粟艷瓊,胡 杰,黃 超,楊 蓉,溫麗霞,沈前程,粟永春通信作者

1.廣西壯族自治區(qū)動物疫病預防控制中心,廣西 南寧 530001 2.廣西金陵農牧集團有限公司,廣西 南寧 530001

0 引言

禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)引起的禽類多種腫瘤性疾病統稱。ALV屬于反錄病毒科禽C型反錄病毒群單股RNA病毒。病毒的內部直徑為35～45 nm的電子密度大的核心,外部為中層膜、外層膜,直徑為80～120 nm,平均直徑為90 nm。目前已有報道的為A～J共10個亞型,其中J亞群白血病病毒(ALV-J)誘發(fā)的雞群的白血病危害最大,給我國的養(yǎng)雞行業(yè)帶來了巨大的損失[1-2]。感染ALV的雞群,可引起發(fā)病雞嚴重的生長發(fā)育不良、受精率和孵化率等生產性能明顯下降;也可以不表現出明顯的臨床癥狀,而造成機體免疫器官功能退化,引起其他疾病的發(fā)生;同時,與其他病原混合感染,臨床發(fā)現的病雞血管瘤、骨髓瘤樣病變、腺胃炎等都與禽白血病病毒的感染有關。

近年來,國內一些原種雞場也開展了一系列ALV的凈化工作,并取得了一定的進展。2012年,國務院發(fā)布《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》將禽白血病作為優(yōu)先防控的動物疫病,《全國肉雞遺傳育種改良計劃(2014—2025)》將禽白血病列為重點監(jiān)測和凈化疾病。這些措施均促進了全國開展ALV凈化的積極性[3]。

p27是ALV病毒群的主要gs抗原[4]。ALV-p27抗原檢出率與種雞群的發(fā)病狀況及其子代雞群的發(fā)病狀況密切相關,因此ALV-p27抗原陽性率可作為開展ALV的流行病學調查和感染風險評估的重要指標[5]。本研究通過監(jiān)測不同日齡雞的雞白血病病毒p27(ALV-p27)抗原,觀察不同品系雞的排毒規(guī)律,為優(yōu)化ALV的控制和凈化方案奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

本研究采集了2020年1月—2023年6月廣西壯族自治區(qū)某種雞場的花雞、麻雞、烏雞3個品系的雛雞胎糞及不同周齡雞的血漿樣本合計160 396份。其中,2020年合計采集樣本19 816份,2021年合計采集樣本67 918份,2022年合計采集樣本42 347份,2023上半年合計采集樣本30 315份。

1.2 主要試劑

禽白血病病毒p27抗原試劑盒購自美國IDEXX公司。

1.3 檢測方法

核心群雛雞全部進行胎糞ALV-p27抗原檢測:對雛雞進行翻肛性別鑒別,并采集雛雞胎糞放入有0.5 mL稀釋液的離心管中,靜置、凍融后進行ALV-p27抗原檢測。育成及開產期分別在不同周齡進行抽檢:無菌采集抗凝血分離血漿,接種DF-1細胞培養(yǎng)9 d,取上清進行ALV-p27抗原檢測。

2 結果分析

2.1 3個品系雞ALV-p27抗原檢測結果

根據2020年1月—2023年6月,3個不同品系雞抽檢的總陽性率可知,ALV感染在廣西雞群中普遍存在(見表1)。其中,花雞ALV-p27抗原總陽性率為1.20%(632/52 845),在3個品系中總陽性率最低。2020年、2021年、2022年、2023上半年,ALV-p27陽性率分別為:1.86%(171/9 183)、1.33%(431/32 510)、0.27%(28/10 526)、0.32%(2/626)。麻雞ALV-p27抗原總陽性率為2.23%(1 211/54 195),在3個品系中陽性率最高。2020年、2021年、2022年、2023上半年ALV-p27陽性率分別為:2.31%(29/1 256)、2.76%(727/2 673)、1.82%(429/23 555)、0.86%(26/3 011)。烏雞ALV-p27抗原總陽性率為1.27%(680/5 356),2020年、2021年、2022年、2023上半年ALV-p27陽性率分別為:2.68%(251/9 377)、1.27%(340/26 678)、0.77%(64/8 266)、0.28%(25/9 035)。3個品系的雞均保持低水平陽性率,且陽性率呈逐年下降趨勢。

表1 2020年1月—2023年6月3個不同品系雞ALV檢測陽性率

比較3個品系雞的ALV-p27抗原總陽性率可知,該種雞場陽性率總體呈下降趨勢:2020年2.28%(451/19 816)、2021年1.75%(1498/85 561)、2022年1.23%(521/42 347)、2023上半年0.42%(53/12 672)。結果表明,該種雞場禽白血病控制和凈化工作取得了一定效果。

2.2 3個品系雞雛雞胎糞、公雞全血及母雞全血p27抗原檢測結果

2020年1月—2023年6月,花雞共檢測雛雞胎糞5 309份,陽性率0.62%(33/5 309);公雞全血1 159份,陽性率1.21%(14/1159);母雞全血4 637份,陽性率1.26%(585/46 377),如表2所示。麻雞共檢測雛雞胎糞7 626份,陽性率3.15%(240/7 626);公雞全血1 136份,陽性率2.11%(241 136);母雞全血45 433份,陽性率2.03%(922/45 433),如表3所示。烏雞共檢測雛雞胎糞8 116份,陽性率0.32%(26/8 116);公雞全血1 103份,陽性率1.45%(16/1 103);母雞全血44 137份,陽性率1.45%(639/44 137),如表4所示。

表2 2020年1月—2023年6月花雞雛雞胎糞、公雞全血、母雞全血p27抗原檢測結果

表3 2020年1月—2023年6月麻雞雛雞胎糞、公雞全血、母雞全血p27抗原檢測結果

表4 2020年1月—2023年6月烏雞雛雞胎糞、公雞全血、母雞全血p27抗原檢測結果

由表2～4可知,2020年1月—2023年6月,花雞雛雞胎糞陽性率從2.48%(14/564)下降至0.00%(0/62)。公雞全血陽性率從1.90%(4/210)下降至0.00%(0/14)。母雞全血陽性率從1.82%(153/8 409)下降至0.36%(2/550)。麻雞雛雞胎糞陽性率較其他2種品系雞高,且有回彈現象,2020年陽性率2.37%(8/338)、2021年陽性率3.18%(157/4 935)、2022年陽性率4.52%(75/1 661)、2023年陽性率3.61%(25/692)。公雞全血陽性率從4.55%(1/22)下降至0.00%(0/57)。母雞全血陽性率從2.23%(20/896)下降至0.04%(1/2 262)。烏雞雛雞胎糞陽性率下降趨勢不明顯,2020年陽性率0.30%(3/995),2021年陽性率0.49%(10/2 041),2022年陽性率0.00%(0/1 022),2023年陽性率0.32%(13/4 058)。公雞全血陽性率從2.94%(6/204)下降至0.00%(0/121),母雞全血陽性率從2.96%(242/8 178)下降至0.27%(13/4 856)。

2.3 雞群不同生長周期排毒情況

3個不同品系的雞在不同生長周期檢測過程中呈現出不規(guī)律的排毒期?；u排毒高峰在1日齡、育成階段(第8周)、開產期(22～26周)。麻雞排毒高峰在1日齡、育成階段(第10周)、開產期(23～29周)及繼代前(第42周)。烏雞排毒高峰在1日齡、育成階段(第11周)、開產期(18～27周)。可根據感染規(guī)律對不同品系的雞選擇最佳ALV凈化時間,從而提升凈化效率,降低凈化成本。

由圖1～3可知,花雞與烏雞不同周齡的ALV-p27抗原陽性率較低,而麻雞不同周齡的ALV-p27抗原陽性率較高。1日齡時,花雞與烏雞陽性率分別為0.62%和0.32%,麻雞的感染率為3.47%?；u與烏雞最高峰的陽性率分別為3.0%和3.96%,麻雞最高峰時的陽性率為9.96%。

圖1 花雞不同生長周期p27抗原陽性率

由圖1可知,花雞1日齡時陽性率為0.62%,第8周來到第1個峰值3.03%,第22、26周陽性率峰值為2.1%和2.3%。之后的陽性率逐步回落,保持較低陽性率。因此,可選擇在1日齡、育成階段(第8周)、開產期(22～26周)進行ALV凈化。

由圖2可知,麻雞1日齡時陽性率為3.47%,第10周到達第1個峰值6.35%,接下來陽性率有所回落,第23、29周時陽性率達到5.09%和9.79%,在第42周再次達到高峰值3.48%,之后陽性率逐步回落至較低水平。因此,應分別在1日齡、育成階段(第10周)、開產期(23～29周)及繼代前(第42周)進行ALV凈化。

圖2 麻雞不同生長周期p27抗原陽性率

由圖3可知,烏雞在不同生長周期感染規(guī)律與花雞相似。1日齡時陽性率為0.32%,第11周陽性率達到第1個高峰2.40%,之后有所回落,第18、27周分別再次到達峰值3.96%和2.08%,之后回歸較低感染水平。因此,可分別在1日齡、育成階段(第11周)、開產期(18～27周)進行ALV凈化。

圖3 烏雞不同生長周期p27抗原陽性率

3 討論

ALV主要為垂直傳播,對疫苗不產生免疫應答,目前尚無切實可行的控制方法。因此,種雞場疫病凈化是控制病毒傳播的有效方法[6]。通過展開對種雞ALV的檢測,不斷淘汰陽性雞,最終達到凈化的目的。廣西壯族自治區(qū)具有豐富的家禽養(yǎng)殖資源,花雞、麻雞、烏雞為廣西地方優(yōu)良雞品系。做好3個品系雞的ALV控制和凈化工作對發(fā)展廣西養(yǎng)雞業(yè)有著重要意義。

本研究抽檢結果表明,ALV在雞群中存在一定范圍的感染?；u、麻雞、烏雞3個品系雞中,麻雞的ALV-p27抗原陽性率總體較其他2個品系雞的陽性率高。這提示了該種雞場麻雞的感染ALV風險較高,在開展凈化工作的過程中應加大對麻雞的抽檢數量,增加抽檢次數,及時淘汰陽性雞。同時也需要控制ALV水平傳播因素,如:雞場衛(wèi)生消毒、種蛋及種蛋庫的消毒、孵化室及孵化器的消毒、活疫苗外源病毒監(jiān)測等,及時采取具體措施,做好ALV控制和凈化工作。

3個品系雞在不同年間的ALV-p27抗原陽性率偶有回彈,花雞在2022年ALV-p27抗原陽性率為0.27%(28/10 526),而在2023上半年ALV-p27抗原陽性率卻為0.32%(2/626)。麻雞在2020年ALV-p27抗原總陽性率為2.31%(29/1 256),而在2021年ALV-p27抗原總陽性率卻為2.76%(727/2 673)。這些年間的ALV-p27抗原總陽性率均較上一年的陽性率有所提升。因此在抽檢過程中,需要考慮到采集樣本的分布均勻性,避免因樣本采集分布不均勻而導致的陽性率升高。2020年1月—2023年6月,ALV-p27抗原總體陽性率呈下降趨勢,這表明該種雞場開展的ALV控制和凈化工作是積極有效的。

從對3個品系雞不同樣本的p27抗原陽性率看,3個品系雞的公雞全血及母雞全血p27抗原陽性率總體呈逐年下降趨勢,而麻雞及烏雞的雛雞胎糞p27陽性率出現回彈現象。這表明即便已分別在1日齡、育成階段、開產期及繼代前進行ALV凈化的陰性雞群,仍然可能存在低水平感染的陽性雛雞。因此,需要經過多次重復的抽查,淘汰陽性雞,有效控制ALV的垂直傳播,從而達到ALV凈化目的。

不同品種或品系的雞對病毒的抵抗力差異很大。因此,通過監(jiān)測各品系雞不同生長周期的ALV-p27抗原陽性率,可為優(yōu)化該品系雞的ALV控制和凈化方案提供重要的數據支撐。通過本研究結果發(fā)現,花雞、麻雞、烏雞3品系的雞中,在1日齡核心群全部進行胎糞檢測,以家系淘汰陽性雛雞和母本,育成階段的凈化工作應分別在第8周、第10周和第11周之前,開產期的凈化工作分別在第22周、第23周和第18周前。3個品系雞在育成階段均出現2次高峰,因此應在此期間開展2次檢測,以達到更理想的凈化效果?；u和烏雞在經過育成階段凈化后,陽性率回落,保持低感染率,這表明對這2種品系雞的ALV凈化措施是符合其生長排毒規(guī)律的。而麻雞,在開產期第42周再次出現感染高峰值3.48%,在調整凈化方案,加大公雞的檢測量后,陽性率回落至1%以下。由此可見對于不同原種雞核心群的ALV凈化來說,并沒有一個完全相同的標準方案[7]。應根據實際檢測情況,及時調整凈化方案。

4 結束語

ALV控制和凈化是一個長期的過程,凈化人員需要在這個過程中根據實際情況不斷調整凈化方案,以達到有效的凈化目的。該種雞場通過2020年1月—2023年6月的ALV凈化工作,有效降低了ALV的陽性率,為AL控制和凈化工作提供了有效的經驗。