黃瑞雪,尤佳,劉佳,朱業(yè)

(1揚(yáng)州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)科學(xué)系,江蘇 揚(yáng)州225001;2射陽縣人民醫(yī)院內(nèi)科,江蘇 射陽 224300;3揚(yáng)州市婦幼保健院內(nèi)科,江蘇 揚(yáng)州 225001;江蘇省蘇北人民醫(yī)院:4藥學(xué)部,5心血管內(nèi)科,江蘇 揚(yáng)州 225001)

氯吡格雷用于治療因血小板高聚集引起的疾病,如冠心病等[1]。氯吡格雷需通過CYP2C19酶活化才能發(fā)揮藥效,藥效與藥物生物轉(zhuǎn)化酶的活性程度有關(guān)[2]。CYP2C19多態(tài)性分布對減少藥物間的相互作用、避免不合理用藥具有重要價值。等位基因編碼的代謝酶具有不同的代謝能力。CYP2C19一般分為快代謝(entensive metabolizer,EM)型、中間代謝(intermediate metabolizer,IM)型及慢代謝(poor metabolizer,PM)型3種基因型[3]。而氯吡格雷的藥效水平可通過CYP2C19基因型進(jìn)行提示,正常野生型表現(xiàn)為EM型;絕大多數(shù)等位基因突變會造成CYP2C19酶代謝能力下降,表現(xiàn)為PM型,這會影響氯吡格雷治療的個體反應(yīng)和導(dǎo)致藥物不良反應(yīng)。目前關(guān)于CYP2C19基因多態(tài)性分布在冠心病患者的研究報告不多,因此,本研究測定蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者CYP2C19基因的多態(tài)性和分布情況,為冠心病患者的精準(zhǔn)用藥提供指導(dǎo)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2019年8月至2022年12月?lián)P州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院和蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治、且完善CYP2C19基因多態(tài)性檢測的2926例冠心病患者為研究對象,患者經(jīng)臨床癥狀及冠狀動脈造影確診。其中男性2046例,女性880例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)中國蘇中蘇南地區(qū)漢族居民;(2)年齡≥60歲;(3)所有患者無親緣關(guān)系。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)肝腎功能異常;(2)嚴(yán)重感染或患有惡性腫瘤、甲狀腺或其他血液系統(tǒng)病變;(3)有家族遺傳病史;(4)研究者認(rèn)為其他各種原因不適合入組者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 基因型檢測

根據(jù)說明書將所有提取的DNA進(jìn)行位點(diǎn)檢測,使用人類CYP2C19基因檢測試劑盒按照說明書進(jìn)行CYP2C19相關(guān)基因檢測[4]。焦磷酸測序儀對CYP2C19相關(guān)基因位點(diǎn)進(jìn)行測序和結(jié)果判定[5]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 患者CYP2C19基因型和等位基因頻率分布

2926例患者中,CYP2C19(G636A)基因型分別為純合野生型(GG)2606例(89.06%),突變型(GA)316例(10.80%),突變型(AA)4例(0.14%)。CYP2C19(G681A)基因型分別為純合野生型(GG)1313例(44.87%),雜合突變型(GA)1268例(43.34%),純合突變型(AA)345例(11.79%)。CYP2C19基因突變經(jīng)χ2檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg遺傳平衡(P>0.05),具有群體代表性(表1)。

表1 CYP2C19等位基因型頻率和等位基因頻率分布及Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)

2.2 患者CYP2C19等位基因分布情況

本研究CYP2C19分為:CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3,分布頻率分別為61.11%、33.46%、5.43%。其中男性分布頻率分別為60.97%、33.75%、5.30%。女性分布頻率分別為61.48%、32.78%、5.74%。在不同性別之間CYP2C19等位基因分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.828,P>0.05;表2)。

表2 患者CYP2C19等位基因頻率分布

2.3 患者CYP2C19代謝型分布情況

根據(jù)CYP2C19基因型判斷,EM型1 118例,占38.21%。IM型1 340例,占45.80%。CYP2C19基因主要為中快代謝型。其中基因型*1/*2占39.20%(1 147/2926),*1/*3占6.60%(193/2926)。PM型468例,占15.99%。其中基因型*2/*2占11.79%(345/2926),*2/*3占4.14%(121/2926),*3/*3占0.07%(2/2926;表3)。

表3 不同性別患者CYP2C19基因表型分布

其中男性中基因型為野生型純合子*1/*1(636GG,681GG)占38.03%(778/2046),基因型為雜合子*1/*2(636GG,681GA)和*1/*3(636AG,681GG)占45.85%(938/2046),基因型為突變型純合子*2/*2(636GG,681AA)、*2/*3(636GA,681GA)和*3/*3(636AA,681GG)占45.68%(330/2046);女性中基因型為野生型純合子*1/*1(636GG,681GG)占38.64%(340/880),基因型為雜合子*1/*2(636GG,681GA)和*1/*3(636AG,681GG)占45.68%(402/880),基因型為突變型純合子*2/*2(636GG,681AA)、*2/*3(636GA,681GA)和*3/*3(636AA,681GG)占15.68%(138/880)。CYP2C19基因表型分布在不同性別之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.051,P>0.05;表3,圖1)。

2.4 不同地區(qū)人群CYP2C19基因多態(tài)性比較

蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者CYP2C19等位基因分布與陜西比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者CYP2C19代謝型分布與陜西、廣州、淮海、河南地區(qū)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05;表4)。

表4 不同地區(qū)人群CYP2C19等位基因型和代謝類型比較

3 討 論

臨床上如何指導(dǎo)冠心病患者合理用藥是一個重要問題[14]。氯吡格雷對二磷酸腺苷(adenonisine diphosphate,ADP)所介導(dǎo)的血小板凝聚具有不可逆的抑制作用[15]。探討CYP2C19基因多態(tài)性和分布特征對于指導(dǎo)用藥具有重大意義。

CYP2C19酶突變具有遺傳多態(tài)性[16]。早在2003年德國Müller團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)105例冠心病支架植入術(shù)后患者中,約5%的患者對氯吡格雷反應(yīng)較弱。影響治療的個體反應(yīng)和產(chǎn)生藥物不良反應(yīng)是由于等位基因編碼的代謝酶具有不同的代謝能力[17]。本研究蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者的CYP2C19分為CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3三種。中國漢族人CYP2C19*17等位基因頻率通常<1%。本研究中未發(fā)現(xiàn)CYP2C19*17等位基因。中國人群最常見的功能缺失的等位基因是CYP2C19*2和CYP2C19*3兩種類型,這兩種等位基因突變均能造成CYP2C19酶活性的下降或喪失,從而影響氯吡格雷的用藥療效。CYP2C19突變雜合子GA型,提高基因突變患者氯吡格雷2～3倍的劑量,能達(dá)到正常基因患者75mg/d的治療效果[18]。CYP2C19突變純合子AA型,即使增加劑量也不能完全解決氯吡格雷抵抗,應(yīng)更換其他藥物[19]。

通過檢測患者的CYP2C19基因,可以判斷患者CYP2C19的功能。根據(jù)基因型判斷,EM型1 118例,占38.21%。IM型1340例,占45.80%。這與既往報道[6]結(jié)果相似。慢代謝型468例,占15.99%,氯吡格雷代謝不良者,體內(nèi)不能有效地將其轉(zhuǎn)化為活性物質(zhì),使藥物療效顯著降低,需要調(diào)整用藥。

本研究中CYP2C19等位基因和表型分布在不同性別之間無顯著差異,表示CYP2C19基因多態(tài)性分布未受性別明顯影響,這與以往報道結(jié)果相一致[6]。蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者CYP2C19等位基因和代謝型分布與北京、安徽、重慶、云南地區(qū)無顯著差異,而與陜西、廣州、淮海、河南地區(qū)之間相比有顯著差異。地域分布差異可能與現(xiàn)代的起居方式、周圍環(huán)境及所選樣本量等因素有關(guān)。

綜上,我國蘇中蘇南地區(qū)冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性的分布存在差異,以快中代謝型為主,且不同性別間無顯著差異,對冠心病患者的精準(zhǔn)用藥具有一定的參考價值。