李東全， 孫芳芳， 陳玉艷， 孫丹彤， 王 媛， 李忠秋

（1.沈陽波音飼料有限公司，沈陽 于洪 110141；2.沈陽海關，動植物和食品檢驗檢疫處，沈陽 渾南 110179；3.遼寧省農(nóng)產(chǎn)品及獸藥飼料產(chǎn)品檢驗檢測院，沈陽 沈河 110000；4.沈陽安捷動物營養(yǎng)科技有限公司，沈陽 于洪 110141）

延長蛋雞使用時間與飼養(yǎng)環(huán)境、養(yǎng)殖模式、產(chǎn)蛋后期蛋雞健康狀態(tài)、飼糧營養(yǎng)均有較大關系。蛋雞產(chǎn)蛋后期突出的問題就是蛋殼品質下降， 尤其是蛋殼強度。規(guī)?；半u場大多為自動撿蛋設備，蛋殼品質的下降使得問題更加突出。 Swiatkiewicz等（2017）對近年來的維生素D 在蛋雞上的應用研究進行歸納總結發(fā)現(xiàn)， 蛋雞飼糧中補充維生素D 可使得礦物質消化率、動物生產(chǎn)性能、免疫指數(shù)最大化，維生素D 的添加量為3000 IU/kg 時可保證蛋雞骨骼健康和蛋殼質量， 而25 羥基維生素D3在家禽表現(xiàn)上優(yōu)于維生素D3。但針對600 日齡甚至700 日齡以上的超高日齡蛋雞應用上鮮有研究報道。本研究從營養(yǎng)方向出發(fā)，針對不同的維生素D3和25-羥基維生素D3添加量， 研究對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋性能、 蛋殼品質和骨質量的影響， 為改善產(chǎn)蛋后期骨質量和蛋殼品質提供營養(yǎng)科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 維生素D3（50 萬IU/g）與25 羥基維生素D3（50 萬IU/g）均為市售產(chǎn)品。

1.2 試驗動物與飼養(yǎng)管理 試驗在沈陽波音飼料有限公司技術研發(fā)基地進行。 試驗動物為1728 只產(chǎn)蛋期海蘭褐蛋雞， 該批產(chǎn)蛋雞在545日齡進行了強制換羽， 換羽后雞蛋產(chǎn)蛋率從82%增加到89%，雞蛋品質改善明顯，表現(xiàn)在蛋白高度、哈氏單位以及蛋殼強度。 本次試驗初始日齡631 d，結束日齡736 d，共105 d。蛋雞使用三層H 型產(chǎn)蛋籠養(yǎng)殖，自由飲水，三層清糞機自動清糞。人工喂料，早晚各喂一次。人工光照16 h。每周進行嚴格消毒程序， 新城疫四系每45 d 進行一次。

1.3 試驗設計與基礎飼糧 采用隨機區(qū)組試驗設計，分別在基礎飼糧上設置不同的維生素D3和25 羥基維生素D3水平組成6 種飼糧（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組），具體試驗設計見表1。 每組288 只雞，4 個重復，每個重復72 只雞。 參照海蘭褐飼養(yǎng)標準（2021）配制玉米-豆粕型基礎飼糧，基礎飼糧組成和營養(yǎng)水平如表2。試驗正式開始前預飼2周，飼喂Ⅰ組飼糧。

表1 試驗設計IU/kg

表2 基礎飼糧組成和營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.4 測定指標和方法

1.4.1 產(chǎn)蛋性能 試驗結束前收集2 周數(shù)據(jù)。 每天13：00 采集一次數(shù)據(jù)。 記錄存欄母雞數(shù)、蛋重、產(chǎn)蛋枚數(shù)，繼而計算產(chǎn)蛋率、單枚蛋重和只日產(chǎn)蛋量。 公式如下：

1.4.2 蛋殼品質 試驗結束前， 每組進行蛋殼顏色、蛋殼強度、蛋殼厚度以及蛋殼重的測定。

蛋殼顏色： 收集試驗結束前兩周每天每組雞蛋，用照蛋箱采集所有雞蛋的照片（nikon D90-數(shù)碼照相機，21 m，F(xiàn)7.1，ISO400，1/400，A 白紙設定白平衡），對雞蛋縱向投影面積1/9 的中心區(qū)域進行顏色均勻化，然后取色，得到L*、a*和b*。

蛋殼強度： 試驗結束前， 每組每個重復選取10 枚雞蛋， 每組40 枚雞蛋進行蛋殼強度測定（RH-DQ200-蛋殼強度測定儀， 廣州潤湖儀器有限公司），即扎破蛋殼時的最大載荷（N）。

蛋殼厚度：測定完蛋殼強度的雞蛋，進一步進行蛋殼厚度（螺旋測微器，廣陸電子數(shù)顯）和蛋殼重的測定（JT2003D-電子分析天平，力辰）。 計算蛋殼重占總蛋重的比例，即蛋殼比重。

1.4.3 骨質量 試驗結束時每組每個重復選取2只體重相近且健康的雞宰殺后取左側脛骨，肌肉和骨膜剝離，-80 ℃保存。骨強度測定提前從冰箱取出樣品，將每根骨樣品保持在相同的方向，并在其中間長度施加力，骨斷裂的峰值即該骨的強度（質構儀，SMS）。 測定完骨強度后，收集斷骨，測定骨鈣含量（EDTA 滴定法） 和骨磷含量 （分光光度計法）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 收集數(shù)據(jù)用Excel 2010 做初步處理， 再用SAS V9.0 中的Univariate 過程進行正態(tài)性檢驗，若存在顯著性差異，則用Duncan's法（α=0.05）進行多重比較檢驗，試驗數(shù)據(jù)用平均值表示。

2 結果與分析

2.1 產(chǎn)蛋性能 由表3 可知， 不同維生素D3和25 羥基維生素D3水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞單枚蛋重無顯著影響（P＞0.05）。與對照組相比（3300 IU/kg 維生素D3），1650 IU/kg 維生素D3和1650 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅲ組）產(chǎn)蛋率降低1.86 個百分點，只日產(chǎn)蛋量降低1.29 g/d（P＜0.05）；3300 IU/kg 25 羥基維生素D3組 （Ⅱ組）和4950 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅴ組）產(chǎn)蛋率分別提高2.04 個百分點和2.35 個百分點 （P＜0.05）；添加3300 IU/kg 及以上25 羥基維生素D3組（Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ組）破蛋率降低和只日產(chǎn)蛋量增加，破蛋率分別比對照組降低0.36、0.39、0.32 個百分點 （P＜0.05）， 只日產(chǎn)蛋量分別比對照組增加1.43、1.65 g/d 和0.85 g/d（P＜0.05）。

表3 不同維生素D3 和25 羥基維生素D3 水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 蛋殼品質 由表4 可知， 不同維生素D3和25 羥基維生素D3水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋殼顏色指數(shù)、蛋殼厚度和蛋殼比重無顯著影響（P＞0.05）， 但對蛋殼強度有顯著影響（P＜0.05）。3300 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅱ組）和4950 IU/kg 25 羥基維生素D3組 （Ⅴ組） 蛋殼強度分別提高2.4 N 和2.9 N （P＜0.05），1650 IU/kg 維生素D3和3300 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅵ組）蛋殼強度提高1.1 N；4950 IU/kg 維生素D3組（Ⅳ組）以及1650 IU/kg 維生素D3和1650 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅲ組）的蛋殼強度與對照組無顯著差異（P＞0.05）。

表4 不同維生素D3 和25 羥基維生素D3 水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋殼品質的影響

2.3 骨質量 由表5 可知， 不同維生素D3和25羥基維生素D3水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞骨磷含量無顯著影響（P＞0.05），但對骨鈣含量和骨強度有顯著影響（P＜0.05）。 3300 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅱ組）和4950 IU/kg 25 羥基維生素D3組（Ⅴ組）與對照組相比，脛骨強度分別提高15 N 和21 N（P＜0.05），骨鈣分別提高0.56 個百分點和0.84 個百分點 （P＜0.05）；1650 IU/kg 維生素D3和3300 IU/kg 25 羥基維生素D3組 （Ⅵ組）脛骨強度提高9 N（P＜0.05），骨鈣提高0.49個百分點。

表5 不同維生素D3 和25 羥基維生素D3 水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞骨質量的影響

3 討論

3.1 飼喂不同維生素D3水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能、 蛋殼品質以及骨質量的影響維生素D3的添加對于蛋雞骨骼健康以及蛋殼品質的保證具有重要意義 （Khan 等，2021）。 美國NRC（1994）蛋雞維生素D3推薦量為300 IU/kg，已經(jīng)不適用于現(xiàn)在的高生產(chǎn)性能蛋雞以及集約化的飼養(yǎng)環(huán)境。關于維生素D3水平對蛋雞的研究已有一些研究進展，結論不盡相同。 研究表明，60 周齡蛋雞鈣不足情況下會明顯降低骨強度， 而額外補充維生素D3對提高骨強度有積極正向作用，但2500 IU/kg 與5000 IU/kg 維生素D3添加效果差異不大， 高劑量的維生素D3并沒有表現(xiàn)出優(yōu)勢（康樂等，2018）。在25 周齡蛋雞上的研究表明，添加1500 IU/kg 與3000 IU/kg 維生素D3均對單枚蛋重、蛋殼鈣無顯著影響（Sarah 等，2017）。 57 周齡羅曼白蛋雞無論是添加3000 IU/kg，還是9000 IU/kg 維生素D3對雞蛋質量、 鈣與磷表觀消化率均無影響（Adhikari 等，2020）。 本研究結果表明，飼糧中添加3300 IU/kg 維生素D3與添加4950 IU/kg 維生素D3對強制換羽后蛋雞生產(chǎn)性能、蛋殼品質、骨質量無影響，以上盡管日齡各不同，但結論基本一致。 而有研究表明，羅曼灰60 周齡蛋雞飼糧中添加5000 IU/kg 維生素D3可顯著降低蛋雞不合格蛋率， 并增加蛋殼柵欄層厚度（Jing等，2022），本研究結果與其不一致。本研究還進行了1650 IU/kg 維生素D3與1650 IU/kg 25 羥基維生素D3組合試驗，其結果在生產(chǎn)性能、蛋殼品質表現(xiàn)反而最差，低于對照組，可能是維生素D3與25 羥基維生素D3在蛋雞體內的代謝過程不同，引起的代謝周期差異， 導致營養(yǎng)競爭使得生產(chǎn)性能、 蛋殼品質有所降低， 具體原因有待進一步研究。 維生素D3添加可調節(jié)鈣磷代謝，維持血鈣和血磷的水平，從而維持骨骼的正常生長發(fā)育，但增加其在飼糧中的比例對改善生產(chǎn)性能、 蛋殼品質以及骨質量差異不大。從本研究來看，對于產(chǎn)蛋后期630 ～730 日齡蛋雞來說， 維生素D3含量在3300 IU/kg 以上可維持基本需求。

3.2 飼喂不同25 羥基維生素D3水平對強制換羽后產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能、 蛋殼品質以及骨質量的影響 蛋雞產(chǎn)蛋期間， 正常結構板層骨的形成停止， 僅形成髓骨， 髓骨是蛋殼形成的移動鈣庫。但隨著蛋雞產(chǎn)蛋日齡的增加，產(chǎn)蛋后期蛋雞需要有更高的骨吸收和更低的骨形成 （Browning 和Cowieson，2015）。 因此，最大化骨礦化非常重要，可增加骨強度并減少與腿部無力、 發(fā)病率和死亡率相關的問題（Kakhki，2019）。 維生素D 是蛋雞的必需營養(yǎng)物質， 髓骨鈣的合成以及動員受維生素D 調控 （Nys 和Leroy，2018）。 維生素D3無活性，動物采食后需要經(jīng)過肝臟、腎臟代謝成全活性的1，25-二羥基維生素D3， 才能進入血液供機體使用， 而25 羥基維生素D3屬于半活性維生素D3， 只需通過腎臟在酶的作用下形成全活性的1，25-二羥基維生素D3（汪曉娜，2021）。 因此，產(chǎn)蛋后期蛋雞肝臟功能下降明顯，而25 羥基維生素D3在機體代謝不需要肝臟的參與，產(chǎn)蛋后期蛋雞使用25 羥基維生素D3具有優(yōu)于維生素D3的明顯優(yōu)勢，形成的1，25-二羥基維生素D3可刺激骨基質形成和骨成熟，并增強破骨細胞活性，還可提高成骨細胞骨鈣化，進而調控鈣磷平衡，并促進骨化（Katia，2020）。弓浩杰等（2020）研究表明，48 周齡羅曼粉蛋雞飼糧中額外補飼25 羥基維生素D3（2760 IU/kg）會顯著降低破殼蛋率。 但dhikari 等（2020） 研究表明，57 周齡羅曼白蛋雞添加3000 IU/kg 和9000 IU/kg 25 羥基維生素D3均對雞蛋質量無影響。 Chen 等（2020）對海蘭白W36 蛋雞（0 ～95 周）進行維生素D 的長期試驗，試驗結果表明，22 ～48 周齡期間，2760 IU/kg 25 羥基維生素D3有更好的飼料轉化率，22 ～33 周齡有較高的哈氏單位， 但60 周齡后2760 IU/kg 25 羥基維生素D3（25D） 對產(chǎn)蛋性能和蛋殼品質無更優(yōu)影響。 Chen 等（2020）在同期還做了關于長期補飼25 羥基維生素D3（0 ～95 周）對蛋雞骨三維結構的影響，海蘭白W36 長期飼喂25 羥基維生素D3，在95 周齡時可明顯看出25 羥基維生素D 可刺激蛋雞骨生長，增加骨體積。 由此可以看出，60 周齡后飼糧中添加2760 IU/kg 25 羥基維生素D3，盡管在試驗中沒有表現(xiàn)出蛋殼品質上的差異， 但為產(chǎn)蛋期間的礦物質沉積提供更多空間， 從而提高骨骼健康。本研究結果表明，對于730 日齡海蘭褐蛋雞，飼糧中添加3300 IU/kg 與4950 IU/kg 25 羥基維生素D3可增加骨鈣沉積， 提高脛骨強度，明顯提高蛋殼強度，降低破蛋率，進而提高730 日齡蛋雞產(chǎn)蛋率和只日產(chǎn)蛋量。 1650 IU/kg 維生素D3與3300 IU/kg 25 羥基維生素D3在生產(chǎn)性能、蛋殼品質表現(xiàn)優(yōu)于對照組，但單獨添加25 羥基維生素D3比維生素D3與25 羥基維生素D3組合添加效果要更好。 Yu 等（2020）研究表明，骨骼患者中往往維生素D 缺乏，尤其是女性，隨著年齡的增長體內維生素D 持續(xù)減少，甲狀旁腺增加，最終引起引起骨密度降低，影響骨骼健康。 由此可知，維生素D 的外補至關重要，在動物生產(chǎn)中，尤其是高齡產(chǎn)蛋雞，且25 羥基維生素D3優(yōu)于維生素D3的效果。

4 結論

1650 IU/kg 25 羥基維生素D3與1650 IU/kg維生素D3組合對強制換羽后蛋雞生產(chǎn)性能有負向作用， 但對蛋殼品質以及骨質量無顯著影響。3300 IU/kg 維生素D3可滿足蛋雞日常生產(chǎn)需求。25 羥基維生素D3完全替代維生素D3可明顯改善強制換羽后蛋雞生產(chǎn)性能、 蛋殼品質以及骨質量，且效果優(yōu)于部分替代。 綜上所述，產(chǎn)蛋后期蛋雞推薦添加3300 IU/kg 以上25 羥基維生素D3含量，可維持產(chǎn)蛋后期更長的產(chǎn)蛋周期。