◆作者：鐘 雷 袁俊光 陳宇航 曹雙俊 周良星 劉建高

◆單位：1.廣東德寧水產科技有限公司；2.廣東省水產高效健康養(yǎng)殖（德寧）工程技術研究中心；3.新希望六和股份有限公司

大口黑鱸（Micropterus salmoides），又名加州鱸，肉質鮮美，營養(yǎng)價值高，深受廣大消費者喜愛。近年來隨著養(yǎng)殖技術的進步和飼料營養(yǎng)的完善，據(jù)《2022 中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒》大口黑鱸養(yǎng)殖量已突破70 萬噸，是重要的淡水養(yǎng)殖品種。大口黑鱸是肉食性魚類，人工配合飼料中魚粉和雞肉粉的比例在60%左右，占據(jù)飼料大部分成本，并由此產生的魚粉和雞肉粉需求分別在30 萬噸和10 萬噸左右，對本已緊張的魚粉和雞肉粉供應帶來巨大壓力，因此研究大口黑鱸魚粉和雞肉粉替代方案對大口黑鱸養(yǎng)殖發(fā)展顯得尤為重要。目前關于大口黑鱸魚粉替代研究較多集中于菌體蛋白（Ma 等，2022）、蟲體蛋白（Gu 等，2022；Xu 等，2021）、植物蛋白（He 等，2022；Yang 等，2022）等，雞肉粉替代研究僅有黑水虻替代見諸報道（Fisher 等，2022）。

豬肉粉是常見的以豬經(jīng)屠宰分割后食用價值低的下腳料或者非傳染性病死豬為原料，經(jīng)破碎、高溫蒸煮、滅菌、脫脂干燥、粉碎等生產工藝獲得的產品（馮幼等，2014；程小飛等，2020）。豬肉粉蛋白高（粗蛋白質60%以上），氨基酸組成較理想，營養(yǎng)價值高；同時基于我國龐大的生豬養(yǎng)殖及屠宰量，豬肉粉原料供應充足，作為加州鱸這種肉食性魚類的動物蛋白源具有一定利用前景。關于大口黑鱸飼料中豬肉粉替代魚粉或雞肉粉的研究較少，且僅見于小規(guī)格階段（卞 宇 豪 等，2022；Tidwell 等，2005），尚無替代后對全周期養(yǎng)殖大口黑鱸養(yǎng)殖的效果評估。因此，本研究利用豬肉粉替代魚粉或雞肉粉，評估替代后對大口黑鱸全養(yǎng)殖周期不同生長階段生長及飼料利用的影響，為豬肉粉在大口黑鱸飼料中的商業(yè)使用提供參考。

1 材料和方法

1.1 實驗飼料

實驗設計與分組見表1。實驗飼料所用豬肉粉、秘魯日本級魚粉、泰國魚粉、雞肉粉、大豆粕、棉籽蛋白均購于廣州希望飼料有限公司，豬肉粉、秘魯日本級魚粉、雞肉粉營養(yǎng)指標見表2。

表2 實驗所用動物蛋白營養(yǎng)指標（干物質計，%）

所有原料粉碎過80 目篩，使用小型混合機充分混合均勻，經(jīng)單螺桿膨化機用孔徑3.0 mm模板制成膨化飼料，烘干冷卻后置于-18 ℃冰箱保存。實驗飼料配方及生化組成見表3，實驗飼料氨基酸組成見表4。

表3 實驗飼料配方及營養(yǎng)組成（干物質計，%）

表4 實驗飼料氨基酸組成（干物質計，%）

本實驗在廣東德寧水生生物研究中心試驗基地內的網(wǎng)箱開展，網(wǎng)箱2 m×2 m×1.8 m。實驗于2022 年7 月1 日-2023 年1 月2 日期間開展，為期186 d。試驗開始前大口黑鱸暫養(yǎng)于魚塘網(wǎng)箱中用對照組飼料馴食2周。實驗前饑餓24h，每個網(wǎng)箱隨機挑選100 尾實驗魚，初始體重每尾55 g 左右，養(yǎng)殖第60 d 第一次取樣（D 60），并在D 60 每個網(wǎng)箱驗收魚中隨機挑選50 尾實驗魚，初始體重為每尾178 g左右；養(yǎng)殖第122 d 第二次取樣（D 122），并在每個網(wǎng)箱驗收魚中隨機挑選35 尾魚，初始體重為每尾306 g 左右；養(yǎng)殖第186 d第三次取樣（D 186）。根據(jù)分組分別投喂5 種飼料，每組5 個平行，共25 個網(wǎng)箱。

實驗期間每天投喂2 次（7：00 和16：30）。整個養(yǎng)殖期間，水體溶解氧含量在5.2～7.9 mg/L，氨氮0.05～0.47 mg/L，亞硝酸鹽0～0.05 mg/L；D60 養(yǎng)殖期間水溫27.4～32.3℃，平均水溫30.16℃，D122 養(yǎng)殖期間水溫24.4～29.6℃，平均水溫27.82℃；D186 養(yǎng)殖期間水溫13.5～24.6 ℃，平均水溫19.39℃。

1.2 樣品采集

每次采樣前饑餓24 h，每個網(wǎng)箱實驗魚計數(shù)稱重。每個網(wǎng)箱隨機抽取3 尾魚解剖，稱內臟團和肝臟重量，用于計算臟體比和肝體比，分離的肝臟拍照統(tǒng)計白肝指數(shù)。

1.3 測定指標及方法

成活率（SR，%）= 存活數(shù)量（尾）/ 初始數(shù)量（尾）×100%

日攝食率（DFR，%）= 攝食量（g）/[終末體重（g）+ 初始體重（g）]×2/ 養(yǎng)殖天數(shù)（d）×100%

飼料系數(shù)（FCR）= 攝食飼料總量（g）/[終末體重（g）- 初始體重（g）]

增重率（WGR，%）=[終末體重（g）- 初始體重（g）]/ 初始體重（g）×100%

特定生長率（SGR，%/d）=[ln（終末體重）- ln（初始體重）]/飼養(yǎng)天數(shù)×100%

肥滿度（CF，g/cm3）=（終末體重(g)/ 終末體長(cm)3）×100%

臟體比（VSI，%）= 臟體重量(g)/ 魚體重(g)×100%

肝體比（HSI，%）＝肝臟重量（g）/ 魚體重（g）×100%

白肝指數(shù)（%）= 白肝數(shù)量/解剖肝數(shù)量×100%

1.4 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 19.0 軟件對結果數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗；數(shù)據(jù)方差齊性后，進行單因素方差分析（one-way ANOVA），采用Duncan’s 多重比較法分析實驗結果的差異顯著性，差異顯著水平為P＜0.05。

2 結果與分析

2.1 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸生長和飼料利用的影響

由表5 可知，在整個養(yǎng)殖周期，各組成活率無顯著差異（P＞0.05）。D60 養(yǎng)殖階段FM8 組大口黑鱸增重率和特定生長率顯著高于C 組（P＜0.05），其他組與C 組無顯著差異（P＞0.05），各組間飼料系數(shù)無顯著差異（P＞0.05）。D122 養(yǎng)殖階段，隨著豬肉粉替代魚粉或雞肉粉水平升高，大口黑鱸日攝食率升高，并在16%豬肉粉替代魚粉或雞肉粉較對照組出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05）；各組間增重率、特定生長率、飼料系數(shù)均無顯著差異（P＞0.05）。D186 養(yǎng) 殖 階 段，F(xiàn)M8、FM16、PM8、PM16 組 大 口黑鱸日攝食率顯著高于C 組（P＜0.05）；C 組與各組間增重率、特定生長率無顯著差異（P＞0.05），豬肉粉替代魚粉或雞肉粉水平從8%升高至16%，大口黑鱸增重率、特定生長率有下降趨勢，飼料系數(shù)有升高趨勢，其中FM8 組增重率、特定生長率顯著高 于FM16 和PM16 組（P＜0.05），F(xiàn)M16 和PM16 組飼料系數(shù)均顯著高于C 組和FM8 組（P＜0.05）。

表5 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸生長和飼料利用的影響

2.2 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸形體指標的影響

由表6 可知，全養(yǎng)殖周期，C組大口黑鱸肥滿度均高于其他各組，在D186 階段，F(xiàn)M16 組和PM16 大口黑鱸肥滿度顯著低于C 組（P＜0.05）；各組臟體比、肝體比無顯著差異（P＞0.05）。

表6 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸形體指標的影響

2.3 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸白肝指數(shù)的影響

由表7 可知，整個養(yǎng)殖期間，各組間大口黑鱸白肝比例無明顯差異。

表7 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸白肝指數(shù)的影響

3 討論

水產動物飼料中蛋白源替代的使用效果有以下3 個因素：（1）替代后適口性，對水產動物攝食率的影響（Ai 等，2006）；（2）水產動物對替代動物蛋白源的消化利用（Bureau 等，1999）；（3）替代后氨基酸平衡性（Ai 等，2005）。

3.1 豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸攝食的影響

3.2 豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸飼料消化利用的影響

水產品種對豬肉粉消化利用研究較多集中于豬肉粉營養(yǎng)物質的表觀消化率測定分析。河蟹對豬肉粉蛋白質、脂肪及氨基酸表觀消化率顯著低于魚粉和雞肉粉（吳英珂等，2022）；虹鱒對豬肉粉蛋白質、脂肪及能量的表觀消化率與雞肉粉接近（Elliot等，2003）；花鱸對豬肉粉的干物質、蛋白質、能量和氨基酸的表觀消化率均高于雞肉粉。不同水產品種對豬肉粉營養(yǎng)物質表觀消化率差異可能與各品種的消化生理結構差異有關，同時豬肉粉質量差異也是影響因素（程小飛等，2020）。目前尚無大口黑鱸對豬肉粉的消化利用數(shù)據(jù)，從全周期生長上來看，表明大口黑鱸對豬肉粉的消化利用較魚粉和雞肉粉無明顯差異。此外，本研究中D60、D122 養(yǎng)殖階段飼料系數(shù)無顯著差異，而在D186 養(yǎng)殖階段FM16、PM16 組飼料系數(shù)均顯著高于C 組，這可能與D186 養(yǎng)殖階段較其他養(yǎng)殖階段水溫低有關（D 60 養(yǎng)殖期間水溫27.4～32.3 ℃，平均水溫30.16℃，D 122 養(yǎng)殖期間水溫24.4～29.6℃，平均水溫27.82℃，D 186 養(yǎng)殖期間水溫13.5～24.6 ℃，平均水溫19.39℃）。Xue 等（2018）研究表明，水溫不同通過影響魚類腸道蠕動、消化酶活性，改變魚類生理狀態(tài)，進而造成消化利用的差異。水溫的降低顯著降低魚類對飼料營養(yǎng)物質的消化率，從而導致飼料利用下降，飼料系數(shù)升高。大口黑鱸隨著生長，消化器官不斷發(fā)育，功能完善，長期的飼料攝食對腸道生理結構和環(huán)境產生影響，對營養(yǎng)物質的消化利用也相應發(fā)生變化（劉建高等，2023），因此同一實驗組大口黑鱸在不同養(yǎng)殖階段與對照組生長和飼料利用效果比較有差異。

3.3 替代后飼料氨基酸組成對大口黑鱸生長的關系

必需氨基酸不足，氨基酸組成不平衡是限制替代魚粉水平的重要因素。在大菱鲆的研究表明，豬肉粉替代魚粉，蛋氨酸下降，導致豬肉粉使用超過220g/kg，生長和飼料利用顯著下降（Ha 等，2021）；卵形鯧鲹飼料中豬肉粉替代魚粉，賴氨酸、蛋氨酸等多種必需氨基酸下降，豬肉粉使用超過9%，生長和飼料利用顯著下降（Huang 等，2022）。近年來，關于大口黑鱸的氨基酸需求研究發(fā)現(xiàn)賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸的最適量為2.8%、1.22%、1.91%（陳乃松等，2010）。本研究中對照組氨基酸營養(yǎng)均能滿足大口黑鱸的營養(yǎng)需求，所用豬肉粉較魚粉、雞肉粉在氨基酸組成上有較大差異，多種必需氨基酸均低于魚粉和雞肉粉，見表2。替代后，賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸等必需氨基酸較對照組下降。針對性補充晶體氨基酸，F(xiàn)M8 組9 種必需氨基酸均高于對照組，相應的，生長方面，F(xiàn)M8 組全周期各階段增重率和特定生長率均高于C 組，表明補充晶體氨基酸可以平衡豬肉粉替代后飼料氨基酸組成，提升效果。蛋氨酸不足對可顯著降低大口黑鱸生長和飼料效率（Coyle等，2000）；亮氨酸可激活水產動物mTOR 信號通路，對生長和飼料有促進（Wei 等，2023）。本研究中16%豬肉粉替代組蛋氨酸和亮氨酸均下降，相應的FM16和PM16 組在D186 養(yǎng)殖階段飼料系數(shù)顯著高于對照組，表明16%豬肉粉替代應更關注蛋氨酸和亮氨酸的補充。

3.4 豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對大口黑鱸表觀健康狀況的影響

大口黑鱸在長期攝食營養(yǎng)不均衡或高含量的抗營養(yǎng)物質的飼料，肝臟容易出現(xiàn)肝細胞空泡化、腫脹等病理變化，表觀癥狀為肝臟腫大，顏色偏白，臟體比和肝體比上升（徐祥泰等，2016）。本研究，豬肉粉替代魚粉或雞肉粉后對大口黑鱸的白肝指數(shù)、肝體比和臟體比無顯著增加，可粗略的推測未對大口黑鱸的健康造成明顯影響。

4 結論

處于平均水溫高于27℃養(yǎng)殖階段的中小規(guī)格大口黑鱸，使用16%豬肉粉替代魚粉或雞肉粉并補充氨基酸不影響生長和飼料利用；處于平均水溫低于20℃養(yǎng)殖階段的大規(guī)格大口黑鱸，建議豬肉粉替代魚粉或雞肉粉的使用量不超過8%。

參考文獻：（略）