鄭 博 郅 瑛 杜 蕊

眼瞼基底細(xì)胞癌發(fā)病速度較為緩慢,且惡性程度和轉(zhuǎn)移性較低,因此早期診斷誤診和漏診的可能性極大,但若不能及時(shí)進(jìn)行治療,一旦病情進(jìn)展至晚期,極有可能導(dǎo)致患者喪失眼球,從而影響患者的正常生活,同時(shí)還會(huì)加大治療的挑戰(zhàn)性[1]。因此及時(shí)尋找有效的分子靶標(biāo),在眼瞼基底細(xì)胞癌診斷和防治中可發(fā)揮出至關(guān)重要的作用。沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silence information regulator 1,SIRT1)可通過去乙?；姆绞綄?duì)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控,從而促進(jìn)或抑制腫瘤進(jìn)展[2]。酪氨酸蛋白激酶信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)在促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要意義,酪氨酸蛋白激酶-2(Janus kinase-2,JAK2)作為JAK家族的一員,其表達(dá)不僅對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有影響,還有可能影響患者的預(yù)后[3]。基于此,本文就眼瞼基底細(xì)胞癌組織中SIRT1、JAK2的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

根據(jù)納入、排除標(biāo)準(zhǔn),于2017年5月至2022年5月選取經(jīng)病理檢查證實(shí)為眼瞼基底細(xì)胞癌且經(jīng)手術(shù)切除保留的癌組織蠟塊70例作為觀察組,男性37例、女性33例;年齡20～78歲,平均(54.56±5.34)歲。另將其同期切除的癌旁組織蠟塊70例作為對(duì)照組,男性39例、女性31例;年齡21～80歲,平均(55.22±5.16)歲。兩組基本資料比較差異不顯著(P>0.05)。本次研究已獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

采用免疫組化SP法檢測:對(duì)兩組組織標(biāo)本進(jìn)行切面,厚度為4 μm,置于60 ℃烤箱內(nèi)烤1 h,脫蠟、水化(無水乙醇、體積分?jǐn)?shù)95%、85%、70%乙醇),滴入過氧化氫阻斷過氧化酶,PBS清洗,封閉液封閉,滴入一抗SIRT1、JAK2,置于4 ℃環(huán)境中一夜,PBS清洗,滴入二抗孵育(45 min),DAB顯色,10%蘇木精復(fù)染,乙醇脫水,經(jīng)二甲苯透明、封片,于顯微鏡下觀察。SIRT1、JAK2陽性表達(dá)參照染色指數(shù)(staining index,SI)評(píng)估。SI為染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比評(píng)分乘積。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):0分表示無染色;1分表示淺黃色;2分表示棕黃色;3分表示棕褐色。(-):SI<3分;(+):SI=3分:(++):SI>3,<6分;(+++):SI≥6分。(-)、(+)表示低表達(dá),(++)、(+++)表示高表達(dá)。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)比較眼瞼基底細(xì)胞癌組織的SIRT1、JAK2表達(dá)陽性率。(2)分析SIRT1、JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織臨床病理特征的關(guān)系,并分析其相關(guān)性,包括性別、年齡(≥60歲、<60歲)、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)增殖指數(shù)(≥25%、<25%)、腫瘤直徑(≥3 cm、<3 cm)、病理分型(結(jié)節(jié)型、潰瘍型、浸潤型、硬斑病樣型)、TNM分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 眼瞼基底細(xì)胞癌組織中SIRT1、JAK2表達(dá)情況

眼瞼基底細(xì)胞癌組織中SIRT1、JAK2表達(dá)陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05),見表1。

表1 眼瞼基底細(xì)胞癌組織SIRT1、JAK2表達(dá)情況/例

2.2 SIRT1、JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織臨床病理特征的關(guān)系

SIRT1低表達(dá)和SIRT1高表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌患者性別、復(fù)發(fā)率無關(guān)(P>0.05),與患者年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤直徑、病理分型相關(guān)(P<0.05);JAK2低表達(dá)和SIRT1高表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌患者性別、年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤直徑、病理分型、有無脈管浸潤、復(fù)發(fā)無關(guān)(P>0.05),與TNM分期相關(guān)(P<0.05),見表2。

表2 SIRT1、JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系(例,%)

2.3 眼瞼基底細(xì)胞癌臨床病理特征與SIRT1、JAK2表達(dá)的相關(guān)性

SIRT1表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌患者年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤直徑、病理分型呈正相關(guān)性;JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織TNM分期呈正相關(guān)性(P<0.05),見表3。

表3 眼瞼基底細(xì)胞癌臨床病理特征與SIRT1、JAK2表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

3.1 眼瞼基底細(xì)胞癌組織SIRT1的表達(dá)及臨床意義

SIRT1是一種賴氨酸脫乙?；?具有組蛋白去乙?；鸵阴；钚?可對(duì)轉(zhuǎn)錄水平中對(duì)一些基因的表達(dá)或沉默進(jìn)行調(diào)節(jié),同時(shí)還能通過促進(jìn)上皮間質(zhì)化的方式作為癌癥轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。魯強(qiáng)等[4]學(xué)者的研究認(rèn)為,利用慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)對(duì)SIRT1靶向沉默,可通過p53/p21途徑抑制RL95-2細(xì)胞增殖、非錨定依賴性、遷移及侵襲,可見SIRT1與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展均存在一定關(guān)聯(lián)。本次研究結(jié)果顯示,與癌旁組織相比,眼瞼基底細(xì)胞癌組織的SIRT1表達(dá)陽性率更高,SIRT1表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤直徑、病理分型呈正相關(guān)性。提示SIRT1表達(dá)水平與眼瞼基底細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展存在密切關(guān)聯(lián),推測眼瞼基底細(xì)胞癌可能是眼瞼基底細(xì)胞癌診斷與治療的有效參照指標(biāo)。劉法等[5]的研究也發(fā)現(xiàn),眼瞼基底細(xì)胞癌組織中SIRT1的陽性表達(dá)率顯著比皮膚基底細(xì)胞乳頭狀瘤組織高,經(jīng)Spearman法分析后發(fā)現(xiàn),眼瞼基底細(xì)胞癌組織中SIRT1蛋白表達(dá)具有正相關(guān)性,且SIRT1在眼瞼基底細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與患者年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤長徑和腫瘤病理分型有關(guān),與本次研究結(jié)果一致。

3.2 眼瞼基底細(xì)胞癌組織JAK2的表達(dá)及臨床意義

JAK在細(xì)胞因子信號(hào)傳遞中具有重要作用,可在細(xì)胞因子受體與相應(yīng)配基結(jié)合后活化,并對(duì)另一種信號(hào)蛋白分子STAT進(jìn)行激活,進(jìn)而誘導(dǎo)目的基因表達(dá)。目前有相關(guān)研究認(rèn)為JAK/STAT與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展均存在一定關(guān)聯(lián),因此臨床多通過抑制JAK/STAT通路的方式抑制癌癥進(jìn)展[6]。袁前超等[7]的研究認(rèn)為,敲低TCF7通過抑制JAK/STAT通路活化的方式,可在一定程度上抑制肺癌細(xì)胞的增殖能力。另外,賈茗博等[8]也發(fā)現(xiàn),利用氯化兩面針堿抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化,其抑制作用可通過JAK/STAT3信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)。JAK2是JAK家族的一員,與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展均存在一定關(guān)聯(lián),但目前國內(nèi)對(duì)于JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織臨床病理特征關(guān)系的相關(guān)研究較為缺乏。本次研究發(fā)現(xiàn),相較于癌旁組織而言,眼瞼基底細(xì)胞癌組織的JAK2表達(dá)陽性率更高,JAK2表達(dá)與眼瞼基底細(xì)胞癌組織TNM分期呈正相關(guān)性。提示JAK2表達(dá)水平在促進(jìn)眼瞼基底細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展方面具有重要意義。

綜上所述,SIRT1、JAK2在眼瞼基底細(xì)胞癌組織中呈高表達(dá),與患者的年齡、PCNA增殖指數(shù)、腫瘤直徑、病理分型、TNM分期存在一定關(guān)聯(lián),在診斷眼瞼基底細(xì)胞癌方面具有重要意義。