邵起菊，李玉琴，曹莉，楊煜垚，任璠玙，陳榮祥,3*，袁曉艷*

（1.遵義醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州遵義 563000）（2.遵義醫(yī)科大學(xué)生命科學(xué)研究院，貴州遵義 563000）（3.遵義市理化分析測試工程技術(shù)研究中心，貴州遵義 563000）

菊苣（Cichorium intybusL.Chicory）屬于菊科菊苣屬草本植物，廣泛分布于世界各地，為典型的藥食兩用型植物，地上干燥部分及根部可以作為藥材使用[1]。菊苣中含有酚酸、黃酮、揮發(fā)油等多種有效成分[2]，其中，酚酸類化合物是菊苣中的主要活性成分，而咖啡酸類衍生物是菊苣中酚酸類的核心成分，包括菊苣酸、單咖啡酰酒石酸、綠原酸等[3]，菊苣具有一定的抗氧化、抗尿酸、抗炎、保肝等藥理作用[4]，在食品領(lǐng)域中作為一種重要的工業(yè)作物，用于提取膳食纖維、菊糖、工業(yè)香精[5,6]，在日常中多作為有機(jī)蔬菜、飲料添加物等[7,8]。

研究表明，菊苣中的酚酸類化合物具有良好的抗氧化活性，但針對菊苣中酚類成分與抗氧化活性相關(guān)性方面的分析較少，大部分集中于菊苣的化學(xué)成分含量測定[9,10]或者單獨(dú)研究其抗氧化[11]、抗炎[12]、降血糖[13]、抗尿酸活性[14]等藥理活性，菊苣的化學(xué)成分與其抗氧化活性的關(guān)系尚未有明確報(bào)道。因菊苣的化學(xué)成分多且復(fù)雜，HPLC指紋圖譜技術(shù)能全面地反映樣品化學(xué)成分全貌[15]，更適應(yīng)于研究不同來源的某一植物化學(xué)成分。此外，為更好地研究菊苣的抗氧化活性成分，本研究采用電化學(xué)檢測器，相較于其他檢測器，具有高靈敏度、高選擇性等優(yōu)點(diǎn)，特別適合檢測容易被氧化的物質(zhì)，由此可用來特異性篩查天然產(chǎn)物中的酚酸、黃酮、雜環(huán)類的抗氧化活性成分[16,17]。

然而，單獨(dú)分析菊苣的化學(xué)成分或者活性，不能對成分與活性之間的相關(guān)性有進(jìn)一步明確說明。偏最小二乘回歸（Partial Least Squares Regression，PLSR）分析主要用于研究自變量與因變量之間相關(guān)性的一項(xiàng)分析手段，可以很好地表明化學(xué)成分對活性的相關(guān)作用程度[18]；而灰色關(guān)聯(lián)度分析（Gray Relational Analysis，GRA）是一類對兩個(gè)變量之間關(guān)聯(lián)程度的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，通過關(guān)聯(lián)度來反應(yīng)每個(gè)成分對活性的貢獻(xiàn)大小[19]；皮爾遜分析（Pearson Analysis）則是基于研究兩變量間相關(guān)聯(lián)程度的一類多元統(tǒng)計(jì)分析手段，其相關(guān)系數(shù)P越大，表示其相關(guān)性越強(qiáng)[20]。近年來，多元統(tǒng)計(jì)分析方法普遍用于分析藥用植物的化學(xué)成分與藥效活性的相關(guān)性[21-24]，采用以上三種多元統(tǒng)計(jì)分析法可以多方位驗(yàn)證菊苣的化學(xué)成分和活性的相關(guān)性，實(shí)現(xiàn)對HPLC-ECD指紋圖譜與其抗氧化活性進(jìn)行“譜-效”關(guān)系研究，以進(jìn)一步確定其主要抗氧化活性組分。從而為藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥物質(zhì)量控制的研究提供參考[25,26]，可以更科學(xué)、合理地進(jìn)行菊苣質(zhì)量控制及評價(jià)。

綜上，本研究通過ECD篩查菊苣中抗氧化成分，建立菊苣的HPLC-ECD指紋圖譜，進(jìn)一步采用化學(xué)計(jì)量法分析研究指紋圖譜與抗氧化作用的關(guān)系，明確菊苣抗氧化的主要化學(xué)成分。為菊苣質(zhì)量控制及評價(jià)提供參考，并為完善菊苣的活性研究體系提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 原料

1.1.1 樣品來源

實(shí)驗(yàn)樣品均選擇新鮮、成熟的菊苣地上部分，分別采集自四川省、廣東省等7個(gè)省份共21批樣品，經(jīng)遵義醫(yī)科大學(xué)孟令杰博士鑒定為菊科菊苣屬菊苣（Cichorium intybusL.）地上部分，詳細(xì)信息見表1。

1.1.2 主要試劑

沒食子酸（純度≥98%）、原兒茶酸（純度≥97%）、色氨酸（純度≥99%）、咖啡酸（純度98%）、綠原酸（純度98%）、異綠原酸A（純度≥98%）、異綠原酸B（純度≥98%），均購自阿拉丁生化科技股份有限公司；單咖啡酰酒石酸（純度≥98%），購自成都普菲德生物技術(shù)股份有限公司；菊苣酸（純度≥98%），購自梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；1,5-二咖啡?？鼘幩幔兌取?8%），購自成都德思特生物技術(shù)有限公司；異綠原酸C（純度≥98%），對香豆酸（純度≥98%），購自阿瑪達(dá)斯試劑有限公司；甲醇、乙腈（HPLC），[2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽]（ABTS）、2,4,6-三吡啶基三嗪（TPTZ）、1,1-二苯基-2-三硝基苦肼（DPPH）均為分析純，購自阿拉丁生化科技股份有限公司；實(shí)驗(yàn)室用水為超純水。

1.1.3 主要儀器設(shè)備

Ultimate 3000 bio-RS高效液相色譜儀（配ECD-3000RS電化學(xué)檢測器），Thermo Fisher；SB-800DTD型超聲波清洗機(jī)，寧波新芝；Microfuge 20 centrifuge型臺式離心機(jī)，Beckman公司；1510型酶標(biāo)儀，Thermo Fisher。

1.2 方法

1.2.1 樣品溶液的配制

將樣品清洗后置于干燥箱中50 ℃烘干，粉碎后過80目篩。精密稱取1.0 g，加入20 mL 80%甲醇（V/V），室溫下超聲30 min，離心（9 000 r/min）10 min后取上清液用0.22 μm濾膜過濾，濾液用于色譜分析。

1.2.2 對照品溶液的配制

分別精密稱定沒食子酸、原兒茶酸、色氨酸、單咖啡酰酒石酸、秦皮乙素、咖啡酸、綠原酸、對香豆酸、菊苣酸、異綠原酸B、異綠原酸A、1,5-二咖啡?？鼘幩?、異綠原酸C對照品，分別采用甲醇溶解配制成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，置于-20 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 色譜條件

色譜柱：XBridge BEH Shield RP18（3.0×150 mm，2.5 μm）；流速：0.6 mL/min；柱溫：45 ℃；檢測電壓：650 mV；進(jìn)樣體積：2 μL；流動相：乙腈（A）-50 mmol/L檸檬酸緩沖鹽（pH值2.72，B），梯度洗脫：0～8 min，2.5%～5% A；8～16 min，5%～10% A；16～20 min，10%～12% A；20～32 min，12%～20% A；32～48 min，20%～32% A；48～50 min，32%～70% A。

1.2.4 總酚含量（Total Phenolics Content，TPC）測定

總酚測定采用福林酚法[27]。將“1.2.1項(xiàng)”下樣液稀釋60倍，向試管中加入0.25 mol/L福林酚溶液和稀釋后的樣液各250 μL，混勻后靜置3 min，加入500 μL 15% Na2CO3溶液（m/V），混勻后置于暗處反應(yīng)30 min，離心3 min后取上清液在760 nm處測定吸光度值。以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成的不同濃度作為橫坐標(biāo)，以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，菊苣總酚含量以沒食子酸當(dāng)量折算（mg GAE /g）。

1.2.5 體外抗氧化活性測定

1.2.5.1 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)

根據(jù)文獻(xiàn)[28,29]稍作改進(jìn)。實(shí)驗(yàn)組：將“1.2.1”項(xiàng)濾液稀釋10倍，加DPPH工作液（40 mg/L，甲醇配制）400 μL、稀釋后的樣液40 μL和80%甲醇（V/V）160 μL混勻后置于暗處反應(yīng)30 min，采用酶標(biāo)儀在517 nm處測定吸光度值，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)取平均值；空白組：取80%甲醇（V/V）代替實(shí)驗(yàn)組中的樣液體積，其他條件不變，測定A0值。重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)取平均值。按照公式（1）計(jì)算DPPH自由基清除率C。

式中：

C——體外抗氧化自由基清除率，%；

A1——實(shí)驗(yàn)組：加入樣液后的實(shí)驗(yàn)組所測吸光度值；

A0——空白組：加入80%甲醇代替樣液所測定的吸光度值。

1.2.5.2 ABTS+自由基清除實(shí)驗(yàn)

根據(jù)文獻(xiàn)[30]稍作改進(jìn)后，將3.75 mg/mL ABTS水溶液與0.67 mg/mL K2S2O8水溶液按1:1比例混合均勻，暗反應(yīng)12 h后，用80%甲醇（V/V）稀釋至在734 nm處吸光度值在0.70±0.02范圍即得ABTS工作液。實(shí)驗(yàn)組：將“1.2.1”項(xiàng)下濾液稀釋25倍后，取ABTS工作液400 μL、稀釋后的樣液60 μL和80%甲醇（V/V）140 μL混勻后置于暗處反應(yīng)30 min，采用酶標(biāo)儀在734 nm處測定A1值；空白組：取80%甲醇（V/V）代替實(shí)驗(yàn)組中的樣液體積，其他條件不變，測定A0值。重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)取平均值。按照“1.2.5.1”項(xiàng)下公式（1），計(jì)算ABTS+自由基清除率C。

1.2.5.3 鐵離子還原能力（Ferric Ion Reducing Antioxidant Power，F(xiàn)RAP）

參照文獻(xiàn)[31,32]稍作改進(jìn)，配制TPTZ工作液（5 mg/mL FeCl3水溶液：3 mg/mL TPTZ溶液：40 mg/mL醋酸鈉緩沖液（pH值3.6）=1:1:10）。實(shí)驗(yàn)組：將“1.2.1”項(xiàng)下所得濾液稀釋10倍，取TPTZ工作液400 μL、稀釋后的樣液40 μL和純水160 μL混勻后置于暗處反應(yīng)30 min，采用酶標(biāo)儀在595 nm處測定其A1值，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)取平均值。以Trolox標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成的不同濃度作為橫坐標(biāo)，以Trolox標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，菊苣的鐵離子還原能力以Trolox當(dāng)量（mg TE/L）折算。

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)（2012版本）》軟件進(jìn)行指紋圖譜建立，及相似度評價(jià)；抗氧化實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的基本處理采用Excel軟件進(jìn)行分析；采用SPSS Statistics軟件對樣品的共有峰面積與DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、FRAP值之間的相關(guān)性進(jìn)行GRA及Pearson分析；采用SMICA系統(tǒng)軟件對菊苣提取物的抗氧化活性做PLSR分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學(xué)考察

2.1.1 精密度

取同一份菊苣樣品（S1）溶液按相同色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，以菊苣酸為參照，其相對峰面積RSD值≤2.6%，相對保留時(shí)間的RSD值≤0.21%，精密度良好。

2.1.2 重復(fù)性

平行制備6份菊苣樣品（S1）溶液按相同色譜條件進(jìn)樣，以菊苣酸為參照，其相對峰面積RSD值≤3.5%，相對保留時(shí)間的RSD≤0.22%，重復(fù)性良好。

2.1.3 穩(wěn)定性

取同一份菊苣樣品（S1）溶液按相同色譜條件，每隔4 h進(jìn)樣一次，進(jìn)樣6次，以菊苣酸為參照，其相對峰面積RSD值≤3.8%，相對保留時(shí)間的RSD值≤0.26%，24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2 指紋圖譜相似度評價(jià)

將21批菊苣樣品的特征色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)（2012版本）》中，以樣品S1為參照圖譜，經(jīng)過多點(diǎn)校正生成得菊苣的HPLC-ECD指紋圖譜見圖1。選擇平均數(shù)值法生成21批菊苣的共有模式對照圖譜R見圖2a，共確定21個(gè)共有峰P1-P21。對比指紋圖譜各色譜峰的相對保留時(shí)間，確認(rèn)了13個(gè)酚類化合物，指認(rèn)的13個(gè)酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖見圖2b，化合物結(jié)構(gòu)圖見圖3。21批樣品同對照指紋圖譜的相似度結(jié)果見表2，由此可知21批菊苣與對照圖譜的相似度均大于0.86，表明不同來源菊苣的化學(xué)成分具有較好的一致性。在菊苣HPLC-ECD的共有峰中，所指認(rèn)出的化學(xué)成分中有8種為咖啡酸類衍生物，包括咖啡酸的酒石酸衍生物（菊苣酸和單咖啡酰酒石酸）、奎尼酸衍生物（綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、1,5-二咖啡酰奎尼酸）?？Х人峒捌溲苌锊粌H在數(shù)量上占據(jù)優(yōu)勢，而且其峰面積也相對較大，鑒于ECD可以直接篩查菊苣中的抗氧化活性成分的優(yōu)勢，推測咖啡酸類衍生物可能是菊苣抗氧化的主要化學(xué)成分。

圖1 菊苣的HPLC-ECD指紋圖譜疊加圖Fig.1 HPLC-ECD fingerprint of chicory

圖2 a菊苣對照指紋圖譜；b混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig.2 a: The reference chromatogram of chicory; b: Chromatogram of the standard solution

圖3 13個(gè)成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖Fig.3 Chemical structure of the 13 compounds

表2 菊苣指紋圖譜相似度評價(jià)Table 2 Similarity evaluation results of 23 batches of the chicory samples

2.3 總酚含量及體外抗氧化活性測定

因不同產(chǎn)地間菊苣的抗氧化活性有一定程度上差異，即采取平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差代表其含量，具體結(jié)果見表3。結(jié)果中總酚含量在3.90～30.76 mg GAE/g之間，DPPH自由基清除率為12.07%～82.62%，ABTS+自由基清除率為25.29%～87.10%，F(xiàn)RAP值為40.60～275.48 mg TE/L，由此可推斷出該21批菊苣的化學(xué)成分含量差異較大。為了更進(jìn)一步驗(yàn)證ECD檢測器的結(jié)果可信度，將21批菊苣樣品的總共有峰面積與總酚含量、DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、FRAP值分別進(jìn)行線性擬合分析，相關(guān)系數(shù)（R）分別為0.92、0.95、0.94、0.98，結(jié)果表明21個(gè)共有峰面積與抗氧化活性均有極顯著的相關(guān)性。各參數(shù)之間的線性相關(guān)系數(shù)見表4。

表3 總峰面積及抗氧化活性Table 3 Total common peak areas and antioxidant activity

表4 總共有峰峰面積與抗氧化活性、總酚含量線性相關(guān)系數(shù)Table 4 Correlation coefficients between total common peak areas (A), antioxidant capacity and TPC

2.4 譜-效關(guān)系分析

2.4.1 PLSR分析

運(yùn)用SMICA的偏最小二乘回歸分析方法，以21個(gè)共有峰峰面積為自變量，DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、FRAP值作為因變量，進(jìn)行PLSR分析研究指紋圖譜與抗氧化活性之間相關(guān)性。PLSR分析的回歸系數(shù)結(jié)果見圖4a，可知色氨酸（峰4）、單咖啡酰酒石酸（峰5）、秦皮乙素（峰8）、咖啡酸（峰9）、綠原酸（峰10）、對香豆酸（峰13）、菊苣酸（峰15）、異綠原酸B（峰17）、異綠原酸A（峰19）、1,5-二咖啡?？鼘幩幔ǚ?0）、異綠原酸C（峰21）及未知峰2、6、11、12、14、16、18，共18個(gè)共有峰對DPPH自由基、ABTS+自由基、鐵離子還原能力均起促進(jìn)作用。由變量投影重要性（Variable Importance In Projection，VIP）結(jié)果（見圖4b）可知，單咖啡酰酒石酸（峰5）、菊苣酸（峰15）、異綠原酸A（峰19）、1,5-二咖啡?？鼘幩幔ǚ?0）、異綠原酸C（峰21）及未知峰6、11、12、14，共9個(gè)共有峰VIP值大于1，表明其與抗氧化活性呈現(xiàn)高度正相關(guān)，對清除DPPH、ABTS+自由基，鐵離子還原能力的解釋有著顯著重要性，異綠原酸B（峰17）對DPPH自由基、ABTS+自由基有顯著相關(guān)性。

圖4 PLSR分析結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)回歸系數(shù)（a）與VIP貢獻(xiàn)（b）Fig.4 Standardization regression coefficients (a) and VIP contribution (b) of PLSR analysis

2.4.2 灰色關(guān)聯(lián)度分析

灰色關(guān)聯(lián)度分析（Gray Relational Analysis，GRA）是根據(jù)因素之間發(fā)展趨勢的相似或相異程度，作為衡量因素間關(guān)聯(lián)程度的一種方法，關(guān)聯(lián)度等級越高，表明峰值活性關(guān)系越密切，關(guān)聯(lián)度值超過0.6被認(rèn)為有助于抗氧化活性[33]。將菊苣提取物的抗氧化活性作為因變量，與其共有峰面積進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)分析，成分與活性進(jìn)行回歸分析篩選，將篩選出的成分進(jìn)行關(guān)聯(lián)度排名，可綜合分析出樣品中的主要成分。21個(gè)成分與體外抗氧化活性的灰色關(guān)聯(lián)度排名見表5，結(jié)果表明峰15（菊苣酸）對抗氧化能力貢獻(xiàn)最大，已知成分的關(guān)聯(lián)排名依次為菊苣酸＞單咖啡酰酒石酸＞異綠原酸C＞異綠原酸A＞1,5-二咖啡酰奎寧酸＞秦皮乙素＞異綠原酸B＞原兒茶酸＞沒食子酸＞對香豆酸＞色氨酸＞咖啡酸＞綠原酸，其關(guān)聯(lián)度值均大于0.6，上述結(jié)果則表示菊苣的抗氧化活性強(qiáng)弱是各化學(xué)成分間的共同作用。

表5 菊苣灰度關(guān)聯(lián)分析排名Table 5 Gray relational analysis ranking of chicory

2.4.3 Pearson相關(guān)性分析

運(yùn)用SPSS Statistics軟件，以21批菊苣樣品指紋圖譜的共有峰面積與總酚含量、DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、FRAP值做變量進(jìn)行相關(guān)分析。分析結(jié)果可知共有單咖啡酰酒石酸（峰5）、菊苣酸（峰15）、異綠原酸B（峰17）、異綠原酸A（峰19）、1,5-二咖啡?？鼘幩幔ǚ?0）、異綠原酸C（峰21）和DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、FRAP值皆極顯著正相關(guān)（P＜0.01），結(jié)果見表6。

表6 皮爾遜相關(guān)性Table 6 Pearson correlation coefficient

2.4.4 與其他抗氧化活性篩查方法比較

菊苣在食品生產(chǎn)中的應(yīng)用越來越廣泛，文獻(xiàn)報(bào)道菊苣具有優(yōu)良的抗氧化能力，但有關(guān)抗氧化活性與成分的研究報(bào)道相對較少。研究表明，酚類化合物具有較低的氧化還原電位，可減少過氧化物，阻斷自由基，可以作為很好的抗氧化劑。而菊苣中的酚類化合物具有較強(qiáng)的抗氧化能力，傳統(tǒng)方法通過分離純化后的單體化合物單獨(dú)研究其生物活性，例如研究較多的菊苣酸、單咖啡酰酒石酸已被證明具有良好的抗氧化活性[9,34]。然而，藥用植物的生物活性是多種化學(xué)成分共同作用的結(jié)果。目前，菊苣中其他化學(xué)成分的抗氧化作用研究較少，不同化學(xué)成分對于抗氧化活性的貢獻(xiàn)程度仍不明確；另外，普遍的分離純化單體化合物過程繁瑣、致使工作量加重，且部分化合物穩(wěn)定性較差。為了解決此問題，我們將色譜分離和抗氧化活性評價(jià)相結(jié)合。常用的體外總抗氧化活性評價(jià)方法如分光光度法，包括DPPH自由基清除法、ABTS+自由基清除法和鐵離子還原能力法，均需和色譜分離單獨(dú)進(jìn)行測定，DPPH自由基、ABTS+自由基清除能力和鐵離子還原能力測定等常規(guī)抗氧化活性評價(jià)方法只能測定菊苣的總抗氧化能力，不能反應(yīng)出各成分的抗氧化能力。如陳永平等[35]、Khalaf等[36]對菊苣進(jìn)行抗氧化能力測定，結(jié)果驗(yàn)證了菊苣具有較好的抗氧化能力，但不能得知具體的活性成分。相比之下，電化學(xué)檢測法能更直接、簡便地反映其抗氧化活性[17]，可以直接篩查菊苣中的抗氧化活性成分，且可以直接和色譜分離相結(jié)合。本研究采用電化學(xué)檢測器甄選菊苣中的抗氧化活性成分，色譜圖的峰面積可對抗氧化能力有獨(dú)特的反映，在建立菊苣的HPLC-ECD指紋圖譜后，可對菊苣進(jìn)行體外抗氧化活性研究，通過分光光度法進(jìn)行體外抗氧化活性測定后，將菊苣的共有峰面積與抗氧化做相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)其中存在極顯著的相關(guān)性，進(jìn)一步證實(shí)，HPLC-ECD的結(jié)果也可以用來評價(jià)抗氧化活性且更有優(yōu)勢。相對于傳統(tǒng)的分離單個(gè)化合物的方法，采用HPLC-ECD指紋圖譜結(jié)合Pearson分析、GRA、PLSR分析，不但更容易發(fā)現(xiàn)菊苣抗氧化活性成分，并且可以明確不同化合物對于抗氧化活性的貢獻(xiàn)。在之前的文獻(xiàn)中，對于菊苣中化合物的研究多集中在其酒石酸衍生物，如菊苣酸和單咖啡酰酒石酸[37-40]，而本研究結(jié)果表明其奎尼酸類衍生物同樣在抗氧化中發(fā)揮重要的作用。另外，本研究中對抗氧化有重要貢獻(xiàn)的化學(xué)成分峰2、峰6、峰11、峰12、峰14未能識別，后期可利用其他分析與鑒別技術(shù)對其未知峰進(jìn)行鑒定，繼續(xù)完善對于菊苣的抗氧化物質(zhì)基礎(chǔ)研究。

3 結(jié)論

本研究以菊苣為研究對象，建立了21批不同產(chǎn)地菊苣的HPLC-ECD指紋圖譜，指認(rèn)出沒食子酸、原兒茶酸、色氨酸、單咖啡酰酒石酸、秦皮乙素、咖啡酸、綠原酸、對香豆酸、菊苣酸、異綠原酸A、異綠原酸B、1,5-二咖啡?？鼘幩?、異綠原酸C共13個(gè)酚類化合物。菊苣的總峰面積與抗氧化活性之間具有顯著的相關(guān)性，“譜-效”研究篩選出了對菊苣的抗氧化活性貢獻(xiàn)較大的成分為菊苣酸、單咖啡酰酒石酸、異綠原酸A、異綠原酸B、1,5-二咖啡?？鼘幩帷惥G原酸C、秦皮乙素，該研究進(jìn)一步確定了菊苣抗氧化活性的主要成分，可為菊苣質(zhì)量評估及開發(fā)利用提供一定的參考。