宋曉園，賴佐發(fā)，廖婷，謝美珍，吳曉勇

贛州市綜合檢驗檢測院，江西 贛州 341000

漂蒼術(shù)收載在《江西省中藥飲片炮制規(guī)范》（2008 年版）［1］中，是江西的特色中藥飲片，其炮制工藝為：取蒼術(shù)片，加米泔水浸漂1 d，撈出，用清水漂6 h，洗凈，干燥。《中國藥典》2020 年版一部［2］未收載漂蒼術(shù)的炮制規(guī)格?！渡虾Ｊ兄兴庯嬈谥埔?guī)范》（2018 年版）［3］將藥材除去雜質(zhì)，用米泔水浸30 min，洗凈，潤透，切厚片，干燥，用蜜炙麩皮拌炒至棕黃色，篩去麩皮?！顿F州省中藥飲片炮制規(guī)范》（2005 年版）［4］取凈蒼術(shù)，用米泔水浸泡15～30 min，洗凈，潤透，切薄片，干燥，照麩炒法用文火炒至棕黃色?！墩憬≈兴幣谥埔?guī)范》（2015年版）［5］取原藥，除去雜質(zhì)，米泔水浸，取出，潤軟，切厚片，干燥，再照麩炒法，投入蒼術(shù)片，炒至表面深黃色時取出，篩去麩皮，攤涼。部分地方的炮制規(guī)范相對于《中國藥典》增加了“米泔水漂蒼術(shù)”的炮制方法，但各地方標準炮制的方法均不一致。經(jīng)文獻研究［6-9］蒼術(shù)米泔水漂制炮制后燥性降低，而健脾藥效增強。根據(jù)江西省中藥飲片炮制規(guī)范修訂要求，參考文獻［10-13］對其炮制工藝關(guān)鍵點的參數(shù)進行研究，并考察有效成分的變化。以揮發(fā)油、醇浸出物、蒼術(shù)素為檢測指標，用于炮制工藝的參數(shù)及質(zhì)量標準的研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Waters e2695 高效液相色譜儀［PDA 檢測器，沃特世科技（上海）有限公司］；Agilent1260 高效液相色譜儀（DAD 檢測器，安捷倫科技公司）；XS205DU 電子天平［梅特勒-托利多（瑞士）］；S220-k 多參數(shù)測試儀［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司］；202-OA 電熱恒溫干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；SX2-12-10G 箱式電阻爐（上海躍進醫(yī)療器械有限公司）。

1.2 試藥

蒼術(shù)對照藥材（中國食品藥品檢定研究院，批號120983-202106）；蒼術(shù)素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號111924-201806，含量為99.5%）；甲醇、乙腈為色譜純（SIGMA-ALDRICH?），其他試劑均為分析純（西隴科學股份有限公司），薄層板（青島海洋化工有限公司制造），水為純化水（FST-IV-20 超純水機制備）。

1.3 樣品

北蒼術(shù)（批號：20211201、20211202、20211203）及相應(yīng)炮制品漂蒼術(shù)（批號：20220101、20220102、20220103）均由江西金品堂中藥飲片有限公司提供；漂蒼術(shù)（批號：220101）由江西百仁中藥飲片公司提供；漂蒼術(shù)（批號：202112090-1）由樟樹市慶仁中藥飲片有限公司提供；漂蒼術(shù)（批號：20220201）由江西國都中藥飲片有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 炮制工藝研究

參考文獻［6,11-12］，漂制蒼術(shù)用米泔水的配比為2∶100（kg/kg），使用當?shù)氐亩i米配制米泔水，對現(xiàn)行炮制規(guī)范［1］中的加米泔水浸漂1d，用清水漂6 h，干燥溫度等參數(shù)進行研究，參考《中國藥典》［2］及文獻［6,10,13］，揮發(fā)油是蒼術(shù)燥性的主要成分，醇浸出物具有一定的藥理作用，蒼術(shù)素是健脾的有效成分，故以揮發(fā)油、浸出物、蒼術(shù)素為指標。

2.2 揮發(fā)油測定

參照《中國藥典》2020 年版四部［14］通則2204揮發(fā)油測定法進行檢測。樣品需要粉碎通過二號篩，取樣量約為30 g。

2.3 浸出物測定

參照《中國藥典》2020 年版四部［14］通則2201浸出物測定法中醇溶性浸出物測定法熱浸法，溶劑為稀乙醇進行檢測,樣品需要粉碎通過二號篩，取樣量約為4 g。

2.4 蒼術(shù)素測定

2.4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性色譜柱：Platisil ODS-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（79∶21）；流速：1.0 mL/min；檢測器：PDA；檢測波長：340 nm；柱溫：30 ℃；進樣體積：10 μL。理論板數(shù)按蒼術(shù)素峰計算不低于5 000。對照品及供試品圖譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖：A.蒼術(shù)素對照品溶液；B.供試品溶液

2.4.2 溶液的配制對照品溶液的制備：取蒼術(shù)素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL 含80.16 μg 的溶液。供試品溶液的制備：取樣品粉末（過三號篩）約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL,密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4.3 線性關(guān)系考察精密量取“2.4.2”項下的蒼術(shù)素對照品溶液適量，分別制成含蒼術(shù)素2.004、5.010、10.02、20.04、40.08、80.16 μg/mL 的系列對照品溶液，各進樣10 μL，以蒼術(shù)素進樣質(zhì)量（μg）為橫坐標X，峰面積為縱坐標Y，計算回歸方程及相關(guān)系數(shù)。結(jié)果Y=132.51X-28.14，r=0.999 9，表明蒼術(shù)素在0.020 04～0.801 6 μg 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4.4 精密度考察取“2.4.2”項下對照品溶液適量，制得濃度為32.06 μg/mL 的溶液，重復進樣6 次，測得峰面積的RSD 為0.18%，結(jié)果表明精密度良好。

2.4.5 穩(wěn)定性考察取同一份供試品溶液，分別于制備后0、2、4、6、8、12、24 h 測定含量，測得峰面積RSD為0.93%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。

2.4.6 準確度考察采用加樣回收試驗，取漂蒼術(shù)（批號20220101，含量為0.84%）6 份，每份約0.1 g，精密稱定，分別加入蒼術(shù)素對照品溶液（32.06 μg/mL）25 mL，按“2.4.2”項下供試品溶液的制備方法制備，測定，計算蒼術(shù)素含量及RSD，結(jié)果表明準確度良好。見表1。

表1 回收率試驗

2.4.7 耐用性考察（1）取同一份供試品溶液，用不同品牌的色譜柱［迪馬Platisil ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），月旭Xtimate（250 mm×4.6 mm，5 μm），島津Inertsil ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm）］分別進行測定，分離度均良好，測得含量RSD 為0.78%，表明不同品牌色譜柱對蒼術(shù)素的含量無影響。

（2）取同一份供試品溶液，分別用Waterse2695及Agilent1260 高效液相色譜儀進行儀器比對，兩臺儀器檢測結(jié)果的RSD 為0.33%，表明不同品牌色譜儀對蒼術(shù)素的含量無影響。

2.5 結(jié)果

2.5.1 蒼術(shù)素含量6 批漂蒼術(shù)樣品蒼術(shù)素含量測定結(jié)果見表2，平均含量測定結(jié)果為0.73%。

表2 6批樣品蒼術(shù)素測定結(jié)果

2.5.2 北蒼術(shù)炮制前后指標取江西金品堂中藥飲片有限公司提供的北蒼術(shù)及炮制后的漂蒼術(shù)進行指標比較，結(jié)果見表3。

表3 北蒼術(shù)及米泔水炮制后的漂蒼術(shù)指標比較結(jié)果

藥材通過米泔水漂制炮制后，揮發(fā)油、醇浸物含量降低；蒼術(shù)素含量提高，轉(zhuǎn)移率約為130%。

2.5.3 不同炮制條件下漂蒼術(shù)指標取北蒼術(shù)（20211201）采用不同炮制條件：加米泔水浸漂1 d、2 d；溫度10 ℃、15 ℃、25 ℃；用清水漂6 h，12 h；干燥溫度50 ℃、70 ℃；再按“2.3”“2.4”“2.5”項下方法測定，結(jié)果見表4。

表4 不同炮制條件各指標結(jié)果

漂制2 d，蒼術(shù)素含量升高，但是在生產(chǎn)過程中溫度過高，如夏天或水溫過高，米泔水易腐敗有餿味，會影響炮制品的品質(zhì)。因此選擇漂制1 d 且過程溫度不易過高；清水漂洗時間影響不大，故選擇6 h；干燥溫度過高，揮發(fā)油量減少，且蒼術(shù)素含量同時減少，故干燥溫度應(yīng)小于60 ℃。

3 討論

3.1 蒼術(shù)素含量測定提取條件的選擇

對蒼術(shù)素含量測定的供試品溶液提取方式進行考察，比較了超聲1 h，超聲2 h，水浴回流1 h，結(jié)果含量無明顯差別，故選擇超聲處理1 h。

3.2 炮制工藝的選擇

本研究炮制工藝的考察結(jié)果與《江西省中藥飲片炮制規(guī)范》（2008 年版）所述炮制工藝一致，故保持原炮制工藝不變。但提示在生產(chǎn)過程中米泔水漂制過程及干燥過程均應(yīng)注意溫度，為炮制工藝的規(guī)范提供了依據(jù)。

3.3 含量測定增項

6 批次漂蒼術(shù)樣品按照《江西省中藥飲片炮制規(guī)范》（2008 年版）檢驗，性狀，顯微鑒別，薄層鑒別，水分，總灰分均符合規(guī)定。本研究新增蒼術(shù)素的高效液相色譜含量測定方法，6 批次漂蒼術(shù)含量有差異，平均含量為0.73%，蒼術(shù)炮制為漂蒼術(shù)后蒼術(shù)素的轉(zhuǎn)移率約為130%?！吨袊幍洹罚?］蒼術(shù)藥材項下蒼術(shù)素的含量限度為0.30%，由于此次研究樣品批次較少，因此蒼術(shù)素的含量限度初步定為0.40%，按此限度各批次漂蒼術(shù)的含量均符合規(guī)定。新增蒼術(shù)素含量測定方法為該品種的標準提高提供了依據(jù)，有利于加強飲片的質(zhì)量控制。