董艷 祝蕊 張鑫宇

DN 是糖尿病誘發(fā)的最難治療的合并疾病, 可以引發(fā)一系列復(fù)雜的器官功能紊亂［1］。雖然通過及早干預(yù)后可以逆轉(zhuǎn), 但一旦其發(fā)展到后期階段會(huì)成為終末期腎?。?］。DN 是歐洲、美洲和其他國家患者終末期腎病的主要原因, 也是中國腎小球腎炎后末期腎病的第2個(gè)主要原因［1］。DN 嚴(yán)重影響患者的日常生活及工作,并對(duì)家庭及國家產(chǎn)生極大的負(fù)擔(dān)。近年來, DN 的發(fā)病率呈上升態(tài)勢［3］。所以如何能早期預(yù)知和延緩此病顯得格外重要。此次試驗(yàn)通過比較DN 患者與健康人群的血清蛋白電泳與24 h 尿蛋白定量水平, 分析其臨床診斷價(jià)值?，F(xiàn)將詳細(xì)過程報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年6 月～2020 年6 月沈陽金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司收集的已明確診斷的50 例DN 患者作為觀察組, 另選取50 例健康體檢者作為對(duì)照組。觀察組中男23 例, 女27 例；年齡30～68 歲,平 均 年 齡(47.5±6.9) 歲；病 程2～8 年, 平 均 病 程(5.42±2.46)年。對(duì)照組中男22 例, 女28 例；年齡29～67 歲, 平均年齡(46.6±6.8)歲。兩組的一般資料比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。見表1。

表1 兩組的一般資料比較(n,±s)

表1 兩組的一般資料比較(n,±s)

注：兩組比較, P＞0.05

組別 例數(shù) 性別 平均年齡(歲)男女觀察組 50 23 27 47.5±6.9對(duì)照組 50 22 28 46.6±6.8 χ2/t 0.040 0.657 P＞0.05 ＞0.05

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①觀察組患者滿足DN 診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者及家屬均知曉本研究的目的, 簽署了知情同意書。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①合并腫瘤、結(jié)核等疾?。虎诤喜⒚庖呦到y(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)及血液系統(tǒng)疾??；③患者未能按要求在指定日抽血檢測及輸血；④研究期間患者出現(xiàn)上呼吸道感染和發(fā)熱；⑤重度貧血、惡病質(zhì)狀態(tài)者；⑥合并嚴(yán)重肝功能不全者。

1.4 檢測方法 兩組均進(jìn)行血清蛋白電泳及24 h 尿蛋白定量檢測。禁食12 h 后, 第2 天清晨靜脈采血4 ml。常規(guī)分離治療后的同一天, 使用QIAXELAD 先進(jìn)的自動(dòng)實(shí)時(shí)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)結(jié)合rochecobasc501 生化分析儀測定兩組血清γ-球蛋白、ALB、β1-球蛋白、β2-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白濃度, 其中總蛋白濃度通過縮二脲法測量。通過溴甲酚綠(BCG)法檢測血清ALB 濃度。在同一天的清晨要求患者開始排尿, 但不留取此次的尿液, 只收集早7 點(diǎn)以后到第2 天早7 點(diǎn)前的24 h 尿液, 放置在清潔干燥的容器內(nèi)。第一次留取尿液時(shí)要在尿液中混入10 ml 的甲醛防止尿液腐敗, 等24 h 的尿液標(biāo)本都采集完畢后, 提取其中的2 ml, 通過北京天根生化科技有限公司生產(chǎn)的尿蛋白定量試劑盒測量尿蛋白濃度。其中血清蛋白電泳成分與24 h 尿蛋白定量的正常參考區(qū)間如下：ALB：52.0%～62.8%；α1-球蛋白：3.1%～4.6%；α2-球蛋白：7.0%～11.1%；β1-球蛋白：5.3%～7.8%；β2-球蛋白：3.3%～6.4%；γ-球蛋白：13.1%～23.3%；24 h 尿蛋白定量：0～150.0 mg/24 h。

1.5 觀察指標(biāo) 比較兩組的血清蛋白電泳(ALB、β1-球蛋白、β2-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白)水平及24 h 尿蛋白定量水平、陽性率。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的血清蛋白電泳水平比較 觀察組的α1-球蛋白、α2-球蛋白、β2-球蛋白均顯著高于對(duì)照組,ALB 顯著低于對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；兩組β1-球蛋白與γ-球蛋白比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2 兩組的血清蛋白電泳水平比較(±s, %)

表2 兩組的血清蛋白電泳水平比較(±s, %)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) ALB α1-球蛋白 α2-球蛋白 β1-球蛋白 β2-球蛋白 γ-球蛋白觀察組 50 46.1±10.7a 6.0±1.9a 13.1±3.7a 5.9±1.0 6.5±1.5a 14.8±3.8對(duì)照組 50 60.0±2.2 3.9±0.6 9.3±2.0 5.8±0.7 4.6±1.0 14.5±2.6 t 8.998 7.453 6.389 0.579 7.452 0.461 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.2 兩組的24 h 尿蛋白定量水平及陽性率比較觀察組的24 h 尿蛋白定量水平及陽性率分別為(223.8±66.2)mg/24 h、94.0%, 均高于對(duì)照組的(42.3±15.7)mg/24 h、10.0%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組的24 h 尿蛋白定量水平及陽性率比較［±s, n(%)］

表3 兩組的24 h 尿蛋白定量水平及陽性率比較［±s, n(%)］

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) 24 h 尿蛋白定量(mg/24 h) 24 h 尿蛋白定量陽性觀察組 50 223.8±66.2a 47(94.0)a對(duì)照組 50 42.3±15.7 5(10.0)t 18.863 70.673 P＜0.05 ＜0.05

3 討論

DN 作為一種臨床常見病, 目前嚴(yán)重影響著患者的身心健康。腎臟作為一個(gè)重要的排泄和內(nèi)分泌器官,在維持身體新陳代謝的穩(wěn)定性方面發(fā)揮著關(guān)鍵功能［4］。由于腎臟的損害和DN 患者的葡萄糖代謝紊亂, 血清中各種分子組分和排出的尿液通常超過正常值范圍［5］。這種分子標(biāo)記方法可以輔助診斷DN, 并可以預(yù)測其治療效果的優(yōu)劣。血清蛋白電泳是常用的血清蛋白測量方式, 用于檢測患者血清中很多蛋白濃度, 包括α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白和ALB［6］。陳燦鋒等［7］通過血清蛋白電泳檢測原發(fā)性肝癌患者的血清蛋白, 結(jié)果提示球蛋白濃度明顯大于二次肝癌患者和健康受試者。24 h 尿蛋白定量可以檢測蛋白質(zhì)的損失, 可以有效反映患者是否具有腎病或其他一些全身疾病。此次試驗(yàn)中, 觀察組的α1-球蛋白、α2-球蛋白、β2-球蛋白均顯著高于對(duì)照組, ALB 顯著低于對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；兩組β1-球蛋白與γ-球蛋白比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。觀察組的24 h 尿蛋白定量水平及陽性率分別為(223.8±66.2)mg/24 h、94.0%, 均高于對(duì)照組的(42.3±15.7)mg/24 h、10.0%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。根據(jù)相關(guān)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)［8］, ALB 的濃度根據(jù)DN 發(fā)展的各個(gè)階段, 其排序由高至低依次為Ⅲ期＞Ⅳ期＞Ⅴ期, 同 時(shí)α1- 球 蛋 白、α2- 球 蛋 白、β2-球蛋白濃度根據(jù)DN 發(fā)展的各個(gè)階段, 其排序由高至低依次為Ⅴ期＞Ⅳ期＞Ⅲ期。這可能是由于腎臟受損的過程也會(huì)隨著DN 而變化；慢性的血糖濃度增加, 糖代謝紊亂加劇, 誘使二次蛋白質(zhì)酵解；腎小管上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)遭到破壞, 腎小管的結(jié)構(gòu)被改變、腎小球過濾能力下降, 最后出現(xiàn)患者尿液中的α-球蛋白、β2-球蛋白和24 h 尿蛋白定量濃度上升, 這一數(shù)據(jù)也和袁瑞麗等［9］研究結(jié)果高度統(tǒng)一。段晉燕等［10］研究也證實(shí), 隨著腎臟受損的不斷進(jìn)展, 患者尿液中的蛋白濃度也會(huì)上升, 尤其是β2-球蛋白、α-球蛋白。通過計(jì)算ALB、α-球蛋白、β2-球蛋白和24 h 尿蛋白定量在DN 疾病不同階段的水平, 其受試者工作曲線(ROC)面積也都明顯高過標(biāo)準(zhǔn)值, 證明了血清蛋白電泳在判斷DN 和發(fā)展的各個(gè)階段有很優(yōu)良的應(yīng)用意義。翟春清等［11］研究也證實(shí), 檢測患者的總尿蛋白濃度和各種蛋白濃度, 可以評(píng)估患者腎臟的受損強(qiáng)度和預(yù)后,其應(yīng)用價(jià)值重大。

綜上所述, 血清蛋白成分與24 h 尿蛋白定量的改變能夠輔助診斷DN, 可以有效評(píng)估DN 患者的治療效果, 并對(duì)預(yù)測遠(yuǎn)期效果意義重大, 而且此方法簡單可靠, 可以在臨床中廣泛應(yīng)用。