閆睿怡，何琳莉★，謝佳軒，熊 典

（1.南充市川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，四川 南充 637000；2.川北醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637000）

食管癌是我國(guó)常見(jiàn)的上消化道惡性腫瘤之一[1]。國(guó)家癌癥中心的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2015 年我國(guó)食管癌患病例數(shù)和死亡病例數(shù)分別位居所有惡性腫瘤的第6位和第4 位，嚴(yán)重影響我國(guó)居民的健康和生命安全[2]；并且食管癌的5 年標(biāo)化生存率僅為30.3%，與其他癌癥相比較低[3]。有研究指出，轉(zhuǎn)錄單元中編碼的遺傳信息會(huì)通過(guò)構(gòu)成細(xì)胞基因表達(dá)程序的一系列復(fù)雜事件轉(zhuǎn)移到最終產(chǎn)物、非編碼轉(zhuǎn)錄本和蛋白質(zhì)，由轉(zhuǎn)錄、共轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控線索控制[4]。SATB1 于2008 年被發(fā)現(xiàn)和乳腺癌的轉(zhuǎn)移聯(lián)系緊密[5]，隨后又在胰腺癌[6]、消化系統(tǒng)惡性腫瘤[7]、泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤等多種惡性腫瘤中被發(fā)現(xiàn)存在過(guò)表達(dá)，同時(shí)SATB1 被大部分學(xué)者認(rèn)為能夠參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖與侵襲。有研究指出，SATB1 介導(dǎo)的基因可參與（直接或間接）細(xì)胞周期進(jìn)展、細(xì)胞凋亡抑制和EMT 誘導(dǎo)的調(diào)控等過(guò)程。

近年來(lái)SATB1 被報(bào)道可參與食管癌的多個(gè)演變過(guò)程，而食管癌中SATB1 的高表達(dá)可能與疾病的分級(jí)以及患者的預(yù)后有關(guān), 所以SATB1 與食管癌的臨床診療有密切聯(lián)系，具備潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。因此，本文欲從食管癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、診療等角度，介紹SATB1 與食管癌關(guān)系的最新研究成果，為食管癌的相關(guān)研究及臨床靶向、免疫治療提供新思路。

1 SATB1 基因與食管癌發(fā)生的關(guān)系

有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，SATB1 基因在食管癌中的表達(dá)與癌組織腫瘤細(xì)胞分化水平、病理學(xué)分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期等呈正相關(guān)，并且SATB1 基因在食管癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織[8]。Ma 等[9]通過(guò)定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）和蛋白質(zhì)印跡法分析了SATB1 在食管癌組織和正常食管組織中的mRNA 和蛋白表達(dá)量。研究結(jié)果表明，SATB1 在食管癌組織中的mRNA 及蛋白表達(dá)水平顯著高于正常食管組織。而且，SATB1 在不同食管癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況也有所不同。Huang 等[10]通過(guò)免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，與分化良好的組織相比，SATB1 在分化不良的組織中的表達(dá)顯著更高。李立明等[11]發(fā)現(xiàn)SATB1 基因主要表達(dá)于食管鱗癌的細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，食管鱗癌組織SATB1 基因陽(yáng)性表達(dá)率較癌旁組織高，表明SATB1 基因可能發(fā)揮致癌基因的作用，從而參與了食管鱗癌的進(jìn)展。已有研究證明，SATB1 可通過(guò)上調(diào)FN1 和PDGFRB 而在食管癌中發(fā)揮原癌基因的作用[12]。因此，SATB1 可作為篩選食管癌高危轉(zhuǎn)移患者的潛在指標(biāo)。

2 SATB1 基因與食管癌進(jìn)展的關(guān)系

食管癌的疾病進(jìn)展方式主要有淋巴道轉(zhuǎn)移、直接蔓延、血道轉(zhuǎn)移等[13]。食管癌的進(jìn)展涉及多基因多信號(hào)通路的改變，有大量研究表明SATB1 可參與食管癌的惡性進(jìn)展[14]。

2.1 SATB1 異常表達(dá)與食管癌細(xì)胞增殖和凋亡的關(guān)系

本課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷可通過(guò)下調(diào)SATB1 的表達(dá)來(lái)抑制 Eca109 細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用[15]。沉默SATB1對(duì)食管癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用[16]。Ma等[9]通過(guò)CCK-8 測(cè)定在體外研究了SATB1-shRNA KYSE450 和EC9706 細(xì)胞的增殖活性。結(jié)果表明，所有SATB1-shRNA KYSE450 和EC9706 細(xì) 胞 的 生 長(zhǎng)速度均低于空載體對(duì)照細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。這些數(shù)據(jù)表明，SATB1 可作為參與促進(jìn)食管癌細(xì)胞增殖的基因之一。宋桂芹[17]通過(guò)細(xì)胞活力檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，SATB1 的敲低可使食管癌TE-1 細(xì)胞的增殖和存活率顯著降低，經(jīng)該課題組研究發(fā)現(xiàn)FN1 和PDGFRB 在人食管癌中高度表達(dá)，且通過(guò)生物網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建分析顯示，F(xiàn)N1 和PDGFRB 是TE-1 細(xì)胞中由SATB1 調(diào)控的中樞基因，F(xiàn)N1 和PDGFRB 的表達(dá)水平會(huì)伴隨SATB1 表達(dá)的升高而上調(diào)。將STAB1 敲除后，癌細(xì)胞的存活率會(huì)降低，若再使細(xì)胞株內(nèi)FN1 或PDGFRB 過(guò)表達(dá)可提升癌細(xì)胞的存活率，且可促進(jìn)其增殖。因此證明SATB1可以促進(jìn)食管癌細(xì)胞的存活。另外，通過(guò)流式細(xì)胞熒光分選技術(shù)對(duì)膜聯(lián)蛋白-V 和碘化丙啶（PI）染色的分析進(jìn)而評(píng)估TE-1 細(xì)胞中的自發(fā)性凋亡后發(fā)現(xiàn)，SATB1 敲低可導(dǎo)致TE-1 細(xì)胞凋亡率從3.87% 增加到12.07%。此外，孫永紅等[12]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，上調(diào)長(zhǎng)鏈非編碼RNA（LncRNA）TMEM9B-AS1 表達(dá)可以通過(guò)TCF7L2-SATB1 途徑，調(diào)控食管癌細(xì)胞環(huán)氧化酶-2（COX-2）和β 連環(huán)蛋白1（CTNNB1）的表達(dá)，從而增強(qiáng)食管癌細(xì)胞增殖和侵襲的能力。

2.2 SATB1 異常表達(dá)與食管癌細(xì)胞遷移和侵襲的關(guān)系

為了進(jìn)一步研究SATB1 對(duì)食管癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響，Ma 等[9]進(jìn)行了Transwell 細(xì)胞體外侵襲實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SATB1 的敲低可以顯著抑制食管癌KYSE450 和EC9706 細(xì)胞的遷移和侵襲能力。此外，與空載體對(duì)照細(xì)胞相比，KYSE450 和EC9706細(xì)胞中SATB1-shRNA 組中侵入膜后側(cè)的細(xì)胞數(shù)量顯著減少。因此得出結(jié)論，與空載體對(duì)照細(xì)胞相比，KYSE450 和EC9706 細(xì)胞中SATB1-shRNA 基團(tuán)細(xì)胞的遷移和侵襲能力明顯降低。Song 等[18]通過(guò)GO 和KEGG 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行富集分析顯示，F(xiàn)N1 和PDGFRB 是食管癌細(xì)胞TE-1 中由SATB1 調(diào)控的通路改變中的關(guān)鍵基因；為了探索食管癌細(xì)胞中兩個(gè)關(guān)鍵基因FN1和PDGFRB 的功能，采用qRT-PCR 和蛋白質(zhì)印跡法來(lái)檢測(cè)SATB1 敲低的TE-1 和EC-109 細(xì)胞中這兩個(gè)關(guān)鍵基因mRNA 和蛋白表達(dá)水平的變化，結(jié)果顯示，F(xiàn)N1 和PDGFRB 的表達(dá)水平受到SATB1 的影響而上調(diào)。在FN1 或PDGFRB 過(guò)度表達(dá)的食管癌TE-1 細(xì)胞中，采用Transwell 測(cè)定法來(lái)評(píng)估這兩個(gè)基因的侵襲和遷移能力發(fā)現(xiàn)，遷移到膜下側(cè)的總食管癌TE-1細(xì)胞數(shù)量顯著增加。同時(shí)，在FN1 或PDGFRB 過(guò)表達(dá)的食管癌EC-109 細(xì)胞中觀察到細(xì)胞入侵能力增加。因此證明SATB1 通過(guò)上調(diào)FN1 和PDGFRB 的表達(dá)水平增強(qiáng)了食管癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力。研究人員將SATB1 基因進(jìn)行特異性沉默處理后發(fā)現(xiàn)，siRNASATB1 組的SATB1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量較其他各組均有明顯的降低，siRNA-SATB1 組的24h、48 h 侵襲細(xì)胞數(shù)均顯著低于siRNA- 對(duì)照組和空白對(duì)照組，由此可見(jiàn)，沉默SATB1 基因可以抑制癌細(xì)胞的遷移和侵襲[11]。Huang 等[10]研究人員通過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶檢測(cè)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SATB1 基因可通過(guò)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)來(lái)影響食管癌細(xì)胞遷移和侵襲的進(jìn)展。因此，證明了SATB1 的表達(dá)與食管癌的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移有很大關(guān)聯(lián)。該課題組成員構(gòu)建了SATB1-siRNA 表達(dá)載體，并將SATB1-siRNA-1 轉(zhuǎn)染到食管癌TE-1 中，從而有效抑制了細(xì)胞遷移和侵襲。

2.3 SATB1 異常表達(dá)與食管癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

研究表明，上皮- 間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是促進(jìn)食管癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的重要通路[19]。李立明等[11]發(fā)現(xiàn)，SATB1 基因在中低分化、TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期的組織和產(chǎn)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯升高，表明SATB1 基因高表達(dá)與食管鱗癌的惡性水平及轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示SATB1 高表達(dá)增強(qiáng)了食管鱗癌的轉(zhuǎn)移能力。Ma 等[9]為了研究SATB1 下調(diào)是否能誘導(dǎo)EMT，進(jìn)行了蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)（分析EMT 相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)），結(jié)果表明E- 鈣黏蛋白的表達(dá)顯著增加，而在所有SATB1 敲低的SATB1-shRNA KYSE450 和EC9706細(xì)胞中，用于錨定和支撐間充質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器的波形蛋白（Vimentin）的表達(dá)顯著降低，表明SATB1可參與食管癌的EMT 過(guò)程，抑制SATB1 可以逆轉(zhuǎn)EMT。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化是啟動(dòng)細(xì)胞進(jìn)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟之一。在EMT 期間，上皮細(xì)胞會(huì)改變其分子特征并獲得間充質(zhì)表型。SATB1 通過(guò)影響EMT 進(jìn)而影響食管癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制目前未見(jiàn)報(bào)道，值得進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。有多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，SATB1 可能與其他相關(guān)因子共同參與食管癌的轉(zhuǎn)移。研究表明，SATB1 可下調(diào)許多非轉(zhuǎn)移性基因的表達(dá)，包括乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1、分化簇82、kisspeptin 和核苷二磷酸激酶A 等。有研究指出，轉(zhuǎn)錄因子和染色質(zhì)組織者SATB1 是影響高階染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因調(diào)控整合的重要因素[20]。Gu 等[21]研究發(fā)現(xiàn)黑激素可通過(guò)抑制NF-κB 信號(hào)通路和降低MMP-9 來(lái)抑制食管癌細(xì)胞TE-1 的轉(zhuǎn)移。

3 SATB1 基因與食管癌預(yù)后的關(guān)系

多項(xiàng)對(duì)食管癌患者生存情況的研究表明，患者出現(xiàn)SATB1 陽(yáng)性表達(dá)時(shí)往往提示預(yù)后不佳[22]。Cong 等[23]發(fā)現(xiàn)，與SATB1 表達(dá)水平高的患者相比，SATB1 表達(dá)水平較低的患者其總生存期更長(zhǎng)，無(wú)病生存率更高。結(jié)合多組數(shù)據(jù)可知，SATB1 表達(dá)是影響食管癌患者總生存期的獨(dú)立因素，這表明高SATB1 表達(dá)可能是食管癌預(yù)后不良的預(yù)測(cè)性生物指標(biāo)，并且有望成為新的治療靶點(diǎn)。Zhai 等[24]發(fā)現(xiàn)，SATB1 mRNA 表達(dá)較高的患者其復(fù)發(fā)率也較高。有研究通過(guò)測(cè)量mRNA 表達(dá)的方式在食管腫瘤組織中檢測(cè)到了SATB1 的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)高SATB1 mRNA 表達(dá)與較差的無(wú)病生存率和生存期相關(guān)。結(jié)合多項(xiàng)試驗(yàn)的數(shù)據(jù)可知，高SATB1表達(dá)可能是手術(shù)后ESCC 患者預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素。Nüssing S 等[25]研究發(fā)現(xiàn)SATB1 在幼稚CD8＋T細(xì)胞中呈高表達(dá)，并在效應(yīng)CD8＋T 細(xì)胞分化時(shí)下調(diào),在幼稚CD8＋T 細(xì)胞中，SATB1 結(jié)合富集在與免疫譜系功能相關(guān)的基因組區(qū)域。因此，SATB1 可能會(huì)通過(guò)促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8＋T 細(xì)胞抑制食管癌中PGK1 的表達(dá)，從而影響食管癌預(yù)后。

4 總結(jié)

食管癌是我國(guó)常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，侵襲能力較強(qiáng)。一般來(lái)說(shuō)，食管癌早期并不會(huì)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，但是由于它沒(méi)有明顯的臨床癥狀，所以經(jīng)常會(huì)被延誤治療，門(mén)診中一旦發(fā)現(xiàn)多數(shù)都處于中晚期。對(duì)于這類(lèi)患者一部分可以進(jìn)行轉(zhuǎn)化治療從而創(chuàng)造手術(shù)機(jī)會(huì)，但仍有大部分患者只能進(jìn)行姑息性治療，雖然這種方法并不能夠徹底治愈食管癌，但是對(duì)于提高患者的生活質(zhì)量以及延長(zhǎng)生存周期仍有一定效果。對(duì)于食管癌分子機(jī)制的研究，在研究新的靶向藥物中具有重要的意義。我們閱讀了現(xiàn)有的SATB1 與食管癌關(guān)系的相關(guān)文獻(xiàn)后，發(fā)現(xiàn)SATB1與食管癌的發(fā)生、發(fā)展等過(guò)程聯(lián)系密切。總的來(lái)說(shuō)，SATB1 基因在食管癌中的表達(dá)與癌組織腫瘤細(xì)胞分化程度等呈正相關(guān)。縱觀近些年來(lái)SATB1 與食管癌關(guān)系的研究進(jìn)展，我們發(fā)現(xiàn)，在2008—2017 這十年的研究中，僅有學(xué)者闡述了食管癌細(xì)胞中SATB1 高表達(dá)的意義，這可以為我們的臨床研究提供很好的思路，但是沒(méi)有將其機(jī)制，以及如何進(jìn)展闡述清楚。本課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，藥物黃芪甲苷可以通過(guò)下調(diào)SATB1 而影響食管鱗癌細(xì)胞的凋亡。因此，我們匯總了近年來(lái)的相關(guān)研究成果，介紹了SATB1 與食管癌關(guān)系的最新研究成果，同時(shí)希望可以為食管癌的臨床靶向藥物治療及相關(guān)研究提供新思路。