，女性比男性患病率更高（51.9% vs." 48.1%，Plt;0.001）。與NGCTB組相比，GCTB組中H3.3G34W（81.5% vs." 2.4%，Plt;0.001）；p63（90.7% vs." 28.9%，Plt;0.001）和SATB2（92.6% vs." 62.7%，Plt;0.001）的陽(yáng)性率更高。單因素Logistic回歸分析構(gòu)建單因素預(yù)測(cè)模型，同時(shí)行ROC曲線分析，表明年齡（AUC=92.9%，Plt;0.001）、性別（AUC=64.5%，P=0.004）、H3.3G34W陽(yáng)性率（AUC=89.5%，Plt;0.001）、p63陽(yáng)性率（AUC=80.9%，Plt;0.001）、SATB2陽(yáng)性率（AUC=65.0%，P=0.003）是GCTB診斷的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。進(jìn)一步的多因素Logistic回歸分析構(gòu)建混合預(yù)測(cè)模型，并行ROC曲線分析，發(fā)現(xiàn)混合模型展現(xiàn)出比單因素模型更好的預(yù)測(cè)價(jià)值（AUC=98.4%，Plt;0.001）。結(jié)論" H3.3G34W、p63及SATB2是有效診斷GCTB的分子標(biāo)記物，且三者聯(lián)合應(yīng)用更能提高GCTB的診斷預(yù)測(cè)效能。

關(guān)鍵詞：骨巨細(xì)胞瘤（GCTB）；免疫組織化學(xué)；診斷；H3.3G34W；p63；SATB2

中圖分類號(hào)：R730.2；R738.1""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.7652/jdyxb202403017

收稿日期：2023-12-20" 修回日期：2024-02-06

基金項(xiàng)目：陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No. 2022JM-507）;國(guó)家工信部與國(guó)家衛(wèi)健委聯(lián)合項(xiàng)目（No. 2021YZ-166）

Supported by the Natural Science Foundation of Shaanxi Province （No. 2022JM-507） and Joint Project of Ministry of Industry and Information Technology and National Health Commission （No. 2021YZ-166）

通信作者： 周黨俠，教授. E-mail：253299433@qq.com； 李曉菊，副主任醫(yī)師. E-mail：583332645@qq.com

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//kns.cnki.net/kcms/detail/61.1399.R.20240325.1105.002.html （2024-04-16）

Diagnostic value of H3.3G34W，p63 and SATB2 immunohistochemical

staining combined in giant cell tumor of bone

ZHANG Nan1，2， L Moqi1， TONG Zhichao2， LI Haiyan2， WANG Dan2，

YANG Wenyi2， LI Xiaoju2， ZHOU Dangxia1

（1. Department of Pathology， Xi’an Jiaotong University Health Science Center，

Xi’an 710061; 2. Department of Pathology， Honghui Hospital Affiliated to

Xi’an Jiaotong University， Xi’an 710054， China）

ABSTRACT：

Objective" To investigate the expressions of H3.3G34W， p63 and SATB2 in giant cell tumor of bone （GCTB） and the effect and value of their combined application in the diagnosis of GCTB. Methods" We collected the samples and medical records of 54 cases of GCTB and 83 cases of non-giant cell tumor of bone （14 cases of aneurysmal bone cyst， 16 cases of chondroblastoma and 53 cases of non-ossifying fibroma） diagnosed between 2020 and 2022 in the Department of Pathology of Honghui Hospital Affiliated to Xi’an Jiaotong University. The expressions of H3.3G34W， p63 and SATB2 were detected by EliVision immunohistochemical method. χ2 test was used to determine whether there are significant differences in the positive rates of H3.3G34W， p63 and SATB2 among all the groups. The combined diagnostic model including H3.3G34W， p63 and SATB2 was established by Logistic"" regression analysis， and the diagnostic value of the model was evaluated by ROC curve analysis. Results" The positive rates of H3.3G34W， p63 and SATB2 in GCTB group were 81.5%， 90.7% and 92.6%， respectively; the positive rates in NGCTB group were 2.4%， 28.9% and 62.7%. Compared with NGCTB group， the age of GCTB group was significantly older ［（41.222±14.849） vs. （16.566±9.439）， Plt;0.001］， and the prevalence was higher in women than in men （51.9% vs." 48.1%， Plt;0.001）. In addition， compared with the NGCTB group， the positive rates of H3.3G34W （81.5% vs." 2.4%， Plt;0.001）， p63 （90.7% vs. 28.9%， Plt;0.001） and SATB2 （92.6% vs." 62.7%， Plt;0.001） were significantly higher in the GCTB group. Univariate regression analysis built a univariate prediction model and ROC curve analysis showed that age （AUC=92.9%， Plt;0.001）， sex （AUC=64.5%， P=0.004）， H3.3G34W positive rate （AUC=89.5%， Plt;0.001）， p63 positive rate （AUC=80.9%， Plt;0.001） and SATB2 positive rate （AUC=65.0%， P=0.003） were independent predictors of diagnosis of giant cell tumor of bone. Multivariate regression analysis （Logistic） constructed a hybrid prediction model. ROC curve analysis suggested that the hybrid model showed better prediction value than the single factor model （AUC=98.4%， Plt;0.001）. Conclusion" H3.3G34W， p63 and SATB2 are effective molecular markers for the diagnosis of GCTB， and their combined application can improve the prediction efficiency of the diagnosis of GCTB.

KEY WORDS： giant cell tumor of bone （GCTB）; immunohistochemistry; diagnosis; H3.3G34W; p63; SATB2

骨巨細(xì)胞瘤（giant cell tumor of bone，GCTB） 由成片腫瘤性卵圓形單核細(xì)胞和均勻分布的破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞構(gòu)成，局灶可見(jiàn)梭形細(xì)胞區(qū)域，是一種原發(fā)性骨腫瘤，具有局部復(fù)發(fā)及侵襲性，偶有轉(zhuǎn)移的中間型骨腫瘤。腫瘤多見(jiàn)于20～45歲中青年，女性稍多，好發(fā)于長(zhǎng)骨干骺端，占原發(fā)骨腫瘤的15%［1］。股骨遠(yuǎn)端、脛骨近端、肱骨近端、橈骨遠(yuǎn)端為最常見(jiàn)的發(fā)生部位。在脊柱，最常累及骶骨及椎體，后者依次為腰椎、胸椎及頸椎，扁骨很少累及，不超過(guò)5%的GCTB累及手足短管狀骨的骨端，臨床表現(xiàn)為局部疼痛及腫脹、關(guān)節(jié)活動(dòng)受限，少數(shù)可并發(fā)病理性骨折。資料報(bào)道 GTCB 術(shù)后復(fù)發(fā)率可達(dá)4%～50%。多數(shù)情況下GCTB影響成年人的長(zhǎng)骨骨骺［2］。H3.3G34W是組蛋白H3.3由位于第1號(hào)染色體上的H3F3A基因和第17號(hào)染色體上的H3F3B基因編碼。超過(guò)90%的GCTB存在H3F3A基因上的G34位點(diǎn)突變，其中絕大多數(shù)突變形式為G34W。p63是抑癌基因P53的同源性基因，定位于染色體3q27-28。p63可能與GCTB的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且可能是GCTB的一種診斷標(biāo)記物。SATB2富含AT序列結(jié)合蛋白2，也稱為DNA結(jié)合蛋白SATB2，該蛋白在人類由SATB2基因編碼［3］，是一種高度保守的核基質(zhì)蛋白，主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化。骨骼發(fā)育和骨母細(xì)胞的分化是SATB2與多種調(diào)節(jié)基因和轉(zhuǎn)錄因子相互作用共同完成的［4］，所以SATB2與骨發(fā)育及成骨之間具有密切的關(guān)系。目前，GCTB的病理診斷除了依靠鏡下的HE形態(tài)學(xué)，還需結(jié)合年齡、部位及影像學(xué)分析等。典型的GCTB較易明確診斷，但仍需注意某些特殊情況。例如病變的繼發(fā)性改變以及用藥后形態(tài)的變化，導(dǎo)致病變呈現(xiàn)不典型性，或是鏡下部分組織學(xué)形態(tài)出現(xiàn)相類似、不易鑒別的重疊區(qū)域，不易與動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、軟骨母細(xì)胞瘤及非骨化型纖維瘤等腫瘤進(jìn)行鑒別，容易造成誤診［5-6］。因此，明確診斷GCTB及鑒別診斷對(duì)于指導(dǎo)患者治療以及改善預(yù)后至關(guān)重要。采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)H3.3G34W抗體在GCTB及與其具有相似形態(tài)學(xué)的骨腫瘤（動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、軟骨母細(xì)胞瘤和非骨化性纖維瘤）中的表達(dá)情況，并與p63及SATB2指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用及比較，探討在GCTB與NGCTB診斷及鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)，H3.3G34W、p63及SATB2分別在GCTB和NGCTB中的陽(yáng)性率差異顯著［4，6-7］。然而，上述指標(biāo)單獨(dú)使用時(shí)的敏感性和/或特異性并不十分理想，尤其SATB2在單獨(dú)使用時(shí)，雖具有很強(qiáng)的敏感性但并不特異［4］。此外，由于制片過(guò)程中的一些處理方式，如骨組織脫鈣或強(qiáng)酸浸潤(rùn)，可能導(dǎo)致上述指標(biāo)單獨(dú)使用時(shí)的穩(wěn)定性減弱［6］。本研究旨在探索H3.3G34W、p63及SATB2單獨(dú)以及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)GCTB的診斷效能，尋找更有效的標(biāo)志物（組合）彌補(bǔ)GCTB的診斷缺陷。

1" 材料與方法

1.1" 臨床資料

收集西安交通大學(xué)附屬紅會(huì)醫(yī)院病理科2020年至2022年的穿刺活檢、切開(kāi)活檢、病灶刮除及手術(shù)瘤段切除標(biāo)本的石蠟包埋組織、臨床病史、大體標(biāo)本資料及影像學(xué)資料，包含54例GCTB以及83例NGCTB（14例動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、16例軟骨母細(xì)胞瘤和53例非骨化性纖維瘤）。

1.2" 標(biāo)本處理及病理診斷

所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，質(zhì)硬標(biāo)本經(jīng)98%甲酸與10%中性甲醛以1∶1配制的脫鈣液脫鈣處理，常規(guī)組織脫水、石蠟包埋、3 μm切片，HE染色，光鏡觀察，骨組織標(biāo)本采用脫鈣處理；所有病例均按第五版WHO骨和軟組織腫瘤分類的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)，所有病例均經(jīng)3位醫(yī)師閱片并結(jié)合臨床影像資料綜合分析確診。

1.3" 免疫組織化學(xué)

行EliVision 兩步法免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)H3.3G34W、p63及SATB2的表達(dá)，所用一抗H3.3G34W兔單克隆抗體（clone SD350）、p63鼠單克隆抗體（clone 4A4）及SATB2兔多克隆抗體（clone OTI5H7）購(gòu)自廈門通靈生物醫(yī)藥科技有限公司，二抗亦購(gòu)自廈門通靈生物醫(yī)藥科技有限公司，同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照。

1.4" 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，使用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示并行χ2檢驗(yàn)，影響因素預(yù)測(cè)模型通過(guò)Logistic回歸分析構(gòu)建，受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析評(píng)估其預(yù)測(cè)價(jià)值。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" 結(jié)" 果

2.1" 臨床資料

GCTB 54例，男性26例，女性28例，平均年齡（41.222±14.849）歲。NGCTB 83例，男性64例，女性19例，平均年齡（16.566±9.439）歲。年齡在GCTB和NGCTB兩組間差異明顯，骨巨組年齡顯著較大（Plt;0.001）。性別在GCTB和NGCTB兩組間差異同樣明顯（Plt;0.001），GCTB的女性患病率（51.9%）顯著高于男性（48.1%，P＜0.001）。具體結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2" GCTB的臨床特征

2.2.1" 影像學(xué)特點(diǎn)

2.2.2" 標(biāo)本大體表現(xiàn)

A：病變區(qū)膨脹性生長(zhǎng)（黃箭頭所示），似囊性變，骨皮質(zhì)變薄（紅箭頭所示）；B：病變區(qū)偏心性膨脹，骨皮質(zhì)變?。t箭頭所示），病變區(qū)呈灰黃灰紅色（黃箭頭所示）；C：未剖開(kāi)的股骨遠(yuǎn)端瘤段切除標(biāo)本；D：瘤組織灰紅灰黃色，膨脹性生長(zhǎng)，可見(jiàn)出血區(qū)（黃箭頭所示），骨皮質(zhì)破壞（紅箭頭所示）；E：未剖開(kāi)股骨遠(yuǎn)端瘤段切除標(biāo)本；F：瘤組織灰黃色，侵襲性生長(zhǎng)，充滿髓腔（黃箭頭所示），骨皮質(zhì)破壞（紅箭頭所示）。

2.2.3" 組織學(xué)表現(xiàn)

2.2.4" 免疫組織化學(xué)染色的結(jié)果判定及特點(diǎn)

A、B：HE（×40）GCTB由成片圓形、卵圓形單核腫瘤細(xì)胞和均勻分布的破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞構(gòu)成；C：HE（×40）GCTB瘤組織內(nèi)可見(jiàn)含鐵血黃素沉著，破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞均勻分布；D、E：HE（×100）GCTB由成片卵圓形單核腫瘤細(xì)胞和均勻分布的破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞構(gòu)成；F：HE（×100）GCTB少量含鐵血黃素沉著；G：HE（×40）GCTB伴有繼發(fā)性動(dòng)脈瘤樣骨囊腫改變的區(qū)域，呈囊壁樣結(jié)構(gòu)伴出血，散在多核巨細(xì)胞；H：HE（×100）GCTB繼發(fā)出現(xiàn)反應(yīng)骨形成；I：HE（×40）GCTB繼發(fā)出現(xiàn)纖維化的表現(xiàn)，梭形細(xì)胞呈編織狀排列，需與NGCTB中非骨化性纖維瘤相鑒別；J、K：HE（×100）NGCTB中非骨化性纖維瘤鏡下可見(jiàn)梭形細(xì)胞區(qū)域，呈編織狀排列，散在多核巨細(xì)胞；L、M：HE（×100）NGCTB中軟骨母細(xì)胞瘤的瘤細(xì)胞由圓形或卵圓形細(xì)胞構(gòu)成，散在多核巨細(xì)胞，局灶出血，可見(jiàn)淡藍(lán)色的軟骨樣基質(zhì)，此瘤細(xì)胞形態(tài)與GCTB中單核腫瘤細(xì)胞尤為相似，需進(jìn)行鑒別；N：HE（×100）NGCTB中動(dòng)脈瘤樣骨囊腫會(huì)出現(xiàn)與GCTB相類似的實(shí)性區(qū)域，瘤細(xì)胞由卵圓形及梭形細(xì)胞構(gòu)成，散在多核巨細(xì)胞，需與GCTB鑒別；O：HE（×100）動(dòng)脈瘤樣骨囊腫鏡下可見(jiàn)瘤樣增生之纖維組織呈囊壁樣改變的區(qū)域，散在多核巨細(xì)胞等；P：HE（×200）GCTB單核細(xì)胞及多核巨細(xì)胞；Q：HE（×400）GCTB單核細(xì)胞及多核巨細(xì)胞；R：HE（×200）NGCTB中軟骨母細(xì)胞、軟骨基質(zhì)及多核巨細(xì)胞；S：HE（×400）NGCTB多核巨細(xì)胞；T：HE（×200）NGCTB中非骨化性纖維瘤可見(jiàn)梭形細(xì)胞區(qū)域及多核巨細(xì)胞；U：HE（×400）多核巨細(xì)胞；V：HE（×200）NGCTB中動(dòng)脈瘤樣骨囊腫可見(jiàn)囊壁樣結(jié)構(gòu)、擴(kuò)張血管及多核巨細(xì)胞；W：HE（×400）NGCTB散在多核巨細(xì)胞。

2.3" Logistic回歸分析

以診斷GCTB為因變量，以性別、年齡、H3.3G34W突變抗體、p63及SATB2的組化結(jié)果為自變量，進(jìn)行單因素Logistic 回歸分析的結(jié)果顯示，性別（OR=0.276，P=0.001）、年齡（OR=1.165，Plt;0.001）、H3.3G34W（OR=178.200，Plt;0.001）、p63（OR=24.092，Plt;0.001）及SATB2（OR=7.452，Plt;0.001）是獨(dú)立影響因素（表2）。進(jìn)一步的多因素Logistic 回歸構(gòu)建的混合預(yù)測(cè)模型同樣展示出有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的預(yù)測(cè)能力（Plt;0.001，表2）。

2.4" ROC曲線分析

3" 討" 論

GCTB由成片腫瘤性卵圓形單核細(xì)胞和均勻分布的破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞構(gòu)成，局灶可見(jiàn)梭形瘤性細(xì)胞區(qū)域。GCTB是一種間質(zhì)來(lái)源、富含特征性多核巨細(xì)胞的交界性腫瘤，是一種有局部復(fù)發(fā)及侵襲性、偶有轉(zhuǎn)移的原發(fā)性骨腫瘤、以局部骨質(zhì)溶解為主要臨床表現(xiàn)的一類病變。巨細(xì)胞骨腫瘤鏡下的形態(tài)學(xué)特征不易與軟骨母細(xì)胞瘤、動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、非骨化性纖維瘤、巨細(xì)胞性修復(fù)性肉芽腫、甲狀旁腺功能亢進(jìn)引起的棕色瘤和腱鞘巨細(xì)胞瘤等相區(qū)分，特別是對(duì)于組織量較少的穿刺標(biāo)本［7］及一些不典型病例，受到組織量的限制及個(gè)人的主觀局限性，會(huì)增加診斷難度及誤診率。因此，發(fā)現(xiàn)有效的特異性標(biāo)記物，為GCTB的診斷與鑒別診斷提供新的幫助，具有十分重要的臨床病理意義。本研究發(fā)現(xiàn)，H3.3G34W、p63及SATB2在GCTB和NGCTB的腫瘤之間表達(dá)具有顯著差異。單因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，H3.3G34W、p63及SATB2、性別、年齡都可作為GCTB的有效診斷標(biāo)志物。其中男性比女性患病概率低72.4%；年齡每增加1歲，患病概率增加16.5%；H3.3G34W陽(yáng)性患者患病概率比陰性患者高177.2倍；p63陽(yáng)性患者患病概率比陰性患者高23.092倍；SATB2陽(yáng)性患者患病概率比陰性患者高6.452倍。另外本研究首次通過(guò)多因素Logistic回歸分析構(gòu)建了聯(lián)合預(yù)測(cè)模型，驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)其預(yù)測(cè)效能較高（AUC=0.984），且高于各個(gè)預(yù)測(cè)因子的單獨(dú)預(yù)測(cè)效能。

H3.3G34W是組蛋白H3.3由位于第1號(hào)染色體上的H3F3A基因和第17號(hào)染色體上的H3F3B基因編碼。研究發(fā)現(xiàn)，超過(guò)90%的GCTB存在H3F3A基因上的G34位點(diǎn)突變［8］，其中絕大多數(shù)突變形式為p.Gly34Trp（G34W）［9］。文獻(xiàn)報(bào)道H3.3G34W與骨發(fā)育及成骨之間具有密切的關(guān)系［4，10］，約90%的GCTB發(fā)生H3.3中的甘氨酸34到色氨酸（G34W）的替換。KHAZAEI等［11］通過(guò)分析患者樣本和針對(duì)H3.3G34W的CRISPR/cas9編輯的腫瘤衍生細(xì)胞的表觀基因組、轉(zhuǎn)錄組和分泌蛋白組，發(fā)現(xiàn)突變體H3.3上H3.3 K36me3的丟失改變了H3K27me3標(biāo)記的抑制性沉積，從基因間區(qū)到基因間區(qū)，超過(guò)了H3.3沉積區(qū)域。這促進(jìn)了其他染色質(zhì)標(biāo)記的重新分配和異常轉(zhuǎn)錄，改變了間充質(zhì)祖細(xì)胞的命運(yùn)，阻礙了分化，說(shuō)明H3.3G34W突變可能是腫瘤形成的必要條件［12-13］。單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究顯示，H3.3G34W間質(zhì)細(xì)胞再現(xiàn)了從SPP1+成骨細(xì)胞樣祖細(xì)胞向ACTA2+肌成纖維細(xì)胞樣祖細(xì)胞的腫瘤軌跡，ACTA2+肌成纖維細(xì)胞樣祖細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)配體，預(yù)計(jì)會(huì)聚集和激活破骨細(xì)胞［11］。H3.3G34W通過(guò)維持成骨細(xì)胞樣祖細(xì)胞的轉(zhuǎn)化狀態(tài)導(dǎo)致GCTB，從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、巨大破骨細(xì)胞的病理性聚集和骨破壞［11］。H3.3G34W在GCTB中陽(yáng)性表達(dá)，且不存在于與其組織學(xué)結(jié)構(gòu)相似的其他疾病中，因此H3.3G34W是一個(gè)用于診斷、鑒別GCTB的可靠標(biāo)記物［6］。既往研究表明，高達(dá)96% GCTB具有H3.3的基因突變［14-15］，其中約90%的GCTB存在G34W位點(diǎn)的突變［16-18］。AMARY等［19］采用免疫組織化學(xué)法對(duì)235例GCTB患者進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示90.6%的GCTB表達(dá)H3.3G34W突變蛋白。白岳青等［2］的研究發(fā)現(xiàn)，H3.3G34W免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性率為87.5%；王璇等［6］的研究發(fā)現(xiàn)H3.3G34W免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性率83.1%。這與本研究得到的結(jié)果相似（GCTB H3.3G34W陽(yáng)性率表達(dá)81.4%）。

p63是抑癌基因P53的同源性基因，定位于染色體3q27-28。是乳腺癌和前列腺癌的有效診斷標(biāo)志物。乳腺中表達(dá)于所有正常乳腺的肌上皮細(xì)胞，部分表達(dá)于導(dǎo)管增生細(xì)胞，極少量表達(dá)于原位乳腺癌，在浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中無(wú)表達(dá)。p63的缺失表達(dá)與乳腺導(dǎo)管癌的進(jìn)程有一定的相關(guān)性［20］。另外，p63是一種前列腺基底細(xì)胞的標(biāo)記物，在正常前列腺或前列腺增生組織中基底細(xì)胞核染色清晰，但在絕大多前列腺惡性腫瘤中不表達(dá)，病理診斷中主要用于乳腺、前列腺等腫瘤中肌上皮細(xì)胞的檢測(cè)，有助于病變性質(zhì)的判斷［7］。近年研究發(fā)現(xiàn)，p63可能與GCTB的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且可能是GCTB的一種診斷標(biāo)記物［21-22］。GCT基質(zhì)細(xì)胞（GCTSCs）是該腫瘤的主要腫瘤細(xì)胞，LAU等［23］在GCTSCs中觀察到p63的過(guò)度表達(dá)，提示p63可能通過(guò)不同的機(jī)制參與GCTB的發(fā)生。LEE等［24］通過(guò)基因表達(dá)譜證實(shí)了LAU的發(fā)現(xiàn)，p63在大多數(shù)GCTB中的高表達(dá)。同時(shí)，LEE等［24］還通過(guò)免疫組化證實(shí)大約三分之二的GCTB中可以看到強(qiáng)烈的p63核免疫反應(yīng)性，而在其他骨和軟組織腫瘤中不常見(jiàn)，說(shuō)明p63可能作為GCTB的標(biāo)記物可能有助于GCTB的組織學(xué)診斷。王璇等［6］的研究顯示，p63在GCTB中表達(dá)陽(yáng)性率71.1%。本研究顯示，GCTB表達(dá)p63達(dá)到90.7%，這個(gè)數(shù)據(jù)比文獻(xiàn)中顯示的數(shù)據(jù)偏高。這種差異可能與數(shù)據(jù)量、年齡、病變部位等因素相關(guān)，將來(lái)需繼續(xù)擴(kuò)大樣本量，進(jìn)一步驗(yàn)證。

SATB2富含AT序列結(jié)合蛋白2，也稱為DNA結(jié)合蛋白SATB2。該蛋白在人類由SATB2基因編碼［3］，是一種高度保守的核基質(zhì)蛋白，主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化。骨骼發(fā)育和骨母細(xì)胞的分化是SATB2與多種調(diào)節(jié)基因和轉(zhuǎn)錄因子相互作用共同完成的［4］，所以SATB2與骨發(fā)育及成骨之間具有密切的關(guān)系。GCTB腫瘤間質(zhì)細(xì)胞含有組蛋白H3.3突變，具有成骨前特性，因此表達(dá)SATB2［8］。張文等［4］的研究顯示，GCTB表達(dá)STAB2達(dá)到100%，且表達(dá)在單核細(xì)胞，提示腫瘤性單核細(xì)胞可能具有原始骨母細(xì)胞表型。本研究顯示，GCTB表達(dá)STAB2達(dá)到92.5%，這與張文的研究結(jié)果相似。

目前，有文獻(xiàn)指出H3.3G34W［2，6，19］、SATB2［4］、p63［21-22］可分別作為GCTB的獨(dú)立診斷標(biāo)記物，但這3個(gè)標(biāo)記物共同聯(lián)合應(yīng)用后是否仍能有效診斷GCTB，且是否能顯著提高其診斷效能，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究首次通過(guò)ROC曲線分析驗(yàn)證了3個(gè)標(biāo)記物的預(yù)測(cè)效能，同時(shí)也是首次構(gòu)建了多因素聯(lián)合預(yù)測(cè)模型，驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)其預(yù)測(cè)效能較高（AUC=0.984），且高于各個(gè)預(yù)測(cè)因子的單獨(dú)預(yù)測(cè)效能，說(shuō)明混合預(yù)測(cè)模型預(yù)測(cè)效能更高，展現(xiàn)出了較高的應(yīng)用前景。西安交通大學(xué)附屬紅會(huì)醫(yī)院具有百年歷史，有大綜合、強(qiáng)骨科的特點(diǎn)，骨腫瘤病例資源豐富、病種較多，進(jìn)行此項(xiàng)研究為GCTB診斷提供了一定的理論依據(jù)，具有指導(dǎo)意義。但本研究屬于一個(gè)單中心實(shí)驗(yàn)研究，仍存在局限性。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在我國(guó)其他醫(yī)院也有此項(xiàng)研究，但報(bào)道數(shù)量較少，期待后續(xù)其他醫(yī)院或者中心的數(shù)據(jù)對(duì)本研究結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，并補(bǔ)足本研究中的不足之處。

綜上所述，H3.3G34W［25-26］、p63及SATB2是有效診斷GCTB的分子標(biāo)記物，且三者聯(lián)合應(yīng)用更能提高診斷GCTB的預(yù)測(cè)效能，有助于與具有相似形態(tài)學(xué)的骨腫瘤的鑒別，特別是對(duì)于組織量較少的穿刺小標(biāo)本、一些不典型病例［27］和難以通過(guò)形態(tài)學(xué)確診的病例等，為GCTB的診斷與鑒別診斷提供新的幫助。

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（編輯" 陳" 波）