姜瑋 沈峰 王曉寶

(1.安康市疾病預(yù)防控制中心質(zhì)量控制科,陜西 安康 725000;2.安康市中心醫(yī)院檢驗科,陜西 安康 725000;3.寶雞市中醫(yī)醫(yī)院病理科,陜西 寶雞 721000)

結(jié)核性胸腔積液(TPE)是結(jié)核桿菌和其自溶以及代謝產(chǎn)物到達胸膜腔內(nèi)所致,TPE內(nèi)包含多類細胞和可溶性炎癥介質(zhì)[1]。確定胸腔積液是結(jié)核性或者非結(jié)核性,對臨床評估患者病情和開展治療有著重要意義[2]。因此,需要采取簡便、迅速、準確且無創(chuàng)的診斷指標。當(dāng)前有關(guān)TPE的診斷方式較多,包含白細胞介素-27(IL-27)、腺苷脫氫酶(ADA)、基因檢測和MTB培養(yǎng)等,其中MTB培養(yǎng)用于TPE診斷歷史悠久,且準確度較高[3];IL-27能將輔助性T細胞能力激活,經(jīng)促炎、抗炎等作用機制調(diào)節(jié)免疫疾病發(fā)生和發(fā)展,目前已被用于TPE診斷中,有著較高診斷效能[4];ADA屬于臨床公認的TPE診斷有效指標,該項指標水平較低能將TPE的可能性排除[5];Genexpert MTB/MIF是一類新型分子生物學(xué)檢測技術(shù),有著迅速、準確以及敏感等優(yōu)點[6]。本文探討IL-27、ADA、基因檢測以及MTB培養(yǎng)對TPE的診斷意義,旨在為臨床鑒別診斷TPE提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年03月至2022年12月本院收治的TPE患者總共90例為TPE組,另選取同時間段內(nèi)本院收治的非TPE患者總共98例為非TPE組,TPE組中男52例,女38例;年齡24～80歲,平均年齡(53.68±10.25)歲;胸腔積液體積300～398 cm3,平均體積(350.26±28.45)cm3。非TPE組中男58例,女40例;年齡25～78歲,平均年齡(54.10±10.12)歲;胸腔積液體積302～395 cm3,平均體積(349.254±30.25)cm3。納入標準:TPE組均開展胸部X線或者影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)存在液性暗區(qū),后開展胸水生物化學(xué)和常規(guī)、細菌檢測以及胸膜活檢證實,抗結(jié)核藥物治療有效;非TPE組均是惡性胸腔積液,經(jīng)過支氣管鏡檢查、痰液、胸水脫落細胞、淋巴結(jié)穿刺和肺穿刺病理檢查等確診;年齡在18歲以上;依從性良好。排除標準:凝血功能異常者;存在支氣管胸膜瘺者;存在精神病或者殘疾者;存在其他特殊感染者;存在重度肝腎功能疾病者;近3個月開展過胸部手術(shù)、胸部侵入檢查或者胸部創(chuàng)傷史者;風(fēng)濕免疫病等引起的胸腔積液者。兩組一般資料相比無顯著差異(P>0.05)。本研究得到院內(nèi)倫理委員會通過,患者知情同意。

1.2方法

1.2.1IL-27及ADA檢測 所有患者均在住院后的24h通過胸腔穿刺抽取10 mL胸水,以3 000 r/min速度開展15 min離心處理,后選擇上清液待測,放在-80°C的冰箱內(nèi)保存。通過酶聯(lián)免疫吸附方法對IL-27含量開展檢測,通過酶顯色法對ADA含量開展檢測,操作者嚴格依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書開展操作,試劑盒是武漢博士德生物工程公司生產(chǎn)。IL-27>500 ng/L當(dāng)作評定TPE的標準,ADA>45U/L當(dāng)作評定TPE的標準。

1.2.2基因檢測 所有患者通過胸腔穿刺抽取5 mL胸水,放到50 mL離心管中,以2:1比例添加樣品試劑,扭緊蓋子后劇烈晃動10～20次,放于室溫下開展15 min培養(yǎng)處理,通過無菌移液管將液化樣品吸入直至管內(nèi)最低標記位置,再緩慢加進處理過的樣品至檢測盒加樣孔中,避免出現(xiàn)氣泡,扭緊蓋子,放入樣品反應(yīng)盒至美國Cepheid公司生產(chǎn)的GeneXpert MTB/MIF全自動一體化半巢式定量PCR設(shè)備中,自動循環(huán)2 h得到最終結(jié)果。

1.2.3MTB培養(yǎng) 所有患者選取3 mL的沉淀物,添加4%的等量氫氧化鈉開展15 min處理,對MTB開展分離培養(yǎng),選擇美國BD公司生產(chǎn)Bactec MGIT960全自動分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏系統(tǒng)開展培養(yǎng),嚴格依據(jù)儀器說明書中內(nèi)容進行操作,后儀器能自動判讀出結(jié)果。

1.3觀察指標 觀察兩組胸水IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)陽性率差異,并比較IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)單項或者聯(lián)合檢測對TPE的檢出率。聯(lián)合檢測評定標準為任意一項檢查結(jié)果顯示為陽性[7]。陽性率=陽性例數(shù)/總例數(shù)×100%。檢出率=檢出例數(shù)/總例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1兩組胸水內(nèi)的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)陽性率相比 TPE組胸水內(nèi)的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)陽性率均高于非TPE組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組胸水內(nèi)的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)陽性率相比

2.2IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)單項或者聯(lián)合檢測對TPE的檢出率相比 聯(lián)合IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)對TPE的檢出率高于單項檢測(P<0.05)。見表2。

3 討 論

早期診斷MTP對采取有效治療措施改善患者預(yù)后至關(guān)重要,但前提是需要和其他類型胸腔積液做好鑒別。臨床使用較多的檢測技術(shù)包含抗酸染色以及MTB培養(yǎng)等,但存在敏感度、特異度不高和假陽性率高等問題[8]。

IL-27屬于近些年來出現(xiàn)的一類新型異源二聚體細胞因子,有著細胞免疫刺激以及調(diào)節(jié)作用,在各類免疫疾病中發(fā)揮重要作用[9]。本文結(jié)果顯示,TPE組的胸水IL-27水平高于非TPE組(P<0.05)。分析原因是MTB感染和T淋巴細胞相關(guān),可生成固有的免疫應(yīng)答,MTB對巨噬細胞產(chǎn)生刺激作用,能使其分泌出較多IL-27,改變機體中MTB的生存現(xiàn)狀。ADA是和免疫系統(tǒng)存在密切聯(lián)系的一類核酸代謝酶,伴隨淋巴細胞激活以及分化,這項指標能產(chǎn)生相應(yīng)變化[10]。TPE組的胸水ADA水平高于非TPE組(P<0.05)。這是因為TPE發(fā)生后,胸腔積液內(nèi)的淋巴細胞顯著增加,進而使得ADA含量上升。MTB培養(yǎng)屬于TPE診斷中的一類常見方法,但存在培養(yǎng)時間長、檢出率和敏感度不高等缺陷[11]。Genexpert MTB/MIF屬于近些年來被逐漸用于臨床的TPE基因檢測技術(shù),有著操作便捷以及迅速等優(yōu)點,且敏感度較MTB培養(yǎng)高[12]。TPE組胸水內(nèi)的Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)陽性率均高于非TPE組(P<0.05),這和席素雅[13]等研究中結(jié)果一致,反映出兩項檢查方法在篩查TPE中均有一定價值。此外,聯(lián)合IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)對TPE的檢出率高于單項檢測(P<0.05),說明聯(lián)合幾項檢測方式能提升對TPE的檢出率。原因可能是IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培養(yǎng)幾項檢測方式聯(lián)用,能優(yōu)勢互補,起到協(xié)同診斷效果,進而有助于提升對TPE的診斷效果。

綜上,IL-27、ADA、基因檢測以及MTB培養(yǎng)能協(xié)助臨床鑒別診斷TPE,且聯(lián)合幾項檢測方法能提升對TPE的檢出率,值得推廣應(yīng)用到臨床。