王鑫月，張立業(yè)，張雪梅

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，河北保定 071001）

0 引言

樹莓(Rubusidaeus)是一種多年生落葉小漿果類灌木，屬于薔薇科(Rosaceae)懸鉤子屬(Rubus)[1]，因含有豐富的礦質(zhì)元素、維生素且有較高的藥用價值，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域[2]。低溫寒害是植物生長過程中面臨的主要非生物脅迫因素之一，低溫寒害限制植物生長，影響作物產(chǎn)量[3]。樹莓栽培品種地上部分（莖）耐寒性差，需采取保護(hù)措施才能正常越冬，致使中國北方地區(qū)樹莓越冬前必須埋土防寒。有些樹莓野生資源可以自然越冬，而導(dǎo)致兩者越冬性差異的原因尚未明確[4]。

在逆境條件下，脯氨酸既有滲透調(diào)節(jié)作用，還能保持膜結(jié)構(gòu)的完整性，植物會積累大量的脯氨酸來抵抗逆境帶來的損傷[5-8]?？扇苄缘鞍踪|(zhì)有較強(qiáng)的親水能力，可促進(jìn)細(xì)胞保水，進(jìn)而提高植物抗寒性[9]。在低溫脅迫下，植物通過積累可溶性糖，進(jìn)而增加細(xì)胞液濃度，延緩細(xì)胞結(jié)冰傷害[10-11]。植物體內(nèi)活性氧含量會因溫度降低而增加，當(dāng)積累量超過正常水平時，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生和消除自由基的平衡便會遭到破壞。SOD、CAT和POD 3種酶緊密聯(lián)系成為植物體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)的重要部分[5]，同時具有清除植物體內(nèi)活性氧的抗氧化能力[12-13]。低溫脅迫會導(dǎo)致植物細(xì)胞膜系統(tǒng)受損，引起細(xì)胞膜收縮不均勻，膜脂相變[14-15]。植物細(xì)胞膜質(zhì)過氧化和膜蛋白間會加速聚合，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)MDA含量增加[16-17]。因此，植物在低溫脅迫下受到的傷害程度，可以通過測定電解質(zhì)滲出率和MDA含量變化來反映。樹莓在低溫逆境下是否有同樣的生理響應(yīng)需要進(jìn)一步研究。

為探究抗低溫野生樹莓資源牛疊肚與低溫敏感型樹莓栽培品種抗寒性產(chǎn)生差異的原因，本研究從生理特性角度開展系統(tǒng)研究，以期為解析樹莓抗寒性突破樹莓栽培品種越冬障礙提供研究基礎(chǔ)，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上選育樹莓抗寒品種提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料均為樹莓初生莖，野生資源牛疊肚包括牛疊肚1號和牛疊肚2號，栽培品種有‘波拉娜’、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’。牛疊肚1 號引自張家口市黑龍山林場(116°10′71′′E、41°28′58′′N)，牛疊肚2 號引自唐山市遷西縣(118°26′34′′E、40°15′38′′N)，栽培品種均產(chǎn)自保定市市區(qū)(115°45′23′′E、38°83′34′′N)。試材均于2016年移栽至試驗田，株行距為1 m×2.5 m，冬季不做防寒處理，使其自然越冬。

1.2 試驗設(shè)計

試驗地位于保定市河北農(nóng)業(yè)大學(xué)實驗基地(115°25′3.98′′E、38°49′32.33′′N)，海拔14.3 m，溫帶大陸性季風(fēng)氣候。1、2月氣溫最低，1月日均最高氣溫為2℃，日均最低氣溫為-9℃，極低溫度可達(dá)-22℃左右。越冬期平均氣溫以及平均空氣濕度如表1所示。在表2中的10 個時期，分別選取長勢一致、生長健壯的不同品種樹莓3株，每株取中部莖用于測定生理指標(biāo)。

表1 試驗地越冬期平均氣溫及平均濕度

表2 采樣時間及溫度 ℃

1.3 測定指標(biāo)及方法

相對含水量采用烘干稱重法[18]。

滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)脯氨酸含量采用磺基水楊酸法，可溶性糖和淀粉含量采用蒽酮比色法，可溶性蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測定[19]。

超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)活性測定，分別采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法、愈創(chuàng)木酚法、過氧化氫法[19]。

相對電導(dǎo)率用電導(dǎo)儀測定，丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法測定[19]。

1.4 數(shù)據(jù)處理及分析

數(shù)據(jù)分析及作圖應(yīng)用Microsoft Excel，采用Duncan 新復(fù)極差法對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，并應(yīng)用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行各指標(biāo)的相關(guān)性分析及主成分分析，運用主成分分析法對10個生理指標(biāo)進(jìn)行樹莓莖抗寒能力綜合評價。

2 結(jié)果與分析

2.1 低溫對樹莓莖相對含水量的影響

在自然越冬條件下樹莓莖的相對含水量變化整體呈先下降后上升趨勢（圖1）。各品種在1月11日出現(xiàn)低峰值，較10 月17 日牛疊肚1 號、2 號和栽培品種‘波拉娜’、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’分別減少了42.47%、41.11%、79.82%、82.41%和85.53%，其中‘海爾特茲’減少最多，牛疊肚2 號減量最少；1 月下旬，隨著氣溫回升，莖相對含水量呈上升趨勢。顯著性分析表明，從12月26日開始，樹莓野生資源牛疊肚莖相對含水量均顯著高于栽培品種。越冬后（3月25日），牛疊肚1號、2號的相對含水量分別為76.34%、72.74%，比‘波拉娜’、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’分別高出了205%、221%、263%和190%、206%、246%。

圖1 越冬過程中樹莓莖相對含水量變化

2.2 低溫對樹莓莖滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

隨著冬季溫度不斷降低，樹莓莖游離脯氨酸含量先增加后減少（圖2）。越冬初期除‘海爾特茲’外，其他品種莖中游離脯氨酸含量均無顯著差異，從11月初開始野生資源游離脯氨酸含量顯著升高。其中牛疊肚1號莖游離脯氨酸含量在1月11日達(dá)到峰值(742.31 μg/g)；牛疊肚2 號、‘波拉娜’莖游離脯氨酸含量在1 月末達(dá)到峰值，分別為755.21、296.55 μg/g；‘菲爾杜德’、‘海爾特茲’莖游離脯氨酸含量在2 月18 日達(dá)到峰值，分別為349.08、159.24 μg/g。

圖2 越冬過程中樹莓莖滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量變化

可溶性蛋白質(zhì)含量變化整體呈先上升后下降趨勢。隨著溫度降低，樹莓莖可溶性蛋白質(zhì)含量均在10月中旬—翌年1 月中旬期間逐漸積累，并且在1 月11日達(dá)到最高值，牛疊肚1號、牛疊肚2號、‘波拉娜’、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’較10 月17 日分別增加了36.63%、27.35%、45.37%、34.16%和21.42%。此后，隨著溫度的回升，可溶性蛋白含量明顯下降。

牛疊肚1號、牛疊肚2號和‘波拉娜’莖可溶性糖含量均在10 月17 日—12 月26 日期間逐漸積累，并且在12 月26 日達(dá)到最高值，峰值分別為68.27、80.14 和82.06 mg/g。而‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’莖可溶性糖含量在翌年1月11日達(dá)到最高值，較越冬初期分別增加了236%和383%。之后，隨著溫度的回升，可溶性糖含量呈波動性變化，整體表現(xiàn)出降低趨勢。

淀粉含量和可溶性糖含量變化相反。樹莓莖淀粉含量在1月28日前均無顯著性差異，整體呈先下降后緩慢上升。除‘海爾特茲’品種外，其他品種莖淀粉含量均在10月17日—翌年1月28日期間逐漸下降，并且在1月末含量達(dá)到最低值，較上一年10 月中旬分別降低了80.91%、78.94%、78.68%和69.88%。而‘海爾特茲’莖淀粉含量在1月中旬達(dá)到最低值，最低值為4.86 mg/g。之后，隨著溫度的回升，淀粉含量緩慢上升。

2.3 低溫對樹莓莖抗氧化酶活性的影響

樹莓莖SOD 活性的變化呈先下降后上升再下降的趨勢（圖3）。牛疊肚SOD活性在越冬多數(shù)時期均顯著高于栽培品種。其中牛疊肚1號和2號在12月8日之前迅速下降，在12月8日達(dá)到第1個低峰值，分別為3.70 和3.50 U/g，隨后SOD 活性開始上升，分別在2 月18 日和1 月11 日達(dá)到峰值。栽培品種樹莓莖SOD 活性在11月23日之前迅速下降，‘波拉娜’、‘菲爾杜德’、‘海爾特茲’莖SOD活性分別在1月11日、1月28日和11月23日到達(dá)第1個低峰，分別為1.14、1.45、0.91 U/g，隨后SOD活性有緩慢上升。

圖3 越冬過程中樹莓莖抗氧化酶活性變化

樹莓栽培品種莖POD活性在越冬期間變化明顯，而樹莓野生資源變化較小。在2月18日之前，牛疊肚莖POD活性顯著低于栽培品種。牛疊肚1號和2號莖POD活性分別在11月4日、11月23日達(dá)到第1個高峰值，分別為101.52、142.56 U/g，在1月11日達(dá)到了最低值50.75、65.84 U/g?！茽柖诺隆oPOD活性在11月4日達(dá)到第1個低峰值251.23 U/g，‘波拉娜’和‘海爾特茲’在11月23日達(dá)到第1個低峰值220.13和147.06 U/g。‘海爾特茲’莖POD 活性在1 月11 日達(dá)到了最高值(348.70 U/g)，‘波拉娜’(391.51 U/g)和‘菲爾杜德’(377.54 U/g)在1月28日達(dá)到了最高值。

樹莓莖CAT 活性變化大致呈升—降—升—降的趨勢。牛疊肚1 號莖CAT 活性在11 月23 日達(dá)到第1個高峰值，牛疊肚2 號、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’莖CAT 活性在12 月8 日達(dá)到第1 個高峰值?！ɡ取?1月23日達(dá)到第1個高峰值?！ɡ取汀柼仄潯oCAT 活性在1 月28 日達(dá)到第2 個高峰值，而牛疊肚1號、2號和‘菲爾杜德’莖CAT活性在2月18日達(dá)到第2 個高峰值，分別為8.76、11.38、5.49、6.59 和7.51 U/g。越冬過程中，‘海爾特茲’莖的CAT 活性增加幅度最大，牛疊肚1號莖的CAT活性增加幅度最小。

2.4 低溫對樹莓莖細(xì)胞膜系統(tǒng)的影響

樹莓莖相對電導(dǎo)率變化整體呈先上升后下降趨勢（圖4）。12 月8 日—1 月28 日，隨著溫度的降低，樹莓莖的相對電導(dǎo)率逐步增加，牛疊肚1 號、牛疊肚2 號、‘波拉娜’和‘海爾特茲’莖的相對電導(dǎo)率在1月28日出現(xiàn)峰值，其中增加最多的是‘海爾特茲’，牛疊肚1號的增量最少；1 月28 日后，隨著氣溫回升，莖相對電導(dǎo)率呈下降趨勢。

圖4 越冬過程中樹莓莖細(xì)胞膜系統(tǒng)變化

牛疊肚1號、牛疊肚2號和‘波拉娜’莖MDA含量在12月26日之前逐漸增加，并在12月26日達(dá)到最高值，峰值分別為4.37、3.97 和4.20 μmol/g；三者莖的MDA 含量在1 月開始下降，1 月末后變化幅度較小。‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’莖MDA含量在1月11日之前逐漸增加，并達(dá)到最高峰(6.02、8.44 μmol/g)，隨后急速下降，在1月末后處于穩(wěn)定階段。

2.5 抗寒性指標(biāo)相關(guān)性分析

由相關(guān)性分析（表3）可見，自然低溫脅迫下2個樹莓野生資源和3個樹莓栽培品種的10個生理指標(biāo)間均存在著一定的相關(guān)性。POD 活性與相對電導(dǎo)率顯著正相關(guān)(r=0.932)；與相對含水量、脯氨酸含量極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.984 和-0.983；與可溶性蛋白含量、SOD 活性顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.895和-0.949。相對含水量與SOD 活性極顯著正相關(guān)(r=0.984)；與相對電導(dǎo)率顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.897)。脯氨酸含量與相對含水量、SOD 活性極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.922 和0.978。相對電導(dǎo)率與MDA 含量顯著正相關(guān)(r=0.917)。

表3 樹莓莖抗寒生理指標(biāo)相關(guān)系數(shù)

2.6 生理指標(biāo)主成分分析

以測定的10個指標(biāo)為依據(jù)，應(yīng)用主成分分析法綜合評價低溫對不同品種樹莓莖相對含水量、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、抗氧化酶活性及膜透性的影響，結(jié)果見表4。前3 個主成分的貢獻(xiàn)率分別為65.064%、19.417%、13.310%，累積貢獻(xiàn)率達(dá)到了97.791%。表明前3 個主成分反映了絕大部分信息，可以代替原來10個指標(biāo)對自然越冬過程中2個樹莓野生資源和3個樹莓栽培品種抗寒性的評價。第1 主成分特征值為6.506，其中POD活性的指標(biāo)系數(shù)最大，為-0.999；其次是相對含水量、相對電導(dǎo)率、SOD活性和脯氨酸含量，指標(biāo)系數(shù)分別為0.985、0.985、0.958 和-0.937。說明第1 主成分與這幾個指標(biāo)關(guān)系最為密切，代表了更多的抗寒評價信息。結(jié)合相關(guān)性分析可知，第1 主成分中POD 活性、相對含水量、相對電導(dǎo)率和脯氨酸含量均與其他多個指標(biāo)有較大的相關(guān)性，代表了2個樹莓野生資源和3個樹莓栽培品種抗寒性的大部分信息。

表4 樹莓莖抗寒性指標(biāo)因子負(fù)荷

通過表4 所示主成分載荷矩陣，得到以每個載荷量來表示主成分與對應(yīng)變量的相關(guān)關(guān)系，通過計算得到主成分表達(dá)式[式(1)～(3)]。主成分綜合評價模型如式(4)。

式中，F(xiàn)1代表第1主成分，F(xiàn)2代表第2主成分，F(xiàn)3代表第3主成分。Zx1代表過氧化物酶活性標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx2代表相對含水量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx3代表相對電導(dǎo)率標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx4代表超氧化物歧化酶活性標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx5代表脯氨酸含量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx6代表可溶性蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx7代表丙二醛含量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx8代表淀粉含量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx9代表可溶性糖含量標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值，Zx10代表過氧化氫酶活性標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)值。

根據(jù)主成分綜合評價模型即可計算2個樹莓野生資源和3 個樹莓栽培品種樹莓莖的綜合主成分值，并對其按綜合主成分值進(jìn)行綜合抗寒能力評價排序（表5），牛疊肚1 號、2號抗寒性較強(qiáng)，‘波拉娜’抗寒較弱，‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’抗寒性最差。

3 結(jié)論

本試驗通過對樹莓2 個野生資源和3 個栽培品種自然越冬過程中生理指標(biāo)的測定，結(jié)合主成分分析對其抗寒性進(jìn)行綜合評價，明確了不同品種的抗寒性強(qiáng)弱，其抗寒性由強(qiáng)到弱為牛疊肚2號、牛疊肚1號、‘波拉娜’、‘菲爾杜德’和‘海爾特茲’。不同樹莓品種對低溫脅迫的響應(yīng)機(jī)制不同，抗寒性產(chǎn)生差異的主要原因是牛疊肚1號和2號在越冬期莖保水能力更高，在低溫脅迫下誘導(dǎo)產(chǎn)生滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的水平較強(qiáng)，同時抗膜脂過氧化能力也發(fā)揮了重要作用。該研究為解析樹莓抗寒性提供研究基礎(chǔ)，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上選育樹莓抗寒品種提供指導(dǎo)。

4 討論

水分是植物生長過程中控制植物生命活動的重要組成成分，植物的含水量與其代謝活動有著密切的關(guān)系。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，野生資源牛疊肚和樹莓栽培品種莖的相對含水量在低溫期（2021 年1 月11 日）前呈下降趨勢，說明隨著溫度降低，樹莓莖不斷失水而抗寒性下降，經(jīng)過低溫期后野生資源牛疊肚莖相對含水量又恢復(fù)到越冬期之前水平，但是栽培品種莖相對含水量越冬期后一直處于較低水平，低溫敏感型樹莓在越冬過程中相對含水量的變化趨勢與姜蓓蓓[20]的研究結(jié)果一致。

植物能利用自身防御系統(tǒng)，通過調(diào)節(jié)代謝物質(zhì)來降低逆境傷害[21]。脯氨酸含量增加可以幫助細(xì)胞保水，逆境脅迫下積累脯氨酸含量，有利于細(xì)胞恢復(fù)生長[22]。本試驗結(jié)果表明，在越冬期樹莓莖游離脯氨酸含量呈先上升后下降趨勢，這是因為樹莓莖在受到低溫傷害時會促進(jìn)脯氨酸的合成，使脯氨酸含量累積并增加。而在低溫來臨前野生資源牛疊肚莖脯氨酸含量升高幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過栽培品種，可以更好地應(yīng)對低溫傷害[23]。在自然越冬條件下樹莓各品種莖可溶性蛋白質(zhì)含量變化整體呈先上升后下降趨勢。1月11日前由于植株受到了持續(xù)低溫傷害，樹莓莖可溶性蛋白質(zhì)含量增加，從而增加細(xì)胞中束縛水含量，以減少原生質(zhì)體結(jié)冰，降低傷害[24]。而1 月11 日后隨著溫度的上升可溶性蛋白質(zhì)含量下降。但在3月25日樹莓莖可溶性蛋白質(zhì)含量又上升可能是由于春季溫度上升，樹莓莖水分喪失嚴(yán)重，植株受傷程度再次加重。這與自然越冬時姜花屬植物生理指標(biāo)變化及抗寒性評價結(jié)果一致[25]。同時在研究山西梨的抗寒性中發(fā)現(xiàn)，枝條可溶性糖含量越高其抗寒性越強(qiáng)[26]。可溶性糖積累使細(xì)胞中原生質(zhì)濃度增加，以防細(xì)胞液結(jié)冰，增強(qiáng)流動性，是植物體內(nèi)重要的保護(hù)物質(zhì)[27]。本研究表明，越冬期樹莓莖可溶性糖含量先上升后下降，1 月11 日前可溶糖含量逐漸增加，是由于隨著溫度降低，細(xì)胞通過積累可溶糖含量來減少低溫對細(xì)胞的傷害；1 月11 日—3 月25 日環(huán)境溫度逐漸上升，樹莓莖可溶糖含量降低，而此時‘波拉娜’莖可溶性糖含量較高可能是由于其低溫期后恢復(fù)能力較差。樹莓莖淀粉含量與可溶性糖含量變化趨勢相反，是由于淀粉轉(zhuǎn)化為可溶性糖來抵抗低溫[28]。

在低溫脅迫下，植物代謝失調(diào)會產(chǎn)生大量自由基，而SOD 可清除O2-來發(fā)揮保護(hù)酶的作用[29]。本試驗結(jié)果表明，野生資源SOD 活性高于栽培品種，是由于野生樹莓利用高SOD 活性清除過剩的自由基來緩解低溫環(huán)境帶來的傷害。POD 在保護(hù)酶系統(tǒng)中主要的作用是降解過氧化物[30]。本研究發(fā)現(xiàn)，樹莓野生資源莖POD 活性低于栽培品種，可能原因是，樹莓栽培品種對低溫更敏感，在越冬初期便啟動POD 降解過氧化物，之后隨低溫脅迫強(qiáng)度加大其活性逐漸增強(qiáng)，促進(jìn)細(xì)胞產(chǎn)生自我保護(hù)機(jī)制。而野生資源牛疊肚莖POD 活性在整個越冬期變幅不大，可能是牛疊肚含有較高的相對含水量及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)使得植株抗寒能力更強(qiáng)，在低溫脅迫下體內(nèi)過氧化物增幅較小，不足以激發(fā)POD的響應(yīng)。本研究結(jié)果與張玉霞等[31]對苜?？购缘难芯拷Y(jié)果一致。低溫脅迫促使植物產(chǎn)生H2O2，而CAT能將其分解成水以減緩植物受傷程度[32]。在越冬期樹莓莖CAT活性呈先上升后下降趨勢，說明隨著低溫加劇，細(xì)胞內(nèi)氧化物增加，為保護(hù)細(xì)胞不受傷害，細(xì)胞內(nèi)CAT 酶活性增強(qiáng)，而后期氣溫回升，CAT 活性隨即降低。野生資源牛疊肚莖CAT活性變化幅度更小，同樣表明牛疊肚自身生理抗寒性更強(qiáng)，本結(jié)果與對葡萄砧木抗寒性結(jié)果一致[33]。

植物遭受低溫脅迫，最先受到傷害的是細(xì)胞膜[34]，破壞膜半透性，提高細(xì)胞膜通透性，致使膜內(nèi)溶質(zhì)外滲，最終引起植株死亡[35]。電導(dǎo)率能表征植物受低溫傷害的程度[36]。本研究表明，隨著自然低溫強(qiáng)度加大，樹莓栽培品種莖相對電導(dǎo)率急速增加，而野生資源牛疊肚莖相對電導(dǎo)率上升幅度不大。說明栽培品種細(xì)胞膜受損比野生資源牛疊肚更加嚴(yán)重，細(xì)胞電解質(zhì)外滲程度更大，抗寒性更差。低溫期后相對電導(dǎo)率居高不下可能是因為MDA 含量的積累損傷了生物膜[37]。MDA含量可以反映膜質(zhì)過氧化的程度，膜質(zhì)過氧化程度越低植物抗逆性就越強(qiáng)[38]。本試驗表明，樹莓不同品種莖MDA 含量在12 月8 日之前呈上升趨勢，可能是越冬初期溫度逐漸降低增加了樹莓莖細(xì)胞膜脂過氧化程度；12月26日之后MDA含量有短暫的下降，可能是由于在低溫下細(xì)胞內(nèi)保護(hù)酶的應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生SOD、POD、CAT等物質(zhì)以清除MDA對植物的傷害。

在中國北方地區(qū)，樹莓栽培品種自然越冬十分困難。本研究主要是針對不同品種樹莓莖越冬過程中相對含水量、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、抗氧化酶系統(tǒng)以及細(xì)胞膜系統(tǒng)的變化進(jìn)行研究，解析野生樹莓資源冬季抗寒的生理優(yōu)勢，為今后抗寒基因的篩選提供參考。然而，其他因素對樹莓莖抵御低溫是否有影響、如何影響需進(jìn)一步研究，同時相同低溫條件下，不同品種樹莓莖細(xì)胞結(jié)構(gòu)及潛在基因的研究應(yīng)作為今后研究的重點，以早日消除栽培品種自然越冬障礙。