唐薇，熊宇，高立明，王廣成，許艷秋

(1.眉山市農(nóng)業(yè)質量檢測中心，四川 眉山 620020；2.四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植物保護站，成都 610041)

嘧菌環(huán)胺(cyprodinil)是由先正達公司開發(fā)的一類嘧啶胺類殺菌劑，可抑制真菌水解酶的分泌和病原菌細胞中蛋氨酸的合成，從而發(fā)揮殺菌作用[1]。嘧菌環(huán)胺兼具保護和治療活性，對灰霉病、斑點落葉病、黑星病等有很好的防治效果，與三唑類、咪唑類、嗎啉類、二羧酸亞胺類、苯基吡咯類殺菌劑無交互抗性，對敏感或抗性病原菌均有優(yōu)異的活性[2]?？┚?fludioxonil)是新型苯基吡咯類殺菌劑，通過抑制葡萄糖磷?；挠嘘P運轉以及病菌孢子的萌發(fā)，進而干擾真菌菌絲體的生長，促使病原菌死亡[3]。咯菌腈具有廣譜、高效、低毒、低殘留的特點，與現(xiàn)有殺菌劑無交互抗性，被廣泛用于多種農(nóng)作物種子處理，防治種子帶菌及土壤傳播的真菌病害[4-5]。為最大限度發(fā)揮2 種單劑的殺菌效果，減少使用劑量，延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生，減少農(nóng)民用藥成本，通過科學復配了嘧環(huán)·咯菌腈混劑，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中主要用于防治灰霉病和菌核病等。隨著不同嘧環(huán)·咯菌腈混劑的生產(chǎn)、銷售和使用，農(nóng)藥質量問題應引起關注，混劑的質量檢測很有必要。目前，有關63%咯菌腈·嘧菌環(huán)胺水分散粒劑的液相色譜分析方法已有文獻報道[6]，但未見25%嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑的檢測方法，也未看到該2 種農(nóng)藥制劑的氣相色譜檢測方法報道，因此，本文采用氣相色譜建立了一種能夠同時高效、準確地測定嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑中有效成分含量的方法，可用于嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑等相關產(chǎn)品的質量控制和檢測。

1 材料與方法

1.1 儀器

7890A 型氣相色譜儀，F(xiàn)ID 檢測器，配自動進樣器(美國安捷倫科技有限公司)；HLPT-5A 型空氣發(fā)生器、HLPT-50 型氫氣發(fā)生器(北京匯龍昌?？瀑Q(mào)有限公司)；BCE224-1CCN 型分析天平[賽多利斯科學儀器(北京)有限公司]。

1.2 試劑

99.0 %嘧菌環(huán)胺標準品(北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術研究所)；98.5%咯菌腈標準品(北京北方偉業(yè)計量技術研究所)；25%嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑(杭州宇龍化工有限公司，市售)；丙酮、磷酸三苯酯(成都市科隆化學品有限公司)，均為分析純。

1.3 色譜操作條件

檢測器為FID；檢測器溫度為280 ℃；色譜柱為DB-1 毛細管色譜柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm；程序升溫為120 ℃，保持2 min，以10 ℃/min 升至280 ℃，保持5 min；進樣口溫度為280 ℃；柱流速(N2)為1.0 mL/min；氫氣(H2)流量為40 mL/min；空氣(Air)流量為400 mL/min；尾吹(N2)為30 mL/min；分流比為50∶1；進樣體積為1.0 μL。采用內(nèi)標法定量。在該色譜操作條件下嘧菌環(huán)胺、咯菌腈和磷酸三苯酯的保留時間分別約為13.89、14.70、16.76 min，嘧環(huán)·咯菌腈+內(nèi)標的典型色譜圖如圖1。

圖1 嘧環(huán)·咯菌腈+內(nèi)標的氣相色譜圖(進樣質量濃度：嘧菌環(huán)胺2.65 g/L，咯菌腈1.72 g/L，磷酸三苯酯1.28 g/L)

1.4 測定步驟

1.4.1 溶液的配制

內(nèi)標溶液：稱取磷酸三苯酯6.4 g (精確至0.000 2 g)，置于1 000 mL 容量瓶中，加入適量丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

標準溶液：準確稱取嘧菌環(huán)胺和咯菌腈標準品分別為0.06 g、0.04 g(精確至0.000 2 g)，置于同一個25 mL 的容量瓶中，加入適量丙酮，使標樣完全溶解后，再準確加入5.00 mL 上述配制內(nèi)標溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻備用。

樣品溶液：稱取25%嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑樣品0.4 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL 容量瓶中，加入少量水分散，用適量丙酮完全溶解后，準確加入5.00 mL 上述配制內(nèi)標溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2 測定

按照1.3 節(jié)色譜操作條件設置氣相色譜，待基線平穩(wěn)后，連續(xù)進樣數(shù)針標準溶液，直至相鄰2 針嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)與內(nèi)標物峰面積相對變化小于1.5%后，按照標準溶液、樣品溶液、樣品溶液、標準溶液的順序進樣測定。

1.5 計算

按照下式計算樣品中嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)的質量分數(shù)ω(%)：

式中：R1為標準溶液中，嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)與內(nèi)標物峰面積比的平均值；R2為樣品溶液中，嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)與內(nèi)標物峰面積比的平均值；m1為嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)標樣的質量(g)；m2為試樣的質量(g)；ω1為標樣中嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)的質量分數(shù)(%)。

2 結果與討論

2.1 分析方法的線性關系

分別稱取0.034 5g+0.020 7 g、0.052 2 g+0.033 4 g、0.067 0 g+0.043 7 g、0.078 6 g+0.057 8 g、0.0902 g+0.063 4 g，5 份不同質量的嘧菌環(huán)胺+咯菌腈標準品，按1.4.1 節(jié)方法配制成系列標準溶液后，在1.3 節(jié)色譜操作條件分別測定，以嘧菌環(huán)胺(或咯菌腈)和磷酸三苯酯的質量比為橫坐標，峰面積比值為縱坐標擬合方法線性相關性，結果表明供試藥劑質量比值與其響應值之間呈現(xiàn)出良好的線性關系，其線性回歸方程和相關系數(shù)分別為：嘧菌環(huán)胺y=1.132 5x-0.029 4，R2=0.998 2；咯菌腈y=0.705 1x+0.012 1，R2=0.999 8。

2.2 分析方法的精密度

準確稱取一定質量的嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑樣品6 份，按1.4.1 節(jié)方法配制成樣品溶液，測定嘧菌環(huán)胺和咯菌腈的質量分數(shù)，計算其對應的標準偏差和變異系數(shù)，結果見表1?？梢姡瑴y得嘧菌環(huán)胺和咯菌腈質量分數(shù)的標準偏差和變異系數(shù)均小于修改的Horwitz 公式計算結果，說明該分析方法的精密度符合要求。

表1 分析方法的精密度測定

2.3 分析方法的準確度

準確稱取6 份嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑樣品，分別添加一定量的嘧菌環(huán)胺和咯菌腈標準品，按1.4.1 節(jié)方法配制成樣品溶液，測定嘧菌環(huán)胺和咯菌腈的質量分數(shù)，計算添加回收率，結果見表2?？梢?，測得嘧菌環(huán)胺和咯菌腈的添加回收率均在99.30%～100.04%，平均回收率分別為99.54%、99.70%，說明該分析方法的準確度高。

表2 分析方法的準確度測定

3 結論

本文采用GC-FID建立了同時檢測25%嘧環(huán)·咯菌腈懸浮劑中有效成分的定量分析方法，具有線性關系良好、重現(xiàn)性好、準確度高的優(yōu)點，此方法準確、簡便、快捷，能滿足農(nóng)藥產(chǎn)品質量分析有關標準的要求，可用于嘧環(huán)·咯菌腈產(chǎn)品的質量控制。