信統(tǒng)艷
鄒平市疾病預防控制中心檢驗科,山東鄒平 256200
近些年受到社會整體環(huán)境的影響,我國感染類疾病患者的基數(shù)持續(xù)攀升,而感染疾病患者的感染類型不同,治療方案也不同;若沒有明確患者的病原菌類型便行抗感染治療,不僅無法取得理想的治療效果,甚至會導致患者病情進一步惡化,給患者的生命安全預埋隱患[1]。此外,臨床現(xiàn)階段的感染疾病多以抗生素進行治療,抗生素濫用是普遍存在的問題,也在一定程度上增加了感染疾病發(fā)生、發(fā)展的風險[2]。由此可見,為了有效提升細菌的抗生素敏感性,增加感染疾病的臨床治療有效率,在患者治療前通過微生物檢驗鑒別病原菌類型,并以此為依據(jù)指導用藥,對患者的治療及預后意義重大[3]。微生物檢查的常用技術為涂片鏡檢,即細菌培養(yǎng)標本后涂片檢查,不過細菌培養(yǎng)需要一定的時間,完成細菌培養(yǎng)后再行涂片檢查可能導致患者病情進一步發(fā)展,延誤治療時機。有學者研究指出,原始標本涂片檢查結果、細菌培養(yǎng)后檢查結果具有較高的一致性,可直接對原始標本行涂片檢查[4]。本文選取2021 年1 月—2023 年1 月間鄒平市疾病預防控制中心收檢的200 例標本作為本次研究對象,為探討不同檢查方法在微生物檢驗中的應用價值展開,現(xiàn)報道如下。
將本中心檢驗科收檢的200 例標本設為研究對象,包括痰液標本57 例、尿液標本58 例、膿液標本46 例、胸腹水標本39 例。
涂片鏡檢法:壓片法標本制作,常規(guī)涂片,以無菌消毒棉簽將原始標本置入生理鹽水中,充分混合二者后以酒精燈進行加熱處理,繼而自然風干涂片;抗酸染色、革蘭染色后鏡檢,單個涂片觀察視野為10 個,記錄結果。
細菌培養(yǎng)+涂片鏡檢法:于血平板、沙氏平板性畫線接種操作,35℃、5%~10%CO2培養(yǎng)18~72 h,分別使用蛋白胨水、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液、革蘭氏陰性菌增菌液、肉湯溶解、復蘇凍干菌種,培養(yǎng)環(huán)境恒定為37℃,時間控制在24~120 h,菌種渾濁生長并存在菌膜可停止[5]。
鑒定方法:VITEK 2 Compact 系統(tǒng)鑒定標本內的微生物、優(yōu)勢菌落、致病菌,微生物鑒定過程中可重點篩選涂片鏡檢中的病原菌;檢驗用具均產自珠海貝索生物技術有限公司,ATB 微生物檢定儀、配套板條則產自發(fā)過生物梅里埃公司。
精密度驗證法:制備致病菌的菌懸液,濃度設定為可進行標準度數(shù)的最高值,系列稀釋為10 cfu/min 以下,單個致病菌使用的菌懸液至少為5 種濃度,且每種濃度檢驗頻次至少為10 次[6]。
以精密度驗證法為金標準,對比單一的涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細菌培養(yǎng)在不同標本的微生物檢出陽性率。
本次研究過程中由SPSS 23.0 統(tǒng)計學軟件全程負責對觀察指標的采集、統(tǒng)計,對于計數(shù)資料,以例數(shù)(n)和率(%)表示,組間比較進行χ2檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。
精密度驗證法顯示200 例標本中有均存在微生物,微生物類型包括53 例革蘭陽性菌、96 例革蘭陰性菌、51 例真菌,見表1。
表1 微生物檢驗結果分析(n)
細菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片結果顯示痰液標本、尿液標本、膿液標本、胸腹水標本的診斷符合率與涂片鏡檢結果比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。
表2 不同檢驗方法在不同標本中的診斷符合率比較[n(%)]
細菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片鏡檢、涂片鏡檢在痰液標本、尿液標本、膿液標本及胸腹水標本中的微生物類型診斷符合率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。
表3 不同檢驗方法在不同微生物類型中的檢出符合率比較[n(%)]
微生物檢驗技術在臨床診治感染性疾病中具有至關重要的作用,可以幫助臨床對患者的致病菌類型進行準確鑒別,從而指導用藥,在保證患者用藥安全有效的同時,減少抗生素濫用現(xiàn)象[7]。涂片鏡檢是現(xiàn)階段臨床使用頻率較高的一種微生物檢驗技術,但其使用方案有兩種,①原始標本涂片鏡檢,②細菌培養(yǎng)后涂片鏡檢;由于細菌培養(yǎng)需要耗費較長的時間,此階段患者病情進展則會延誤治療,所以原始標本涂片鏡檢更受青睞。原始標本涂片鏡檢的優(yōu)勢可以概括為以下3 個方面:①可對致病菌類型進行可靠鑒別,以此判斷患者疾病類型;如痰液標本中檢出葡萄球菌,患者有較高的概率為肺炎[8];若檢出結核分枝桿菌,患者有較高的概率為肺結核;而患者機體因特殊形態(tài)致病菌侵襲引發(fā)的感染多表現(xiàn)為胸膜炎、膿腫[9];因此涂片鏡檢可以幫助臨床判斷患者疾病類型。②可判斷標本質量,如標本質量不合格,會引發(fā)檢查誤差,導致患者延期治療、治療不當?shù)龋黾蛹膊〉奈:π裕辉紭吮就科R檢需要進行革蘭染色,若此階段標本顯示鱗狀上皮細胞數(shù)量較多,且伴有膿性細胞,則表明標本質量不合格,需要重新取材[10-11]。③可鑒定致病菌,該方法檢測過程中一些微生物具有典型形態(tài),所以鑒別結果更為可靠。
周九英[12]研究指出,經過涂片檢出及細菌培養(yǎng)后分析痰液、尿液、膿液及腹水的符合率分別為72.72%、75.00%、88.89%、77.78%;涂片檢出及細菌培養(yǎng)后分析痰液的陽性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、92.85%、100.00%;尿液的陽性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、85.71%、92.30%;膿液的陽性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、85.71%、80.00%;腹水的陽性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、83.33%、75.00%;在本次研究中發(fā)現(xiàn),細菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片結果顯示痰液標本診斷符合率為82.46%、尿液標本診斷符合率為86.21%、膿液標本診斷符合率為84.78%、胸腹水標本診斷符合率為79.49%,涂片鏡檢結果顯示痰液標本診斷符合率為89.47%、尿液標本診斷符合率為89.66%、膿液標本診斷符合率為86.96%、胸腹水標本診斷符合率為84.62%,涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細菌培養(yǎng)的觀察指標組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);另外在不同微生物檢出結果方面顯示,涂片鏡檢、細菌培養(yǎng)+涂片檢查結果也高度一致,即統(tǒng)計學分析涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細菌培養(yǎng)的觀察指標組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究結果與前人結果趨于一致,可見原始標本涂片鏡檢,與細菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片均可以判斷患者的感染信息,為其早期治療提供指導。另外,微生物檢驗包含標本采集、檢驗、病原學診斷、抗菌藥物敏感性試驗等操作,獲取結果的過程一般在2~3 d 左右,此過程中患者病情極易發(fā)展,導致致病菌發(fā)生改變[13-14];若在檢驗過程中增加細菌培養(yǎng)操作,病情進展空間會進一步擴大,因此在標本送檢后,應立即進行染色、鏡檢,以便縮短檢查時耗,保證檢查結果對患者病情的治療可以充分發(fā)揮指導作用[15]。
綜上所述,微生物檢驗中涂片鏡檢、細菌培養(yǎng)均有較好的應用價值,可以對微生物類型進行較可靠的鑒別,但在細菌培養(yǎng)后進行涂片鏡檢具有操作時間較長的缺點,而直接對原始標本進行涂片檢測可以分辨標本質量,保證檢驗工作順利開展。