董澤民，余春梅，熊莉平，徐 潔，羅立駿，曾令高△

（1.西南藥業(yè)股份有限公司，重慶 400038； 2.重慶市食品藥品檢驗檢測研究院·國家藥品監(jiān)督管理局麻醉精神藥品質(zhì)量監(jiān)測重點實驗室，重慶 401121）

癌性疼痛臨床治療主要采用三階梯療法，嗎啡為第三階梯代表藥物，主要用于治療中度或重度癌性疼痛，但近年來有報道其可用于治療急性心肌梗死并急性肺水腫［1］。目前，國內(nèi)上市的嗎啡緩釋片僅有硫酸嗎啡緩釋片（商品名美施康定，萌蒂< 中國> 制藥有限公司）和鹽酸嗎啡緩釋片（商品名美菲康，西南藥業(yè)股份有限公司）。鹽酸嗎啡緩釋片以十八醇為緩釋骨架材料，通過熔融法制粒壓片包衣，產(chǎn)品在體內(nèi)外均具有12 h 緩慢釋放的特征，臨床療效顯著［2-5］，可克服嗎啡生物半衰期短、需頻繁給藥的缺點。十八醇作為鹽酸嗎啡緩釋片的釋藥控制型輔料，其來源變化可能會對產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性造成影響。根據(jù)《已上市化學(xué)藥品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》［6］，口服緩釋制劑處方中釋藥控制性輔料的供應(yīng)商變更屬于微小變更，變更后樣品應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，藥物溶出曲線應(yīng)與變更前一致，應(yīng)對變更后生產(chǎn)的樣品進行穩(wěn)定性考察。本研究中采用不同供應(yīng)商的十八醇制備鹽酸嗎啡緩釋片，考察其對制劑晶型、硬度、脆碎度、含量、有關(guān)物質(zhì)、溶出曲線等關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響及制劑的穩(wěn)定性?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LD3100-1 型電子天平（沈陽龍騰電子有限公司，精度為十分之一）；DF-101S型集熱式恒溫加熱攪拌器（鄭州科豐儀器設(shè)備有限公司）；YK - 160 型搖擺式顆粒機（常州市振力干燥設(shè)備有限公司）；ZP10A型旋轉(zhuǎn)式壓片機（北京新龍立科技有限公司）；BG1-5 型高效包衣機（中國航空工業(yè)集團公司北京航空制造工程研究所）；SHH-500SD型藥品穩(wěn)定性試驗箱，SHH-300GD-2 型藥品強光照射試驗箱，均購自重慶市永生實驗儀器廠；SY-3型片劑多用測定儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；ME203E型電子天平（梅特勒-托利多儀器<上海> 有限公司，精度為千分之一）；FADT-1202RC型自動溶出度儀（上海富科思分析儀器有限公司）；1260VWD型高效液相色譜儀（Agilent 科技有限公司）；XRD-700010300型X射線粉末衍射儀（日本Shimadzu公司）。

1.2 試藥

鹽酸嗎啡原料藥（青海制藥廠有限公司，批號為20171004）；十八醇（供應(yīng)商A，湖南爾康制藥股份有限公司，批號為105220170602；供應(yīng)商B，江西阿爾法高科藥業(yè)有限公司，批號為20180101）；羥丙甲纖維素（陶氏化學(xué)公司，批號為D011F3CL01）；硬脂酸鎂（湖州展望藥業(yè)有限公司，批號為20170115）；胃溶型薄膜包衣預(yù)混劑（上?？房蛋录夹g(shù)有限公司，批號為SH599531）；水為純化水；嗎啡對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為043-9209，含量為100.0%）；雜質(zhì)A（可待因）對照品（批號為170317，含量為94.2%），雜質(zhì)B（偽嗎啡）對照品（批號為170720，含量為97.9%），雜質(zhì)C（東罌粟堿）對照品（批號為170718，含量為95.1%），雜質(zhì)D（10 - 羥基嗎啡）對照品（批號為170914，含量為95.9%），雜質(zhì)E（嗎啡酮）對照品（批號為170520，含量為92.3%）；雜質(zhì)F（N-氧嗎啡）對照品（批號為170523，含量為94.3%），購于上海醫(yī)藥工業(yè)研究總院。

2 方法與結(jié)果

2.1 原輔料相容性試驗

按《化學(xué)藥物制劑研究基本技術(shù)指導(dǎo)原則》［7］中的相關(guān)要求進行原輔料相容性試驗。將鹽酸嗎啡、鹽酸嗎啡分別與供應(yīng)商A 和B 的十八醇混合物在強光照射條件［照度（5 000 ± 500）lx，紫外100 μW/ cm2）和高溫高濕條件［60 ℃，相對濕度（RH）75%］下考察30 d，分別于第5，10，30 天取樣，比較性狀、有關(guān)物質(zhì)的變化及吸濕增重等項目。

吸濕增重測定：照2020 年版《中國藥典（四部）》中通則9103 藥物引濕性試驗指導(dǎo)原則［8］485測定。取干燥的具塞玻璃稱量瓶，于試驗前1 d 置高溫高濕箱（溫度60 ℃，RH 75%）內(nèi)，精密稱定質(zhì)量（m1）；取原料或原輔料混合物適量，平鋪于稱量瓶中，厚度約1 mm，精密稱定質(zhì)量（m2）。將稱量瓶敞口，并與瓶蓋同置上述高溫高濕條件下5，10，30 d，蓋好稱量瓶蓋，精密稱定質(zhì)量（m3）。吸濕增重（%）=（m3-m2）/（m2-m1）×100%。

有關(guān)物質(zhì)測定：照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0512 高效液相色譜（HPLC）法［8］61測定。取原料或原輔料混合物適量（約相當(dāng)于鹽酸嗎啡60 mg），置50 mL容量瓶中，加溶劑（1%醋酸溶液，下同）40 mL，振搖、超聲使鹽酸嗎啡溶解，加溶劑定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；精密量取1 mL，加溶劑稀釋至鹽酸嗎啡質(zhì)量濃度為2.4 μg/mL，作為對照品溶液；另取雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)F、嗎啡對照品各適量，加溶劑溶解，制成每1 mL 含雜質(zhì)A，B，C，D，E，F(xiàn) 各6 μg及嗎啡24 μg的溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗與雜質(zhì)峰定位溶液。填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為庚烷磺酸鈉溶液（A，取庚烷磺酸鈉1.01 g，加水1 000 mL使溶解，用磷酸調(diào)pH 至2.6）-甲醇（B），梯度洗脫；檢測波長為230 nm；柱溫為35 ℃；流速為1.5 mL/min。取系統(tǒng)適用性試驗與雜質(zhì)峰定位溶液20 μL注入液相色譜儀，各色譜峰間的分離度均符合要求，嗎啡色譜峰保留時間約為17 min。精密量取對照品溶液與供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀。供試品溶液色譜圖中，如有與系統(tǒng)適用性試驗溶液中雜質(zhì)保留時間一致的色譜峰，則按加校正因子的主成分自身對照法以峰面積計算各雜質(zhì)的含量。

性狀：由于十八醇的熔點為57～60 ℃，故高溫高濕條件下鹽酸嗎啡和十八醇混合物會熔融形成塊狀。2 個供應(yīng)商的十八醇與鹽酸嗎啡混合物在強光照射及高溫高濕條件下放置30 d 與0 d 相比有關(guān)物質(zhì)無變化，表明2 個供應(yīng)商的十八醇與鹽酸嗎啡相容性良好，兩者無相互作用。結(jié)果見表1。

2.2 鹽酸嗎啡緩釋片制備

鹽酸嗎啡熔點較高且對熱穩(wěn)定，故采用熔融制粒法制備鹽酸嗎啡緩釋片。將鹽酸嗎啡、羥丙甲纖維素進行預(yù)混，加熱十八醇，根據(jù)物料狀態(tài)可適當(dāng)攪拌至其完全熔化，加入鹽酸嗎啡、羥丙甲纖維素預(yù)混物，不斷攪拌至原輔料混勻，倒出物料，不斷攪拌使其散熱均勻，冷卻至半固體狀時用搖擺制粒機制粒，將顆粒整粒后加入硬脂酸鎂進行總混，使用旋轉(zhuǎn)壓片機將總混顆粒壓成素片，最后采用胃溶型薄膜包衣預(yù)混劑制備包衣液進行包衣。

2.3 十八醇對鹽酸嗎啡緩釋片關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響

晶型：使用X 射線粉末衍射儀檢測鹽酸嗎啡、十八醇及鹽酸嗎啡緩釋片的晶型。測試條件為銅靶，管電流為40 mA，管電壓為40 kV，步長為0.013°，掃描范圍為3°～45°。將樣品均勻置塑料盤中壓平，放入樣品臺操作。結(jié)果2 個供應(yīng)商的十八醇晶型相同，其制備的鹽酸嗎啡緩釋片晶型也相同；鹽酸嗎啡緩釋片的主要晶型特征峰與十八醇相似，且十八醇在片劑制備前后的晶型特征峰完全保留，表明鹽酸嗎啡在片劑制備過程中被十八醇包裹，兩者無相互作用。詳見圖1。

A - B.鹽酸嗎啡緩釋片（輔料十八醇分別源于供應(yīng)商B和A）C - D.十八醇（分別為供應(yīng)商B和A） E.鹽酸嗎啡圖1 X射線粉末衍射圖A - B.Morphine Hydrochloride Sustained - Release Tablets（prepared by stearyl alcohol from suppliers B and A respectively） C - D.Stearyl alcohol（suppliers B and A respectively） E.Morphine hydrochlorideFig.1 X - ray powder diffraction pattern

硬度：取供應(yīng)商A 和B的十八醇所制備鹽酸嗎啡緩釋片素片各10片，使用片劑多用測定儀測定樣品硬度。結(jié)果2 種片劑的平均硬度分別為5.80，5.87 kg，RSD分別為3.65%，3.24%（n=10），表明2 個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的硬度無顯著差異。

脆碎度：照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0923片劑脆碎度檢查法［8］131檢查，取供應(yīng)商A 和B 的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片素片各6.5 g，精密稱定初始質(zhì)量，置片劑多用測定儀圓筒中，轉(zhuǎn)動（轉(zhuǎn)速為25 r/min）4 min，取出，吹去粉末，精密稱定質(zhì)量，計算減失質(zhì)量，觀察有無斷裂、龜裂及粉碎的片。結(jié)果2 種片劑的減失質(zhì)量分別為0.17%，0.15%，無顯著差異，且均無裂片與碎片，表明2個供應(yīng)商十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的脆碎度無顯著差異。

含量：照（2020 年版《中國藥典（四部）》通則0512 HPLC 法［8］61測定。填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（1∶4，V/V）；檢測波長為280 nm。取供應(yīng)商A和B的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片各10片，精密稱定，瑪瑙乳缽研細，取適量（約相當(dāng)于鹽酸嗎啡35 mg），精密稱定，置250 mL容量瓶中，加水適量，充分振搖使溶解，用水定容，搖勻，用0.45 μm濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液20 μL，注入液相色譜儀測定，記錄色譜圖；另取嗎啡對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋成每1 mL 含0.1 mg 的溶液，按擬訂色譜條件進樣測定，按外標(biāo)法以峰面積計算含量，結(jié)果乘以1.317，即得供試品中的鹽酸嗎啡含量。結(jié)果見表2，表明2 個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的含量無顯著差異。

表2 2個供應(yīng)商的十八醇所制備片劑的含量、有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果（%）Tab.2 Determination results of the content and related substance of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers（%）

有關(guān)物質(zhì)：按2.1 項下有關(guān)物質(zhì)測定方法測定。結(jié)果見表2，表明2 個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的有關(guān)物質(zhì)無顯著差異。

溶出曲線：取2個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片，照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0931）溶出度與釋放度測定法［8］132測定，以水、pH 1.2 鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液各500 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/ min，依法操作，分別于1，2，3，4，5，6 h 時取續(xù)濾液1.5～5.0 mL（自動取樣，取樣口加裝10 μm 過濾頭）作為供試品溶液，并及時在溶出杯中補充相同溫度的溶出介質(zhì)1.0～5.0 mL。另精密量取含量測定的對照品溶液適量，分別加流動相稀釋成每1 mL 含0.05 mg 的對照品溶液，取適量，并進行含量測定，計算樣品在不同時間的溶出量。采用非依賴模型的相似因子（f2）衡量2 條溶出曲線的相似度，按公式（1）計算。f2值越接近100，認為2 條曲線越相似。一般情況下，f2值高于50，可認為2條曲線具有相似性。

供應(yīng)商B 的十八醇所制備的片劑在各介質(zhì)中的溶出速率均略快于供應(yīng)商A 的十八醇制備的片劑；2種片劑在各溶出介質(zhì)中溶出曲線的f2均大于50，表明2種片劑在各溶出介質(zhì)中溶出曲線均相似。詳見圖2。

A.水（f2 = 85） B.pH 1.2鹽酸溶液（f2 = 69） C.pH 4.5醋酸鹽緩沖液（f2 = 67） D.pH 6.8磷酸鹽緩沖液（f2 = 70）圖2 2個供應(yīng)商的十八醇所制備片劑在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線A.Water（f2 = 85） B.pH 1.2 hydrochloric acid solution（f2 = 69）C.pH 4.5 acetate buffer（f2 = 67） D.pH 6.8 phosphate buffer（f2 = 70）Fig.2 Dissolution profiles of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers in different media

2.4 穩(wěn)定性考察

取2個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片，照2020 年版《中國藥典（四部）》指導(dǎo)原則9001 原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則［8］457，在溫度（40±2）℃、RH（75± 5）%條件下考察0，3，6 個月。在上述條件下，2個供應(yīng)商的十八醇所制備片劑均為薄膜衣片，除去包衣后顯類白色；有關(guān)物質(zhì)、溶出度、含量均未見顯著變化。2 種片劑在各時間點的關(guān)鍵質(zhì)量屬性無顯著差異，詳見表3。

表3 2個供應(yīng)商的十八醇所制備片劑的穩(wěn)定性考察結(jié)果Tab.3 Results of the stability test of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers

3 討論

我國制藥企業(yè)過去存在“重原料，輕輔料”的現(xiàn)象，企業(yè)為降低成本而采用劣質(zhì)輔料曾導(dǎo)致“毒膠囊事件”［9］，甚至出現(xiàn)因替換輔料導(dǎo)致患者用藥后死亡的“齊二藥事件”。國家藥品監(jiān)督管理局2012 年發(fā)布《加強藥用輔料監(jiān)督管理有關(guān)規(guī)定》［10］，2016 年發(fā)布《關(guān)于藥包材藥用輔料與藥品關(guān)聯(lián)審評審批有關(guān)事項的公告》［11］。一系列政策加強了藥用輔料生產(chǎn)企業(yè)、藥品制劑生產(chǎn)企業(yè)及藥品監(jiān)督管理部門對藥用輔料的管理與質(zhì)量保證。近年來，隨著進口藥用輔料在國內(nèi)的推廣應(yīng)用及仿制藥質(zhì)量與療效一致性評價的全面開展［12］，制藥企業(yè)越來越重視輔料對制劑關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響。藥用輔料功能性相關(guān)指標(biāo)原則［8］539也被納入《中國藥典》，指導(dǎo)制藥企業(yè)選擇與應(yīng)用輔料。

不同供應(yīng)商的十八醇雖均符合《中國藥典》規(guī)定，但其制備工藝或功能性指標(biāo)的差異可能對制劑產(chǎn)品質(zhì)量造成影響，故在進行供應(yīng)商更換前必須進行產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性的對比研究。國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心的藥用輔料登記數(shù)據(jù)顯示，國內(nèi)僅4家企業(yè)具有十八醇的批準(zhǔn)文號且登記狀態(tài)標(biāo)識為“A”，其中湖南爾康制藥股份有限公司的十八醇于2008 年獲得批準(zhǔn)文號，早于其他企業(yè)，且該企業(yè)為國內(nèi)藥用輔料優(yōu)秀企業(yè)之一；江西阿爾法高科藥業(yè)有限公司的十八醇具有多種粒徑，還有專供緩釋制劑的定制產(chǎn)品，產(chǎn)品競爭力較強。故本研究中采用供應(yīng)商A和B的十八醇所制備鹽酸嗎啡緩釋片進行關(guān)鍵質(zhì)量屬性的對比研究。結(jié)果顯示，2 個供應(yīng)商的十八醇制備的產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性無顯著差異，且穩(wěn)定性良好，符合變更制劑處方中輔料供應(yīng)商相關(guān)技術(shù)要求［6］。故2 個供應(yīng)商的十八醇可相互替換，均能保證鹽酸嗎啡緩釋片的質(zhì)量穩(wěn)定、可控。

鹽酸嗎啡緩釋片為蠟質(zhì)類骨架緩釋片，十八醇在處方中作為蠟質(zhì)緩釋骨架材料，本身不溶解，但在胃腸道環(huán)境下可逐漸溶蝕，鹽酸嗎啡可通過孔道擴散和骨架溶蝕相結(jié)合的機制而釋放。在釋藥過程中，由于骨架的釋藥面積隨時間而不斷變化，故難以維持零級釋放速率，呈一級速率釋藥［13］。本研究中的2 個供應(yīng)商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片在各溶出介質(zhì)中的溶出曲線相似，但供應(yīng)商B 的十八醇所制備片劑釋放略快，這可能與十八醇溶解度、熔點等功能性指標(biāo)相關(guān)，需作進一步研究，考察輔料功能性指標(biāo)與制劑產(chǎn)品溶出速率的相關(guān)性，更好地控制制劑質(zhì)量。