張改玲

(華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院兒科,廣東 深圳 518052)

傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)是一種急性感染性疾病,多由EB病毒(EBV)致病,主要表現(xiàn)為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大及異型淋巴細(xì)胞增多等癥狀［1］。由于IM病例不典型,體征變化及癥狀多樣,臨床中發(fā)病率有明顯增多趨勢,增加了診治難度［2］?，F(xiàn)階段,我國IM主要發(fā)病在學(xué)齡前期,依據(jù)血清學(xué)調(diào)查,我國EB病毒VCA-IgG陽性率在3～5歲學(xué)齡前兒童中超過90%,已經(jīng)逐漸發(fā)展為該年齡段兒童常見的發(fā)熱病原體,且EB病毒直接關(guān)系到1%的腫瘤發(fā)?。?-4］。因此,需探究便捷、快速及具有特異性的檢查方法,依據(jù)機(jī)體感染EB病毒后會(huì)有抗早期抗原抗體和抗衣殼抗原抗體等不同類型抗原抗體產(chǎn)生,主要特征是于急性發(fā)病期增高［5］?；诖?本文以傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒為研究對(duì)象,分析實(shí)行不同檢測方法的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料:回顧性分析華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院2020年9月～2021年2月收治于兒科病房的82例傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒,男51例,女31例,年齡1～10歲,平均(5.29±1.35)歲,其中<3歲、3歲～6歲、>6歲者各21、41、20例。研究組病例納入標(biāo)準(zhǔn):①所有小兒均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》(第8版)［6］IM診斷標(biāo)準(zhǔn);②無其他特殊用藥史者;③未并發(fā)其他疾病者;④具備完整臨床資料者。排除標(biāo)準(zhǔn):①并發(fā)惡性腫瘤者;②并發(fā)嚴(yán)重臟器功能不全及先天畸形者［7］。本次研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2方法:回顧性分析本院收治的IM住院患兒臨床資料,評(píng)估指標(biāo)包括患兒年齡、性別、肝脾腫大、淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、發(fā)熱、眼瞼浮腫、皮疹、鼻塞及睡眠打鼾等,在患兒入院第1天于清晨行靜脈血采集,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測EB病毒抗體,按照說明書實(shí)行具體操作;采用Sysmen XN-9000全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血液采集,并進(jìn)行實(shí)際分析,以手工鏡檢分類計(jì)數(shù)異型淋巴細(xì)胞,以西門子ADV2400全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測,按照說明書實(shí)行具體操作;采用BDFACSCanto 2型流式細(xì)胞儀分析T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+T、CD4+T、CD8+T及CD4+/CD8+T細(xì)胞比值),按說明書實(shí)施操作。

1.3觀察指標(biāo):①分析IM患兒臨床特征,包括發(fā)熱、眼瞼水腫、淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、肝腫大、脾腫大及皮疹、鼻塞、睡眠打鼾;②EBV抗體檢測結(jié)果:抗EBA-VCA-IgM和抗EBA-VCA-IgG抗體陽性,且抗EBA-VCA-IgG陰性;抗EBV-VCA-IgM抗體陰性,抗EBV-VCA-IgG抗體陽性,且為低親和力抗體;③觀察并記錄IM患兒EB病毒抗體檢測及淋巴細(xì)胞亞群檢測、聯(lián)合檢測的陽性例數(shù),計(jì)算陽性率。④分析IM患兒不同年齡組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo):分析<3歲、3～6歲、>6歲者ALT、CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值。

2 結(jié)果

2.1IM患兒臨床癥狀分析:82例IM患兒中75例鼻塞,占比91.46%,70例夜間睡眠打鼾,占比85.37%,73例發(fā)熱,占比89.02%,58例咽痛,占比70.73%,79例淋巴結(jié)腫大,占比96.34%,扁桃體炎82例,占比100.00%,41例肝腫大,占比50.00%,61例眼瞼浮腫,占比74.39%,35例脾腫大,占比43.21%,8例皮疹,占比9.76%。

2.2IM患兒EBV抗體檢測結(jié)果:經(jīng)檢測82例IM患兒病毒抗體44例抗EBA-VCA-IgM和抗EBA-VCA-IgG抗體陽性,且抗EBA-VCA-IgG陰性;28例抗EBA-VCA-IgM抗體陰性,抗EBA-VCA-IgG抗體陽性;且10例為低親合力抗體。

2.3IM患兒陽性率:EB病毒抗體檢測陽性54例(65.85%),淋巴細(xì)胞亞群檢測陽性51例(62.20%);聯(lián)合檢測陽性79例(96.34%),聯(lián)合檢測比EB病毒抗體檢測及淋巴細(xì)胞亞群檢測陽性率均更高,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=30.578,P<0.05)。

2.4IM患兒不同年齡組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo):3～6歲組較<3歲組CD3+CD4+T、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值更低,CD3+CD8+T值更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);>6歲組較3～6歲組、<3歲組ALT、CD3+T、CD3+CD8+T水平更高,CD3+CD4+T、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值更低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同年齡組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

3 討論

IM是以EBV為病原體,EBV主要侵犯B淋巴細(xì)胞,伴有潛伏-活化的臨床特征,致使靶淋巴細(xì)胞無限增殖。目前,有研究結(jié)果顯示,IM的發(fā)病機(jī)制與病理損傷的聯(lián)系性較大,參與其中的EBV會(huì)直接造成細(xì)胞損傷［8-9］。近幾年,IM的發(fā)病率明顯升高,主要發(fā)病群體為小兒,會(huì)伴有不同程度的臨床表現(xiàn),導(dǎo)致就診難度增加［10］。本研究中病例主要表現(xiàn)為咽扁桃體炎、眼瞼水腫、淋巴結(jié)腫大及發(fā)熱癥狀,與很多研究結(jié)果相同。值得注意的是,本研究中鼻塞、夜間睡眠打鼾比例較高,且部分患兒為首發(fā)癥狀,在既往報(bào)道中并不多見,綜合分析后認(rèn)為可能與小兒咽喉黏膜下腺體組織及淋巴組織豐富有關(guān)。

現(xiàn)階段,臨床上將外周血異型淋巴細(xì)胞比值超過10%作為診斷IM的一項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)［11］。目前,臨床應(yīng)盡早對(duì)未確定發(fā)熱原因的IM患兒實(shí)行WBC分類計(jì)數(shù)檢驗(yàn),若白細(xì)胞分類異常報(bào)警,需采用顯微鏡檢測血細(xì)胞形態(tài),尤其應(yīng)對(duì)異型淋巴細(xì)胞著重關(guān)注［12-14］。異型淋巴細(xì)胞常于發(fā)病后第3天出現(xiàn),以后逐漸增多,于2～3 w達(dá)峰值,比例可達(dá)50%,之后緩緩降低,一般持續(xù)至5～7 w。即使異型淋巴細(xì)胞首次檢測結(jié)果在10%以下,也不能排除IM,需動(dòng)態(tài)觀察患兒臨床癥狀,綜合分析,適時(shí)復(fù)查。IM可累及多個(gè)器官,尤其是肝臟,并發(fā)癥中最常見的是肝功能受損。肝功能受損主要發(fā)生于病程1～2 w,部分嚴(yán)重病例于發(fā)病第2天即出現(xiàn)肝功能損傷［15-16］。IM患兒肝功能受損表現(xiàn)為酶學(xué)變化,其中常見LDH、AST及ALT升高,本研究肝功能異常者34例,占比41.46%。

T細(xì)胞的來源是淋巴樣前祖細(xì)胞,CD3抗原標(biāo)志于T細(xì)胞表面,CD4標(biāo)志于輔助性T細(xì)胞表面,CD8標(biāo)志于細(xì)胞毒性T細(xì)胞表面,IM患兒的機(jī)體免疫力多由CD4+/CD8+T細(xì)胞比值標(biāo)志,比值降低則代表機(jī)體的細(xì)胞免疫功能受損［17-18］。本研究結(jié)果顯示,患兒的細(xì)胞免疫功能處于紊亂狀態(tài),不同年齡組間差異明顯,究其原因在于患兒機(jī)體在受到EB病毒感染后,B淋巴細(xì)胞表面受體有效結(jié)合病原,將其攝入細(xì)胞內(nèi),受感染的B淋巴細(xì)胞表面抗原發(fā)生改變,引起T淋巴細(xì)胞的強(qiáng)烈免疫應(yīng)答,進(jìn)而轉(zhuǎn)為CD8+T淋巴細(xì)胞,引發(fā)細(xì)胞毒效應(yīng),因而IM患兒體內(nèi)CD8+T淋巴細(xì)胞處于高度活化和增值狀態(tài),導(dǎo)致淋巴細(xì)胞亞群比例失衡,CD4+/CD8+T細(xì)胞比值下降甚至倒置［19］,細(xì)胞免疫功能下降。外周血T淋巴細(xì)胞亞群中的CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞均為臨床檢測的重要指標(biāo),可有效檢測機(jī)體免疫功能［20］。IM是一種傳染性疾病,部分小兒的EBV載量偏高,嚴(yán)重?fù)p傷細(xì)胞免疫功能,且可能發(fā)展至嗜血細(xì)胞綜合征,具有較高的致死率［21］。因此,盡早診斷和有效治療可發(fā)揮關(guān)鍵作用。以定量PCR檢測EBV-DNA,可直接反映機(jī)體EBV-DNA水平,并將病毒復(fù)制和EBV感染情況顯出,有效實(shí)行IM診斷。有研究結(jié)果顯示,EBV-DNA濃度分別正關(guān)系與負(fù)關(guān)系CD3+CD8+T和CD3+CD4+T細(xì)胞頻數(shù)、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值［22］。若實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的EBV-DNA水平檢測率較低,IM發(fā)病程度可借助淋巴細(xì)胞亞群分析進(jìn)行準(zhǔn)確檢測和有效判斷,以早期干預(yù),改善預(yù)后療效。

綜上,IM患兒實(shí)行EB病毒抗體聯(lián)合淋巴細(xì)胞亞群分析檢測,可快速檢測患兒臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢測體征,有效提升疾病診斷水平,實(shí)踐價(jià)值較高。