高艷芳 郭琳霞 李永泉 張暉 施金谷
摘 要 楓香樹是我國(guó)重要的藥用植物,目前國(guó)內(nèi)外對(duì)不同種源楓香葉片揮發(fā)性組分的研究鮮有報(bào)道。為探究不同種源楓香葉片揮發(fā)物組分并篩選優(yōu)良單株,以廣東省東江林場(chǎng)9個(gè)不同種源楓香葉片為研究對(duì)象,解析鑒定其揮發(fā)物數(shù)量、化合物類型、化學(xué)型。結(jié)果表明,從9個(gè)種源29個(gè)家系楓香葉片中鑒定出烯類、醇類、酚類、醛類、酮類、烷類和酯類等7類揮發(fā)物,主要揮發(fā)物成分是4-萜烯醇、石竹烯、α-蒎烯、β-蒎烯及檸檬烯,共劃分為5種化學(xué)型,根據(jù)第一主成分石竹烯含量的高低篩選出5個(gè)優(yōu)良家系。
關(guān)鍵詞 楓香葉片;揮發(fā)物;種源;頂空固相微萃取;氣相色譜-質(zhì)譜
中圖分類號(hào):S687 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2023.14.035
楓香樹(Liquidambar formosana)系金縷梅科(Hamamelidaceae)楓香樹屬(Liquidambar)落葉大喬木,最新被子植物分類(APG IV)系統(tǒng)將其歸類于蕈樹科(Altingiaceae),廣泛分布于我國(guó)秦嶺以南各省份,萌生力強(qiáng)[1-4]。全株可藥用,被視為我國(guó)南方重要的材用和鄉(xiāng)土綠化樹種[5-6]。楓香葉片內(nèi)富含抑菌、水果保鮮、抗炎、抗氧化、防腐等作用的單萜、倍半萜化合物,此類化合物具有廣譜高效、綠色低毒的特點(diǎn),在食品保鮮、醫(yī)藥等市場(chǎng)潛在開發(fā)利用價(jià)值較高[2,5-12]。植物揮發(fā)物中的萜類物質(zhì)作為次級(jí)代謝產(chǎn)物的重要部分,其合成、積累、轉(zhuǎn)化受到種源、不同發(fā)育階段、生長(zhǎng)環(huán)境、生理生化條件等眾多因素的調(diào)控[13]。目前對(duì)楓香的基礎(chǔ)研究十分薄弱,主要集中于其揮發(fā)物成分表征及園林應(yīng)用方面,對(duì)不同種源楓香葉片揮發(fā)物差異的研究未見報(bào)道,楓香重要化學(xué)型良種篩選方面更未涉及,直接限制了楓香資源的應(yīng)用。基于此,本研究以廣東省東江林場(chǎng)的9個(gè)不同種源楓香為研究對(duì)象,運(yùn)用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用儀(HS-SPME-GC-MS)萃取楓香葉揮發(fā)物,解析不同種源楓香葉片揮發(fā)物數(shù)量、化合物類型,并鑒定不同楓香家系的化學(xué)型性狀,篩選重要化學(xué)型優(yōu)良單株,為實(shí)現(xiàn)楓香良種選育奠定優(yōu)質(zhì)材料基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 材料
楓香葉片于2021年4月20—23日采集自廣東省東江林場(chǎng)(人工林),造林時(shí)間為2005年5月,地理位置114°44′N、23°38′E。共計(jì)9個(gè)種源29個(gè)家系。試驗(yàn)樣品均選取植株下部大小均勻的健康成熟葉,樣品采后置于17 ℃環(huán)境自然干燥,保存待用。
1.2 儀器試劑
金屬浴裝置;固相微萃取萃取針頭(DVB/CAR/PDMS,50/30 μm);Agilent 7890A/5975C型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀;標(biāo)準(zhǔn)品。
1.3 試驗(yàn)方法
干燥保存樣品快速打磨過(guò)20目篩,取1 g置于20 mL頂空進(jìn)樣瓶?jī)?nèi),樣品置恒溫金屬浴中平衡30 min,頂空萃取33 min,氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口解析3 min,氣相質(zhì)譜條件參考高艷芳等,每個(gè)樣品檢測(cè)設(shè)置3次重復(fù)[14]。利用Excel、SPSS進(jìn)行數(shù)據(jù)整理分析,Origin 2022作圖,聚類分析圖使用R語(yǔ)言進(jìn)行繪制。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同種源楓香葉片揮發(fā)物數(shù)量差異比較
9個(gè)種源29個(gè)楓香家系葉片揮發(fā)物數(shù)量差異較小,如圖1所示。揮發(fā)物數(shù)量較多,尤其是FS1、HY1、HY4、QY2、YJ3及YJ4等家系均出現(xiàn)了揮發(fā)物數(shù)量在100種以上的單株。
2.2 楓香葉片揮發(fā)物化學(xué)成分類型
楓香葉片揮發(fā)物涉及7類(圖2),分別是烯類、醇類、酚類、醛類、酮類、烷類及酯類。其中烯類化合物含量最高,屬于楓香葉片揮發(fā)物的第一類型。
2.3 楓香葉片揮發(fā)物化學(xué)型分布
根據(jù)楓香葉片揮發(fā)物第一主成分將不同種質(zhì)楓香劃定為5種化學(xué)型(圖3),分別為4-萜烯醇型、石竹烯型、α-蒎烯型、β-蒎烯型及檸檬烯型。石竹烯型分布頻數(shù)最大,在27個(gè)家系中均有分布,其中FS2、HY1、JY1、JY2及MZ楓香家系化學(xué)型較為簡(jiǎn)單,均屬于石竹烯型。
2.4 不同家系中5種化學(xué)型所對(duì)應(yīng)的主要化合物相對(duì)含量
楓香5種化學(xué)型的代表性揮發(fā)物中4-萜烯醇、石竹烯、α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯的相對(duì)含量如圖4所示。在絕大多數(shù)家系中石竹烯相對(duì)含量較高。與其他4種主成分相比,石竹烯屬于較為穩(wěn)定的標(biāo)志性代謝物,因此確定石竹烯為楓香葉片的主要揮發(fā)物。
2.5 石竹烯型優(yōu)良家系篩選
采用R語(yǔ)言對(duì)各家系楓香葉片揮發(fā)物數(shù)量及石竹烯相對(duì)含量進(jìn)行聚類分析(圖5),將29個(gè)楓香家系分為3個(gè)亞組。第二分支中的JY2、HY1、YJ2、MZ1、HY4家系化合物數(shù)量分別為104、107、101、104、105種,石竹烯相對(duì)含量分別為17.29%、16.77%、16.77%、15.51%、14.01%,相對(duì)含量及揮發(fā)物數(shù)量均較高,可作為石竹烯型良種選育家系。
3 結(jié)論與討論
楓香葉片揮發(fā)物數(shù)量均在90種以上,其中共鑒定得到烯類、醇類、酚類、醛類、酮類、烷類及酯類7類揮發(fā)物,烯類化合物含量最高。在29個(gè)家系中進(jìn)一步鑒定得到5種化學(xué)型,分別為4-萜烯醇型、石竹烯型、α-蒎烯型、β-蒎烯型及檸檬烯型,其中以石竹烯型分布頻率最高,且石竹烯每個(gè)家系中均有分布,屬楓香葉片中穩(wěn)定的標(biāo)志性萜類代謝物,依據(jù)石竹烯相對(duì)含量的高低篩選出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的石竹烯型家系5個(gè)。
揮發(fā)物是芳香植物生理代謝過(guò)程中釋放的一種次生代謝產(chǎn)物,其含量和質(zhì)量變化取決于遺傳因素、植物起源等,試驗(yàn)采用的廣東省楓香材料均取自于不同種源實(shí)生苗試驗(yàn)林,樹齡、撫育方式等無(wú)差異,可有效去除樹齡、地理環(huán)境等干擾因素[15-17]。
楓香葉片揮發(fā)物中共鑒定得到7類揮發(fā)物,烯類化合物含量最高,以石竹烯、α-蒎烯、β-蒎烯為主。DeCarlo等、陳霞等也得出類似結(jié)論[7,18]。王金鳳等檢測(cè)到的楓香揮發(fā)物以長(zhǎng)葉烯等萜類化合物為主,與本研究結(jié)論存在差異[19]。已有報(bào)道指出石竹烯具有多種藥理活性,如抗菌、抗病毒、抗痙攣、抗癌、抗氧化、抗炎和鎮(zhèn)靜作用,可廣泛開發(fā)應(yīng)用于化學(xué)化工、香精香料等領(lǐng)域[20-22]。本試驗(yàn)篩選得到的楓香優(yōu)良家系可為進(jìn)一步培育具有高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的石竹烯型優(yōu)良單株提供遺傳材料,為經(jīng)濟(jì)效益高的藥用和香料植物資源提供參考。
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