宋琳嵐, 黃 博, 董艷迎, 牛云鶴, 李 燕, 周 源

1.西安交通大學(xué)附屬第二醫(yī)院 檢驗科,陜西 西安 710004;西安交通大學(xué)附屬西安市兒童醫(yī)院2.檢驗科;3.腎臟科,陜西 西安 710003

原發(fā)性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome,PNS)是以腎小球病變?yōu)橹鞯呐R床綜合征,屬于兒科常見病之一[1]。急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)是PNS患兒常見嚴(yán)重合并癥,不僅使病情加重,疾病治療難度增加,還影響患兒康復(fù),給患兒及家屬增添心理壓力及經(jīng)濟負擔(dān)[2]。有研究報道,兒童AKI經(jīng)早期發(fā)現(xiàn)和規(guī)范化治療,能夠降低發(fā)展成慢性腎衰竭甚至死亡的風(fēng)險[3]。明確PNS患兒合并AKI的機制及參與疾病進展的關(guān)鍵因子,采取有效靶向治療減輕患兒AKI,對改善患兒預(yù)后有重要意義。PNS屬于免疫介導(dǎo)的炎性疾病,免疫功能紊亂及炎癥細胞因子分泌異常參與PNS病變進展,炎癥介質(zhì)異常分泌提示機體組織可能存在感染或損傷情況[4-5]。白細胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β和IL-2均為炎癥介質(zhì),在調(diào)節(jié)機體炎性反應(yīng)方面發(fā)揮重要作用,但目前關(guān)于IL-6、IL-1β、IL-2參與PNS發(fā)病及合并AKI的具體機制尚未明確[6]。本研究旨在探討PNS患兒血清IL-6、IL-1β、IL-2水平與AKI的相關(guān)性?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取西安交通大學(xué)附屬第二醫(yī)院自2021年10月至2022年11月收治的80例PNS患兒為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn):符合PNS診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];年齡2～14歲;臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):先天性或遺傳性腎病綜合征;繼發(fā)于乙型肝炎病毒感染、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、過敏性紫癜、骨髓瘤等的腎病綜合征;使用腎毒性藥物;合并心腦血管、肝或免疫系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病;伴精神認知障礙。根據(jù)是否合并AKI將PNS患兒分為A組(合并AKI,n=36)與B組(未合并AKI,n=44)[8]。A組:男性25例,女性11例;年齡3～13歲,平均(8.46±2.17)歲。B組:男性23例,女性21例;年齡2～14歲,平均(8.62±2.41)歲。兩組患兒一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。所有患兒家屬均簽署知情同意書。

1.2 研究方法 根據(jù)患兒發(fā)生AKI后的峰值血肌酐(serum creatinine,Scr)水平、尿量評定AKI分期[9]:Scr升高至基礎(chǔ)值1.5～1.9倍或尿量<0.5 ml/(kg·h)(時間>6 h)為1期;Scr升高至基礎(chǔ)值2.0～2.9倍或尿量<0.5 ml/(kg·h)(時間>12 h)為2期;Scr升高至基礎(chǔ)值3.0倍及以上或24 h持續(xù)少尿或無尿>12 h為3期。采集所有患兒入院時外周靜脈血5 ml,以3 000 r/min離心10 min。采用化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法檢測并比較兩組患兒血清IL-6、IL-1β、IL-2水平,試劑盒由西門子有限公司提供。采用貝克曼肌酐酶法檢測血清Scr水平。采集所有患兒排空膀胱后24 h尿液,存于配有防腐劑的有蓋清潔容器內(nèi),采用雙縮脲法進行24 h尿蛋白定量測定。

1.3 觀察指標(biāo) 檢測并比較兩組患兒IL-6、IL-1β、IL-2水平及24 h尿蛋白定量及血清Scr水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒血清IL-6、IL-1β、IL-2水平比較 B組患兒血清IL-6、IL-1β水平均高于A組,IL-2水平低于A組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患兒血清IL-6、IL-1β、IL-2水平比較

2.2 兩組患兒24 h尿蛋白定量及血清Scr水平比較 B組患兒24 h尿蛋白定量及血清Scr水平均高于A組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患兒24 h尿蛋白定量及血清Scr水平比較

2.3 血清IL-6、IL-1β、IL-2水平與AKI嚴(yán)重程度相關(guān)性分析 PNS患兒血清IL-6與24 h尿蛋白定量、血清Scr水平、AKI分期呈正相關(guān)性(r=0.350、0.308、0.537,P<0.05)。PNS患兒血清IL-1β與24 h尿蛋白定量、血清Scr水平、AKI分期呈正相關(guān)性(r=0.418、0.504、0.595,P<0.05)。IL-2與24 h尿蛋白定量、血清Scr水平、AKI分期呈負相關(guān)性(r=-0.412、-0.420、-0.404,P<0.05)。

2.4 血清IL-6、IL-1β、IL-2對PNS患兒合并AKI的預(yù)測價值分析 血清IL-6、IL-1β、IL-2聯(lián)合預(yù)測PNS患兒合并AKI的ROC曲線下面積(area under curve,AUC)、特異度均高于血清IL-6、IL-1β、IL-2單獨預(yù)測,三者聯(lián)合預(yù)測價值最高。見表3、圖1。

圖1 血清IL-6、IL-1β、IL-2單獨及聯(lián)合預(yù)測PNS患兒合并AKI的ROC曲線圖

3 討論

腎是特異性自身免疫感染因子及異常免疫應(yīng)答的常見靶點,器官再生能力差、毒素累積、缺氧、動脈血容量不足等各種致病條件均可影響腎結(jié)構(gòu)及功能喪失,最終導(dǎo)致腎小球硬化及腎損傷[10]。AKI為PNS患兒的嚴(yán)重合并癥,感染、重度水腫、急性腎小管壞死等因素均可導(dǎo)致AKI發(fā)生,AKI病理發(fā)展分為起始、延伸、維持和恢復(fù)4個階段[11]。起始階段腎組織輕微損傷,因腎內(nèi)自發(fā)保護機制,該階段及時修復(fù)損傷可完全恢復(fù);延伸階段由于腎缺血及再灌注延長,組織炎癥反應(yīng)不斷擴大,致使腎小球濾過率下降,該階段是AKI早期診斷及治療干預(yù)的最佳時機;維持及恢復(fù)階段腎組織損傷嚴(yán)重,腎小球濾過率持續(xù)降低,這兩個階段需采取內(nèi)源性再生手段幫助修復(fù)AKI,但完全恢復(fù)可能性較低[12]。因此,早期發(fā)現(xiàn)并及時給予有效治療措施對改善PNS患兒AKI至關(guān)重要。

IL-6為來源廣泛的正向調(diào)節(jié)因子,主要發(fā)揮促炎作用,正常機體血清IL-6水平處于低應(yīng)答狀態(tài),其表達既受機體穩(wěn)態(tài)控制,又可在炎癥刺激后發(fā)生上調(diào)[13]。IL-1β由IL-1分泌,屬于常見炎癥因子,具有調(diào)節(jié)樹突狀細胞、巨噬細胞等作用,能驅(qū)化、促進輔助性T細胞17分化,刺激相關(guān)細胞因子產(chǎn)生,誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)及免疫失衡[14]。IL-2屬于輔助性T細胞1類細胞因子,能通過復(fù)雜免疫調(diào)節(jié)作用促使機體發(fā)揮抗感染、抗腫瘤、改善免疫失衡狀態(tài)等功能。本研究結(jié)果顯示:B組患兒血清IL-6、IL-1β水平均高于A組,IL-2水平低于A組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這提示,血清IL-6、IL-1β、IL-2可能參與PNS患兒AKI發(fā)生過程。分析原因可能為:IL-6能夠通過反式呈遞通路促進T細胞分化,誘導(dǎo)腎小球間質(zhì)成纖維細胞增殖及合成,加重腎小管間質(zhì)病變,而內(nèi)皮素可進一步趨化單核細胞分泌更多促炎因子,造成局部炎癥浸潤,同時IL-6能提高內(nèi)皮細胞和巨噬細胞促凝血活性,使系膜細胞蛋白激酶活性增加,從而導(dǎo)致AKI[15-16]。有研究報道,靶向抗IL-6細胞因子的生物制劑可通過阻斷IL-6活性,抑制腎炎癥,來減輕炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)的AKI[17]。IL-1β可與IL-1受體結(jié)合,誘導(dǎo)其他白細胞介素、腫瘤壞死因子、干擾素等炎癥因子及促進纖維化介質(zhì)合成,促使炎性細胞向腎組織浸潤,最終導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化及腎小球硬化[18]。有研究認為,IL-1β是兒童PNS炎癥反應(yīng)的核心介質(zhì),通過監(jiān)測IL-1β有助于評估PNS病情進展,抑制機體IL-1B水平上升可能幫助緩解PNS患兒AKI情況[19]。炎癥因子介導(dǎo)的腎組織損傷在PNS發(fā)病過程中發(fā)揮重要啟動性作用,IL-2由活化T細胞產(chǎn)生,是參與體內(nèi)免疫調(diào)控的多肽,其異常表達能激活多種免疫細胞,影響靶細胞的免疫應(yīng)答反應(yīng),其水平降低提示機體細胞免疫功能下降,免疫系統(tǒng)出現(xiàn)紊亂,從而促進IL-1、IL-6等促炎因子產(chǎn)生[20]。Rose等[21]研究發(fā)現(xiàn),IL-2缺乏可促使狼瘡性腎炎患者腎內(nèi)CD4+活化,通過低劑量IL-2治療可降低腎內(nèi)調(diào)節(jié)性T細胞活性及其增殖,從而改善腎組織損傷。

24 h尿蛋白定量與腎病關(guān)系密切,健康機體尿液蛋白含量極低,尿蛋白含量的持續(xù)增多是腎組織受損的重要標(biāo)志[22]。Scr是人體肌肉代謝產(chǎn)物,可通過腎小球濾過,并近乎全部隨尿液排除體外,因此臨床常用血清Scr輔助評估人體腎功能損害程度,血Scr升高說明腎功能受損[23]。本研究結(jié)果顯示,B組患兒24 h尿蛋白定量及血清Scr水平均高于A組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這說明,PNS合并AKI患兒腎功能損傷更為嚴(yán)重。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn):血清IL-6、IL-1β均與24 h尿蛋白定量、血清Scr水平、AKI分期呈正相關(guān)性;IL-2與24 h尿蛋白定量、血Scr水平、AKI分期呈負相關(guān)性。這表明,炎癥介質(zhì)IL-6、IL-1β、IL-2均與AKI有關(guān)。本研究中ROC曲線分析得出,血清IL-6、IL-1β、IL-2三者聯(lián)合預(yù)測價值最高。這表明,血清IL-6、IL-1β、IL-2的聯(lián)合檢測可作為PNS患兒合并AKI的生物學(xué)預(yù)測指標(biāo),臨床可通過早期檢測PNS患兒血清IL-6、IL-1β、IL-2水平評估AKI發(fā)生風(fēng)險,及時采取針對性預(yù)防措施修復(fù)AKI。

綜上所述,血清IL-6、IL-1β、IL-2水平均與PNS患兒合并AKI顯著相關(guān),可用作未來生物學(xué)標(biāo)志物和分子治療的藥物靶標(biāo)。