孫瑞花 郝文杰 張躍軍 張長(zhǎng)菊

HBV感染是引起原發(fā)性肝癌的重要相關(guān)因素,且HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎(CHB)患者HCC發(fā)生率顯著高于HBeAg陰性CHB患者[1-3]。目前,CHB患者主要使用干擾素類藥物和核苷酸類藥物或免疫調(diào)節(jié)治療[4,5]。聚乙二醇干擾素(PEG-IFN)臨床療效優(yōu)于普通干擾素,且具有用藥方便和耐受良好等優(yōu)點(diǎn)[6]。使用干擾素類藥物治療CHB時(shí)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)監(jiān)測(cè)對(duì)預(yù)測(cè)療效很重要,如12周時(shí)病毒學(xué)應(yīng)答、治療前HBV DNA、ALT水平及患者的性別是預(yù)測(cè)療效的主要因素,可為臨床用藥提供一定指導(dǎo)[7]。本研究分析PEG-IFN治療期間CHB患者的細(xì)胞因子和病毒學(xué)標(biāo)志物的變化,預(yù)測(cè)與IFN治療效果的相關(guān)性。

資料與方法

一、病例來(lái)源

選取2020年1月至2022年5月收治的HBeAg陽(yáng)性CHB患者117例,男68例,女49例;年齡(36.0±9.7)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):符合《慢性乙型肝炎防治指南(2019年版)》[7]標(biāo)準(zhǔn);年齡18～65歲;至少半年以上未使用過(guò)干擾素抗病毒藥物或其他治療CHB藥物;對(duì)研究知情同意且依從性良好,可定期復(fù)查血液標(biāo)本。排除標(biāo)準(zhǔn):存在其他類型肝炎如甲型肝炎;自身免疫性肝病、肝硬化、肝癌、代謝性肝病等;需長(zhǎng)期或大量服用除干擾素外的其他藥物或酗酒者;合并HIV、巨細(xì)胞病毒感染等;患有嚴(yán)重心、腦、肺、腎等重要臟器疾病者;哺乳、妊娠或近期有生育計(jì)劃的婦女。

二、治療方法

PEG-IFN[拜耳醫(yī)藥(上海)有限公司]1.0 μg/kg皮下注射,1次/周,連續(xù)治療24周和48周。

三、指標(biāo)檢測(cè)

日立公司全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血生化指標(biāo);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HBV DNA(試劑購(gòu)自上?？迫A生物工程股份有限公司);ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子(試劑購(gòu)自上海江萊生物科技有限公司);化學(xué)發(fā)光法通過(guò)森系美康全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)HBsAg、HBeAg。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)。根據(jù)資料類型,采用t檢驗(yàn)/卡方檢驗(yàn)比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、兩組血清學(xué)應(yīng)答比較

117例HBeAg陽(yáng)性CHB患者經(jīng)過(guò)IFN治療48周后,HBeAg應(yīng)答組患者46例,其中男性29例;HBeAg未應(yīng)答組患者71例,其中男性39例。在HBeAg應(yīng)答組中,23例患者HBsAg轉(zhuǎn)陰,HBeAg未應(yīng)答組中,17例患者HBsAg轉(zhuǎn)陰(P<0.05)。治療24周和48周后,未應(yīng)答組HBeAg、HBsAg、HBV DNA下降趨勢(shì)均小于應(yīng)答組(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 治療后兩組患者病毒標(biāo)志物比較(±s)

二、兩組肝功能指標(biāo)和細(xì)胞因子比較

IFN治療24周時(shí),未應(yīng)答組ALT、AST、TNF-α、TGF-β水平明顯高于應(yīng)答組(P<0.05),而IFN-γ、IL-10水平變化無(wú)明顯意義。治療48周后,未應(yīng)答組ALT、AST、TNF-α、TGF-β、IL-10水平明顯高于應(yīng)答組,IFN-γ水平明顯低于應(yīng)答組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 兩組肝功能指標(biāo)及細(xì)胞因子比較(±s)

三、兩組細(xì)胞因子與血清學(xué)HBeAg關(guān)系

117例患者經(jīng)PEG-IFN治療12周后,HBeAg與其血清ALT、TNF-α、TGF-β水平呈中度正相關(guān)(r=0.439、0.418、0.266,P<0.01),與血清AST水平呈低度正相關(guān)(r=0.202,P<0.01),與血清IFN-γ、IL-10水平相關(guān)性不明顯。治療48周后,HBeAg水平與AST、TNF-α、TGF-β、IFN-γ、IL-10均呈中度正相關(guān)(r=0.411、0.284、0.535、0.277、0.250,P<0.01),與血清ALT水平相關(guān)性不顯著。

討 論

臨床常將HBV DNA應(yīng)答作為HBeAg陽(yáng)性CHB患者治療的期望終點(diǎn),將HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換作為臨床治療的滿意終點(diǎn)。干擾素的抗病毒治療機(jī)制包括兩種:通過(guò)免疫調(diào)節(jié)直接抑制病毒復(fù)制和消除已感染病毒的細(xì)胞[8]。PEG-IFN主要是通過(guò)促進(jìn)免疫細(xì)胞功能和細(xì)胞因子表達(dá),誘導(dǎo)干擾素信號(hào)通路編碼多種具有抗病毒作用的蛋白質(zhì)抑制HBV的復(fù)制[9]。與核苷酸類似物相比,經(jīng)干擾素治療后的患者血清HBeAg轉(zhuǎn)陰率更高,血清HBsAg消失效果更顯著[10-12]。但干擾素的療效受到患者年齡、免疫功能、HBV DNA載量、血清抗原水平以及病毒基因型等因素的影響。為了更有效合理地指導(dǎo)臨床用藥,避免過(guò)度或不必要的藥物治療,可根據(jù)治療過(guò)程中細(xì)胞因子和病毒學(xué)標(biāo)志的變化優(yōu)化治療策略。

CHB患者血液中HBsAg水平與肝臟中HBV DNA含量顯著相關(guān),免疫控制主要取決于病毒特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞對(duì)病毒復(fù)制的抑制和病毒感染肝細(xì)胞的清除程度[13]。因此,血液中HBsAg的水平,特別是治療后HBsAg水平的下降,可以預(yù)測(cè)患者停止治療后持續(xù)的病毒應(yīng)答[14,15]。本研究結(jié)果顯示,HBeAg應(yīng)答組中,同時(shí)出現(xiàn)HBsAg應(yīng)答的患者有17例,提示HBsAg應(yīng)答可預(yù)測(cè)HBeAg應(yīng)答。研究表明,PEG-IFN治療HBeAg陰性CHB患者的病毒清除率良好[16]。與HBeAg陰性CHB患者相比,血清HBsAg是HBeAg陽(yáng)性CHB患者肝內(nèi)HBV DNA的更好替代標(biāo)志物[17]。本研究中,PEG-IFN治療24周和48周后,血清HBeAg與AST、TNF-α、TGF-β水平呈現(xiàn)出正相關(guān)性,且HBeAg應(yīng)答組的AST、TNF-α、TGF-β基線水平均與未應(yīng)答組有顯著差異,提示AST、TNF-α、TGF-β可能是預(yù)測(cè)PEG-IFN治療效果的全程臨床指標(biāo)。研究表明,PEG-IFN治療CHB患者48周后,TNF-α、TGF-β水平顯著降低,IFN水平顯著升高,與本研究結(jié)果相符[18,19]。在IFN與血清HBeAg水平的相關(guān)性分析中,24周時(shí)相關(guān)性不明顯,且HBeAg應(yīng)答組與未應(yīng)答組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但48周時(shí)血清HBeAg水平與IFN-γ呈中度正相關(guān),且應(yīng)答組IFN-γ水平明顯高于基線水平。從HBV感染中恢復(fù)和長(zhǎng)期免疫控制主要依賴于HBV特異性的CD8+T細(xì)胞,該細(xì)胞是IFN-γ的主要來(lái)源,這可能是CHB患者IFN水平在治療48周后才出現(xiàn)相關(guān)性的原因[20,21]。

本研究還存在一定局限性。首先,由于臨床上常在抗病毒治療的同時(shí)使用中藥護(hù)肝,導(dǎo)致單純使用PEG-IFN治療的樣本量過(guò)少;其次,細(xì)胞因子是一個(gè)種類、數(shù)量繁多的大家族,各個(gè)細(xì)胞因子間相互作用、相互影響,本研究中只選擇了具有代表性的幾種細(xì)胞因子進(jìn)行分析,缺乏全面性。

綜上所述,細(xì)胞因子TNF-α、TGF-β在治療前后均與血清HBeAg具有相關(guān)性,有成為預(yù)測(cè)PEG-IFN療效臨床指標(biāo)的潛在可能,IFN在早期治療不具有相關(guān)性,在48周時(shí)呈中度正相關(guān),提示IFN可能是預(yù)測(cè)晚期療效的指標(biāo)。而IL在治療過(guò)程中均不具有相關(guān)性,但在治療后顯著下降,提示IL參與CHB的發(fā)展,但對(duì)臨床觀察或監(jiān)測(cè)PEG-IFN的治療效果可能沒(méi)有意義。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。