盧桂清,吳姍娜

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院,福建 廈門 361000)

帕瑞昔布鈉是屬于特異性的環(huán)氧合酶-2 (COX-2)抑制劑屬于特異性抑制劑的一種,該藥物應(yīng)用于慢性、急性疼痛鎮(zhèn)痛治療中,通過(guò)抑制COX-2使得患者的前列腺素生成被抑制,起到明顯鎮(zhèn)痛效果。帕瑞昔布鈉作為非甾體抗炎藥的一種,主要給藥方式為靜脈滴注、肌肉注射,臨床應(yīng)用率較高[1-2]。帕瑞昔布鈉制作需要使用白色粉末,可溶于水,268℃熔點(diǎn)。該藥物合成中需要使用有機(jī)溶液二氯甲烷、甲醇、乙醇、環(huán)己烷等,根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》相關(guān)要求,需要對(duì)該藥物有機(jī)溶液殘留量進(jìn)行控制,以有效確保藥物品質(zhì)。在帕瑞昔布鈉質(zhì)控過(guò)程中,頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定準(zhǔn)確性較高,建立該種檢驗(yàn)方法實(shí)用意義較高[3-4]。本文研究對(duì)殘留溶劑測(cè)定(帕瑞昔布鈉)進(jìn)行分析,探究氣相色譜法應(yīng)用可行性,報(bào)告如下。

1 儀器及材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

Agilent DB-624毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm,1.8μm)、電子分析天平(BS124S;德國(guó)Sartorius股份有限公司)、頂空進(jìn)樣器(7697A)、氫空一體機(jī)(HA-300;北京中惠普分析技術(shù)研究所)等。

1.2 材料

帕瑞昔布鈉(成都克萊蒙醫(yī)藥科技有限公司)、N,N-二甲基甲酰胺(HPLC級(jí);上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?、正己烷(HPLC級(jí);上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?、無(wú)水乙醇(HPLC級(jí);上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?、二氯甲烷(HPLC級(jí);成都科龍化工試劑廠)、乙酸乙酯(HPLC級(jí);天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)、三乙胺(HPLC級(jí);天津科密歐化學(xué)試劑有限公司);4-二甲氨基吡啶(HPLC級(jí);上海易勢(shì)化工有限公司)。

1.3 測(cè)試樣品配置

混合對(duì)照溶液:選取適量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺,制成要求(0.55 mg乙醇+0.06 mg二氯甲烷+0.029 mg正己烷+0.032 mg三乙胺+0.5 mg乙酸乙酯+0.5mg 4-二甲氨基吡啶)/mL,20mL頂空瓶中放置,密封。

對(duì)照溶液:二甲基亞砜+實(shí)驗(yàn)溶劑(包括二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺),分別進(jìn)行配置,100mL量瓶中放置,稀釋定容至刻度。

供試溶液:帕瑞昔布鈉原料藥約100mg,頂空瓶中防治,精密量取1.0mL二甲基亞砜溶解,密封。

2 結(jié)果

2.1 色譜條件分析

經(jīng)過(guò)試驗(yàn)測(cè)定發(fā)現(xiàn),條件B進(jìn)行二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺測(cè)定條件,上述殘留溶劑測(cè)定分離度更為理想,詳見(jiàn)表1。

表1 色譜條件

2.2 檢測(cè)限情況

使用精密測(cè)量?jī)x器,選取適量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺增加到對(duì)照溶液中,放置于不同量瓶中,采用逐級(jí)稀釋法,獲得一系列不同濃度溶液,將獲得不同濃度的溶液放置于頂空瓶中密封待測(cè)。使用選擇條件B對(duì)不同濃度溶液進(jìn)行測(cè)定,記錄色譜圖,以信噪比10:1為檢測(cè)限,以信噪比3:1為定量限度,結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 檢測(cè)限情況(μg)

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線分析

使用精密測(cè)量?jī)x器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺0.1mL、0.2mL、0.5mL、0.8mL、1.2mL、1.5mL放置于對(duì)照溶液中,分置于10mL量瓶中,按照要求稀釋至要求刻度。使用精密測(cè)量?jī)x器,取上述配制溶液1.0mL,放置于20mL頂空瓶中密封,搖勻后獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)缺陷溶液按照“2.1”中條件B進(jìn)行氣相色譜法測(cè)定,各殘留溶劑的質(zhì)量濃度ρ(單位:mg/L)為橫坐標(biāo),峰面積A為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸分析,結(jié)果顯示二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺在各自的質(zhì)量濃度內(nèi)線性關(guān)系良好,詳見(jiàn)表3。

表3 線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)

2.4 精密度、穩(wěn)定性情況

使用精密測(cè)量?jī)x器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合對(duì)照溶液1.2mL放置于頂空瓶?jī)?nèi),共計(jì)選取8份,密封處理。按照“2.1”條件B進(jìn)行氣相色譜法測(cè)定,記錄色譜圖上二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷色譜峰面積,進(jìn)行RSD計(jì)算,結(jié)果顯示二氯甲烷RSD 1.14%、乙醇RSD 1.12%、乙酸乙酯RSD 1.03%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.18%、正己烷RSD 2.18%、三乙胺RSD 2.16%,結(jié)果表明色譜系統(tǒng)精密度較為理想。選取同一批次帕瑞昔布鈉供試溶液,按照“2.1”條件B進(jìn)行氣相色譜法測(cè)定,結(jié)果顯示測(cè)定微量乙醇,RSD 1.27%。

使用精密測(cè)量?jī)x器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合對(duì)照溶液,1.2mL放置于頂空瓶?jī)?nèi),共計(jì)選取8份,密封處理。放置于室溫環(huán)境,每間隔1h取溶液,按照“2.1”條件B進(jìn)行氣相色譜法測(cè)定,記錄各個(gè)殘留溶劑的峰面積。計(jì)算結(jié)果顯示二氯甲烷RSD 1.34%、乙醇RSD 1.82%、乙酸乙酯RSD 2.04%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.57%、正己烷RSD 2.36%、三乙胺RSD 2.49%,結(jié)果表明混合對(duì)照溶液在室溫條件下24 h內(nèi)穩(wěn)定。

3 討論

帕瑞昔布鈉作為臨床上有效鎮(zhèn)痛的非甾體藥物,可快速鎮(zhèn)痛,改善患者軀體不適感,確保藥物品質(zhì)可使得藥物效用充分發(fā)揮。受藥物制作工藝限制,目前該藥物在制作期間,需要使用乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物質(zhì),可能存在有機(jī)溶液殘留情況,建立一種科學(xué)、準(zhǔn)確測(cè)定方法,對(duì)于控制帕瑞昔布鈉質(zhì)量具有積極意義[5-6]。

氣相色譜法可以進(jìn)行藥物相關(guān)殘留成分、雜質(zhì)等測(cè)定,是目前藥品質(zhì)量控制中較為常用的技術(shù)之一[7]。采用氣相色譜法測(cè)定時(shí),根據(jù)帕瑞昔布鈉可能存在的乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物質(zhì)特點(diǎn),選擇相應(yīng)色譜條件,確保測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確。因本品需要檢測(cè)的有機(jī)溶劑的極性應(yīng)與色譜柱的極性相似,所以采用中極性的6%氰丙基苯基、94%二甲基聚硅氧烷、交聯(lián)聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱為色譜柱進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)測(cè)定中,選擇采取頂空進(jìn)樣的方式,減少色譜系統(tǒng)出現(xiàn)污染情況,進(jìn)一步提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性。氣相色譜法分析中,尤其考慮到三乙胺、4-二甲氨基吡啶物質(zhì)的特殊性,在選擇色譜條件時(shí),單獨(dú)進(jìn)行設(shè)計(jì),確保測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠[8]。此次研究結(jié)果顯示6種殘留溶劑在各自的質(zhì)量濃度內(nèi)線性關(guān)系良好;氣相色譜法測(cè)定帕瑞昔布鈉中殘留溶劑的精密度、穩(wěn)定性情況理想。

綜上所述,氣相色譜法測(cè)定帕瑞昔布鈉中殘留溶劑的精密度、穩(wěn)定性情況理想。