董 潔 李 晶 王沙沙 姚 嵐

安陽市婦幼保健院病理科 (河南 安陽 455000)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)即患者連續(xù)發(fā)生3次及3次以上12周前妊娠產(chǎn)物(通過B超或者組織學(xué)檢查證實的宮內(nèi)妊娠)丟失，其中60.0%以上為免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，不包括異位妊娠、生化妊娠所導(dǎo)致的流產(chǎn)[1-2]。現(xiàn)代研究表明妊娠成功的關(guān)鍵步驟之一是配偶之間生殖免疫功能正常，不過機體的免疫功能與行為受到嚴(yán)格的調(diào)控，如果發(fā)生異常，就可導(dǎo)致免疫性流產(chǎn)的發(fā)生[3]。約2/3的免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)婦女有血栓形成傾向，且伴隨有血液高凝狀態(tài)。當(dāng)前臨床上最常見的遺傳性血栓形成疾病之一是活性蛋白C抵抗、抗凝蛋白C、凝血因子Ⅲ(FⅧ)的缺乏。其中FⅧ也稱抗血友病球蛋白、抗血友病因子，是一種由肝臟合成的絲氨酸蛋白酶，在機體的抗血栓以及促進(jìn)纖溶過程中發(fā)揮重要作用[4]。當(dāng)前有研究表明，CD31、CD34表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥、胎膜早破、流產(chǎn)等存在相關(guān)，具有調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄、DNA修復(fù)、細(xì)胞分化、細(xì)胞成熟、表觀遺傳學(xué)等作用[5]。本文具體探討與分析了免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者CD31、CD34及FⅧ表達(dá)量變化及其與病理學(xué)特征的關(guān)系，希望為明確免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生機制提供一定的參考?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象2021年2月到2022年9月選擇在安陽市婦幼保健院診治的非人為原因流產(chǎn)100例作為研究組，同期選擇在安陽市婦幼保健院人工流產(chǎn)患者100例作為對照組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者自愿參與本次課題研究；所有患者入院前3個月均未服用影響凝血功能與血小板功能的藥物；無生殖器官畸形；無生殖系統(tǒng)感染；本次研究得到了安陽市婦幼保健院倫理委員會的批準(zhǔn)；依從性良好；研究組符合免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并高危傳染性疾病的患者；合并有肝腎疾病、甲狀腺疾病病史者；患有精神、意識障礙的患者；合并有交流障礙疾病者；臨床資料不全者。兩組患者的年齡、受教育年限、血壓、心率等對比無顯著差異(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組患者的一般資料對比

1.2 觀察指標(biāo)取所有患者流產(chǎn)后的蛻膜組織標(biāo)本保存在-80.0℃冰箱，購買CD31、CD34及FⅧ相關(guān)單克隆抗體，行免疫組化染色，陽性對照片由安陽市婦幼保健院病理科提供，由磷酸鹽緩沖液代替一抗做陰性對照。蛻膜組織樣本經(jīng)福爾馬林固定后，石蠟包埋，連續(xù)3 μm厚度切片。然后加入一抗，4℃放置于室溫約30 min，洗滌3次后(每次洗滌時間為15 min左右)。滴加二抗，37℃放置10 min，磷酸鹽緩沖液洗滌3次；DAB顯色5 min左右，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，封片觀察。CD31表達(dá)于細(xì)胞膜，CD34表達(dá)于細(xì)胞膜/細(xì)胞漿，F(xiàn)VIII表達(dá)于細(xì)胞漿。每張切片于高倍鏡(400倍)下隨機計數(shù)5個視野，陽性細(xì)胞數(shù)大于或等于20.0%為陽性表達(dá)。病理診斷結(jié)果全部由安陽市婦幼保健院病理科具有豐富診斷經(jīng)驗的病理醫(yī)師進(jìn)行診斷(副主任醫(yī)師及其以上職稱，在病理科工作年限大于或等于5年)。同時由研究者采用統(tǒng)一的指導(dǎo)語，調(diào)查收集所有患者的一般資料等。

1.3 統(tǒng)計方法所獲資料采用Epidata3.1 建立數(shù)據(jù)庫，選擇SPSS 21.00軟件進(jìn)行分析，計量數(shù)據(jù)(都符合正態(tài)分布)比如FⅧ陽性細(xì)胞百分率以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，對比采用t檢驗；計數(shù)數(shù)據(jù)采用n、%與例數(shù)表示，對比采用χ2檢驗，多因素分析采用條件Logistic回歸分析，相關(guān)性分析采用Spearsman分析，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

研究組蛻膜組織CD31、CD34及FⅧ陽性細(xì)胞百分率低于對照組(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組血小板CD31、CD34及FⅧ陽性細(xì)胞百分率對比(%)

2.2 相關(guān)性分析在兩組200例患者中，Spearsman分析顯示蛻膜組織中CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量與免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)都存在相關(guān)性(P＜0.05)。見表3。

表3 免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者CD31、CD34及Ⅷ表達(dá)量變化及其與病理學(xué)特征的關(guān)系(n=200)

表3 免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者CD31、CD34及Ⅷ表達(dá)量變化及其與病理學(xué)特征的關(guān)系(n=200)

指標(biāo) CD31 CD34 FⅧr 0.672 0.711 0.693 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.3 影響因素分析在兩組200例患者中，在免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)作為因變量，以蛻膜組織中CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量作為自變量，多因素條件Logistic回歸顯示蛻膜組織中CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量都為導(dǎo)致免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的重要因素(P＜0.05)。見表4。

3 討 論

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)在臨床上比較常見，由于各種因素的影響，國內(nèi)外復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生率呈上升趨勢。多數(shù)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與免疫因素有關(guān)，母胎免疫耐受異常等病理特征是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)重要機制之一，為此免疫性復(fù)發(fā)流產(chǎn)占復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的60.0%以上[6-7]。

現(xiàn)代研究表明胎盤組織CD31、CD34是最主要的黏附受體之一，CD31、CD34的低表達(dá)可引起血小板聚集、血栓形成。使用免疫組化法測定胎盤組織CD31、CD34陽性表達(dá)水平已成為檢查胎盤功能的一種重要手段，也具有操作成熟度高、準(zhǔn)確性強等優(yōu)點。本研究顯示研究組蛻膜組織CD31、CD34及FⅧ陽性細(xì)胞百分率低于對照組(P＜0.05)，表明免疫性復(fù)發(fā)流產(chǎn)患者多伴隨有血小板CD31、CD34及FⅧ的異常表達(dá)。分析可知：CD31、CD34對調(diào)節(jié)機體的內(nèi)皮細(xì)胞功能、血小板聚集、血液流通具有重要作用，其異常表達(dá)可引起患者血液改變，影響組織供血供氧，從而導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生[8]。FⅧ是一種由肝臟合成的絲氨酸蛋白酶，F(xiàn)Ⅷ缺乏與動脈血栓、靜脈血栓的形成有關(guān)，與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)關(guān)系密切[9]。

本研究Spearsman分析顯示CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量與免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)都存在相關(guān)性(P＜0.05)；多因素條件Logistic回歸顯示CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量都為導(dǎo)致免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的重要因素(P＜0.05)，表明免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者CD31、CD34及FⅧ表達(dá)量變化及其與病理學(xué)特征存在明顯的相關(guān)性。分析可知，CD31、CD34、FⅧ表達(dá)量異?？烧{(diào)節(jié)趨化因子和細(xì)胞因子產(chǎn)生，可促進(jìn)前列腺素合成，促進(jìn)宮頸成熟，誘發(fā)病理性妊娠，繼而導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生[10]。在防治免疫性復(fù)發(fā)流產(chǎn)中，要積極對患者進(jìn)行治療與超聲診斷，以促進(jìn)改善患者的總體預(yù)后[11-12]。

總之，免疫性復(fù)發(fā)流產(chǎn)患者多伴隨有CD31、CD34及FⅧ的異常表達(dá)，免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者CD31、CD34及FⅧ表達(dá)量變化及其與病理學(xué)特征存在明顯的相關(guān)性。由于經(jīng)費問題與一定的倫理問題，本次研究沒有納入非流產(chǎn)人群進(jìn)行對比分析，調(diào)查與分析的比較少，且分析的內(nèi)容比較少，人數(shù)也比較少，將在后續(xù)研究中探討。