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        胃癌組織中UHRF1、YAP1 和FOXP3 表達(dá)及與患者臨床病理特征的關(guān)系

        2023-10-13 00:55:48朱文娟
        浙江醫(yī)學(xué) 2023年18期
        關(guān)鍵詞:分化陽(yáng)性率胃癌

        朱文娟

        胃癌是常見(jiàn)的一種惡性腫瘤,隨著人們生活方式及飲食結(jié)構(gòu)的變化,其發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì),嚴(yán)重影響人們身心健康[1-2],手術(shù)切除是當(dāng)前治療胃癌的主要方式,但患者預(yù)后并不理想[3]。因此,研究腫瘤相關(guān)基因?qū)⒊蔀橹委煱┌Y的突破口。類泛素樣含環(huán)指域蛋白1(ubiquitin-like containing PHD and ring finger domain protein 1,UHRF1)具有多個(gè)功能域,在多種腫瘤組織中高表達(dá)[4]。Yes 相關(guān)蛋白1(Yes associated protein 1,YAP1)主要參與DNA 修復(fù)、細(xì)胞生長(zhǎng)等過(guò)程,具有促癌作用,在結(jié)直腸癌、卵巢癌等惡性腫瘤中高表達(dá)[5]。叉頭翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子3(forkhead box protein 3,F(xiàn)OXP3)被認(rèn)為是調(diào)控T 細(xì)胞分化及其功能的一種關(guān)鍵因子,作為機(jī)體抗腫瘤系統(tǒng)中的核轉(zhuǎn)錄因子,在多種惡性腫瘤中均高表達(dá)[6]。目前,關(guān)于UHRF1、YAP1和FOXP3 在胃癌組織中表達(dá)的研究較少。本研究旨在探討胃癌組織中UHRF1、YAP1 和FOXP3 蛋白表達(dá)及與患者臨床病理特征的關(guān)系,以期為臨床診治胃癌提供參考。

        1 對(duì)象和方法

        1.1 對(duì)象 收集2021 年1 至12 月湖州市第一人民醫(yī)院經(jīng)手術(shù)切除的85 例胃癌患者的標(biāo)本,包括癌組織和配對(duì)癌旁組織。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)病理檢查證實(shí)為胃癌;(2)均為初診且未接受抗腫瘤治療者。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并全身感染者;(2)合并其他惡性腫瘤者;(3)嚴(yán)重肝腎、心肺功能損害者;(4)既往有胃部手術(shù)史者。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過(guò),患者或家屬均知情同意。

        1.2 方法 采用免疫組化法測(cè)定胃癌組織和癌旁組織中UHRF1、YAP1和FOXP3陽(yáng)性率。取經(jīng)中性甲醛溶液固定的各標(biāo)本,梯度乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,連續(xù)切片,厚度為4 μm。經(jīng)60 ℃烤片30 min,二甲苯脫蠟,采用3%過(guò)氧化氫滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,抗原采用檸檬酸鈉緩沖液煮沸修復(fù),室溫環(huán)境下自然冷卻。再以5%山羊血清室溫封閉30 min,滴加UHRF1、YAP1 和FOXP3 蛋白一抗,4 ℃孵育過(guò)夜。再滴加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗,放置于37 ℃孵育20 min。采用二氨基鄰苯胺(diaminobenzidine,DAB)顯色,自來(lái)水沖洗,蘇木素復(fù)染,梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固,顯微鏡下觀察UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性表達(dá)情況。

        1.3 結(jié)果判定 UHRF1、YAP1 和FOXP3 均定位于細(xì)胞核,染色后主要呈淺黃色至棕黃色顆粒狀。每張切片隨機(jī)選取5 個(gè)不重疊視野,200 倍顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)染色細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞總數(shù),計(jì)算染色細(xì)胞比例。按照染色細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度評(píng)分乘積綜合評(píng)價(jià),無(wú)染色細(xì)胞為0 分,染色細(xì)胞比例≤10%為1 分,10%~<30%為2 分,30%~<50%為3 分,>50%為4 分;細(xì)胞無(wú)著色為0 分,淺黃色為1 分,棕黃色為2 分,棕褐色為3 分。兩項(xiàng)評(píng)分相乘所得總分值即為最終評(píng)分:≤3分表示陰性(-),4~6 分表示弱陽(yáng)性(+),7~9 分表示中陽(yáng)性(++),≥10 分表示強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。陽(yáng)性率=(弱陽(yáng)性+中陽(yáng)性+強(qiáng)陽(yáng)性)切片數(shù)/總切片數(shù)×100%。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以例(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 胃癌組織與癌旁組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 表達(dá)的比較 胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率均顯著高于癌旁組織,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01),見(jiàn)表1。

        表1 胃癌組織與癌旁組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率的比較[例(%)]

        2.2 不同臨床病理特征胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 表達(dá)的比較 不同性別、年齡、BMI 和腫瘤直徑胃癌患者的胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(均P>0.05);低分化胃癌患者的胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率高于高、中分化胃癌患者;Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者的胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者的胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),見(jiàn)表2。

        表2 不同臨床病理特征胃癌患者組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率比較[例(%)]

        3 討論

        大部分胃癌患者早期無(wú)明顯癥狀,并很容易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,預(yù)后較差[7-9]。目前,關(guān)于胃癌發(fā)病分子機(jī)制尚未完全闡明[10-11]。

        UHRF1 主要通過(guò)不同功能域識(shí)別不同染色質(zhì)修飾,從而發(fā)揮不同生物學(xué)功能。UHRF1 屬于UHRF 蛋白家族,在細(xì)胞放射敏感性、DNA 損傷與修復(fù)、細(xì)胞增殖及周期調(diào)控等方面發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),UHRF1 表達(dá)與細(xì)胞增殖能力和分化程度呈正相關(guān),即細(xì)胞增殖能力越強(qiáng)、分化程度越低,其陽(yáng)性率越高[12]。研究發(fā)現(xiàn),UHRF1 參與細(xì)胞周期調(diào)控[13]。景皓月等[14]研究表明,結(jié)腸癌組織UHRF1 陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織,且與腫瘤分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,胃癌組織UHRF1 陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織;UHRF1 陽(yáng)性率低分化胃癌患者高于高、中分化患者,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者高于Ⅰ、Ⅱ期患者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,可見(jiàn)胃癌組織UHRF1 表達(dá)與分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),分化程度越低、臨床分期越高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者UHRF1 陽(yáng)性率越高。

        YAP1 活性增加、過(guò)度表達(dá)可導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖[15-16]。YAP1 在多種惡性腫瘤中高表達(dá),但在胃癌中研究甚少。丁家寶等[17]研究發(fā)現(xiàn),相比于肺良性病變組織,肺癌組織YAP1 陽(yáng)性率較高,YAP1 表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的病理類型、年齡和性別無(wú)關(guān),但與腫瘤組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期和腫瘤直徑相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,胃癌組織YAP1 陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織;YAP1 陽(yáng)性率低分化胃癌患者高于高、中分化患者,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者高于Ⅰ、Ⅱ期患者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,可見(jiàn)胃癌組織YAP1 表達(dá)與分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),分化程度越低、臨床分期越高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者YAP1 陽(yáng)性率越高。

        胃局部微環(huán)境免疫監(jiān)視功能低下所致的免疫逃逸是導(dǎo)致胃癌發(fā)生、發(fā)展的主要原因。FOXP3 可參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié),通過(guò)調(diào)控Treg 細(xì)胞的發(fā)育、分化及成熟產(chǎn)生免疫抑制作用。FOXP3 主要通過(guò)參與抑制腫瘤免疫反應(yīng)促進(jìn)病情發(fā)展[18-19]。尹婕等[20]研究顯示,非小細(xì)胞肺癌組織FOXP3 蛋白表達(dá)水平高于正常肺組織,且與患者某些臨床病理特征有關(guān)。本研究結(jié)果顯示,胃癌組織FOXP3 陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織;FOXP3 陽(yáng)性率低分化胃癌患者高于高、中分化胃癌患者,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者高于Ⅰ、Ⅱ期患者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,可見(jiàn)胃癌組織中FOXP3 表達(dá)與分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),分化程度越低、臨床分期越高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者FOXP3 陽(yáng)性率越高。

        綜上所述,胃癌組織UHRF1、YAP1 和FOXP3 陽(yáng)性率高,并與患者腫瘤分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征相關(guān)。

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