秦楓，邵樂，李健，潘孝青，楊杰*，翟頻，張霞，李晟，孫以團(tuán)

(1. 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，江蘇 南京 210014；2. 農(nóng)業(yè)部種養(yǎng)結(jié)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210014)

仔兔早期斷奶可以縮短母兔繁殖的時(shí)間間隔，增加年繁殖胎數(shù)，但斷奶應(yīng)激會(huì)造成腸道的完整性受到破壞，如萎縮、細(xì)胞功能受損等[1-2]，導(dǎo)致生長(zhǎng)緩慢，死亡率高，嚴(yán)重制約家兔產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。應(yīng)用適宜的營(yíng)養(yǎng)日糧可以降低斷奶后的死亡率[2-4]。Chamorro等[5]研究報(bào)道25日齡斷奶，飼喂基礎(chǔ)日糧至56日齡，幼兔死亡率為31.9%，而基礎(chǔ)日糧添加1%谷氨酰胺后可以降低死亡率。因此，為了實(shí)現(xiàn)早期斷奶，提高母兔的繁殖效率，亟需深入地研究仔兔斷奶營(yíng)養(yǎng)情況。本團(tuán)隊(duì)一直致力于幼兔的氨基酸、小肽營(yíng)養(yǎng)研究，在生產(chǎn)中取得很好的應(yīng)用效果。本試驗(yàn)擬研究日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)斷奶仔兔生長(zhǎng)性能、器官發(fā)育及機(jī)體抗氧化的影響，為完善優(yōu)化仔兔斷奶日糧提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及地點(diǎn)

新西蘭仔兔，來自江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院六合動(dòng)物科學(xué)基地實(shí)驗(yàn)兔場(chǎng)，并在該兔場(chǎng)進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇健康，平均個(gè)體重(547.6±4.83)g的新西蘭白兔仔兔60窩，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3窩，分別飼喂基礎(chǔ)日糧(對(duì)照組)，基礎(chǔ)日糧+0.3%谷氨酰胺+0.3%蘇氨酸(試驗(yàn)Ⅰ組)，基礎(chǔ)日糧+0.6%谷氨酰胺+0.3%蘇氨酸(試驗(yàn)Ⅱ組)，基礎(chǔ)日糧+0.06%丙谷二肽+0.3%蘇氨酸(試驗(yàn)Ⅲ組)。試驗(yàn)組、對(duì)照組分別在28和35日齡時(shí)斷奶，斷奶時(shí)與母兔分開，試驗(yàn)期21 d，至49日齡，時(shí)間為2019年11月至12月。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)飼糧配制參照文獻(xiàn)[6-7]，補(bǔ)充0.3%賴氨酸(Lys)，0.3%蛋氨酸(Met)。草粉為苜蓿草粉。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成(風(fēng)干基礎(chǔ))及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.4 飼養(yǎng)管理

斷奶后仔兔不分籠，每天飼喂2次，分別在早上8：30和下午15：30。試驗(yàn)兔飼喂配合飼料，顆粒料，長(zhǎng)度為1～2 cm，自由飲水，每天清掃衛(wèi)生，并做好各項(xiàng)數(shù)據(jù)記錄。

1.5 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)記錄個(gè)體重、死亡數(shù)，計(jì)算平均日增重(ADG)、成活率。試驗(yàn)?zāi)拷M選取8只體重相近的試驗(yàn)兔屠宰，測(cè)定心臟、肝臟、脾臟、腎臟和胃的重量。

采集血液樣本，3 500 r/min 離心10 min分離血清，-20 ℃保存，用于血清常規(guī)指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定，按照檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.6 數(shù)據(jù)分析

運(yùn)用Excel整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 17.0中單因素方差分析(One-way ANVOA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為顯著差異。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔生長(zhǎng)性能的影響

由表2數(shù)據(jù)表明，各試驗(yàn)組與對(duì)照組仔兔個(gè)體重?zé)o顯著差異(P>0.05)，各試驗(yàn)組死亡率高于對(duì)照組。綜合分析試驗(yàn)II組生長(zhǎng)性能與對(duì)照組最接近，35、49日齡平均個(gè)體重還要高于對(duì)照組，ADG與對(duì)照組相似，僅死亡率高于對(duì)照組，高5.92個(gè)百分點(diǎn)。

表2 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔生產(chǎn)性能的影響

2.2 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔器官重的影響

表3結(jié)果顯示，試驗(yàn)Ⅲ組肝臟重量顯著高于試驗(yàn)Ⅱ組(P<0.05)，心臟、脾臟、腎臟、胃的重量各組之間無顯著差異(P>0.05)，但試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組仔兔的脾臟和胃的重量高于對(duì)照組。

表3 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔器官重的影響 g

2.3 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔血清常規(guī)指標(biāo)的影響

由表4可知，試驗(yàn)組和對(duì)照組之間血清常規(guī)指標(biāo)及相關(guān)酶活力無顯著差異(P>0.05)，日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽后，仔兔28日齡斷奶并未影響仔兔機(jī)體代謝，更未影響仔兔的健康。

表4 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔血清常規(guī)指標(biāo)的影響

2.4 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，各組間血清抗氧化指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)，但試驗(yàn)組血清超氧化物歧化酶(SOD)活力均有提高，其中試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組分別提高了9.58%、7.62%，丙二醛(MDA)含量分別下降19.3%、16.0%。

表5 日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽對(duì)仔兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

在集約化養(yǎng)殖中，早期斷奶是提高母畜繁殖效率的重要措施。然而幼畜早期斷奶，受日糧改變、環(huán)境、生理和心理等因素的影響[8-9]，易出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢、腹瀉和腸道屏障功能受損等斷奶應(yīng)激問題，對(duì)幼畜健康、生長(zhǎng)及成活率造成不利的影響[5，10]?？茖W(xué)家一直在探索緩解早期斷奶應(yīng)激的方法，營(yíng)養(yǎng)學(xué)專家從營(yíng)養(yǎng)角度嘗試解決這一問題，根據(jù)仔畜生理優(yōu)化日糧營(yíng)養(yǎng)緩解應(yīng)激，在不影響生長(zhǎng)的情況下，實(shí)現(xiàn)早期斷奶。

仔兔斷奶死亡率非常高，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)中一般采用35或42 日齡斷奶，降低日糧蛋白，提高纖維來降低仔兔腹瀉，但降低了仔兔的生長(zhǎng)性能。仔豬營(yíng)養(yǎng)研究降低日糧蛋白水平緩解斷奶應(yīng)激腹瀉，但會(huì)降低支鏈氨基酸的含量，從而限制仔豬的生長(zhǎng)[11]，降低4個(gè)百分點(diǎn)或更多時(shí)，即使補(bǔ)充氨基酸到標(biāo)準(zhǔn)化回腸可消化含量一致，仔豬生產(chǎn)性能還會(huì)受到影響[12]。仔兔斷奶前的營(yíng)養(yǎng)供給會(huì)影響斷奶后的抗病能力[13]。仔兔16～18日齡開始采食日糧，且采食量受母兔泌乳量的影響，泌乳量下降，仔兔采食量升高，在仔兔消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完善時(shí)，容易造成消化類疾病。因此，日糧氨基酸營(yíng)養(yǎng)對(duì)早期斷奶仔兔有非常重要的作用。本試驗(yàn)日糧添加谷氨酰胺、蘇氨酸、丙谷二肽后，28日齡斷奶仔兔與35日齡斷奶仔兔生長(zhǎng)性能、器官發(fā)育無顯著差異，其中日糧添加0.6%谷氨酰胺和0.3%蘇氨酸效果較好，在一定程度上提高了仔兔的抗氧化能力，促進(jìn)仔兔機(jī)體健康。氨基酸除了維持機(jī)體營(yíng)養(yǎng)需要，還有額外的功能，特別在早期斷奶腸道修復(fù)方面。研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸可以提高哺乳期的生產(chǎn)性能，降低死亡率，增加35日齡斷奶時(shí)腸道絨毛高度[14]，也可提高30日齡斷奶的仔兔生產(chǎn)性能，增加腸道絨毛高度[15]。張艷蕾等[16]研究報(bào)道日糧添加0.2%的蘇氨酸可以提高30日齡斷奶仔兔的日增重及采食量，降低料重比，提高了血清堿性磷酸酶的活性。但脂多糖(LPS)應(yīng)激條件下，飼糧添加表觀可消化蘇氨酸對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能的影響有限，且表觀可消化蘇氨酸水平與 LPS應(yīng)激對(duì)肉兔的血清生化指標(biāo)無顯著交互作用[17]。研究也發(fā)現(xiàn)日糧添加谷氨酰胺能促進(jìn)斷奶仔兔的腸道發(fā)育[18-19]，改善斷奶后幼兔的生長(zhǎng)性能，降低腹瀉率及死亡率[20]。李柯汝等[21]研究報(bào)道冬毛期水貂基礎(chǔ)日糧中添加谷氨酰胺能降低耗料增重比、MDA 含量以及提高機(jī)體的抗氧化性能。楊杰等[22]發(fā)現(xiàn)日糧添加丙氨酰谷氨酰胺二肽能顯著提高21日齡仔兔的生產(chǎn)性能，促進(jìn)腸道黏膜發(fā)育，提高機(jī)體的抗氧化能力。在水產(chǎn)上，溫震威等[23]研究報(bào)道飼料中添加1.0%丙氨酰谷氨酰胺二肽可提高軍曹魚幼魚血清中總蛋白和白蛋白的含量以及減少血清中甘油三酯和總膽固醇的堆積，提高生長(zhǎng)性能與抗氧化能力，改善低氧脅迫所帶來的氧化損傷。由此可見，優(yōu)化日糧，添加蘇氨酸、精氨酸、谷氨酰胺等功能性氨基酸可以改善幼齡動(dòng)物生長(zhǎng)性能，促進(jìn)腸道發(fā)育，提高機(jī)體健康，降低死亡率。在仔兔生產(chǎn)中應(yīng)用可以將仔兔斷奶提前，從而縮短母兔的繁殖間隔。

本試驗(yàn)表明28日齡斷奶仔兔飼喂添加谷氨酰胺、蘇氨酸或丙谷二肽日糧后的生長(zhǎng)性能、器官發(fā)育、血清生化指標(biāo)與35日齡斷奶仔兔相互之間無顯著差異。3個(gè)試驗(yàn)組中，添加0.6%谷氨酰胺和0.3%蘇氨酸的試驗(yàn)II組比其他2個(gè)試驗(yàn)組效果要好，且提高了仔兔的抗氧化能力，促進(jìn)仔兔機(jī)體健康。