孫明紅 賈學(xué)慧 孫鳳杰 李寶平 王光鑫

膠原蛋白（學(xué)名Collagen）是一種細(xì)胞外蛋白質(zhì)，是由3條肽鏈擰成螺旋形的纖維狀蛋白質(zhì)，也是人體內(nèi)含量最豐富的蛋白質(zhì)，占全身總蛋白質(zhì)的30%以上。膠原蛋白富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸，是細(xì)胞外基質(zhì)中最重要的組成部分，也是皮膚的基本成份，并且是一種使我們的身體成為一個(gè)整體的膠狀物質(zhì)。本研究涉及的口服美容營養(yǎng)粉營養(yǎng)素豐富，可以滿足每日皮膚代謝營養(yǎng)素需求，經(jīng)人體試服驗(yàn)證具有顯著改善皮膚油脂、保濕、增加皮膚彈性等保養(yǎng)皮膚的作用。

一、材料與設(shè)備

1.材料。膠原蛋白肽、彈性蛋白肽、透明質(zhì)酸鈉、維生素A微囊粉、維生素E粉、維生素C、藍(lán)莓果汁粉、葡萄果汁粉、乳酸鈣、葡萄糖酸亞鐵、葡萄糖酸鋅、雨生紅球藻、銀耳多糖、低聚果糖、麥芽糊精。

2.設(shè)備。MS205DU電子天平，梅特勒托利多公司；LHH-1000SDP藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱，上海一恒科技有限公司；快速水分測(cè)定儀，深圳冠亞水分儀科技有限公司；高效液相色譜1260，安捷倫；電子舌TS-5000Z，日本；電子鼻PEN3，德國；無創(chuàng)性皮膚生理功能測(cè)試儀，德國。

二、配方與實(shí)驗(yàn)

1.原料篩選。結(jié)合各原輔料特性，通過單因素試驗(yàn)、響應(yīng)曲面法，篩選出膠原蛋白肽、彈性蛋白肽、透明質(zhì)酸鈉、維生素A微囊粉、維生素E粉、維生素C、藍(lán)莓果汁粉、葡萄果汁粉、乳酸鈣、葡萄糖酸亞鐵、葡萄糖酸鋅、雨生紅球藻、銀耳多糖、低聚果糖作為口服美容營養(yǎng)粉的原料，它們與皮膚健康的關(guān)聯(lián)度如表1所示。

2.輔料篩選。初步選定木糖醇、麥芽糊精、赤蘚糖醇作為產(chǎn)品輔料，通過單因素及響應(yīng)曲面試驗(yàn)篩選，從物料粒度、流動(dòng)性指標(biāo)（休止角）、密度、產(chǎn)品口感評(píng)分等方面確定木糖醇、麥芽糊精及赤蘚糖醇在配方中的添加量，產(chǎn)品最終配方物料粉體指標(biāo)詳見表2。

3.產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境溫濕度的確定。（1）濕度的確定。將配制好的混合物料精密稱量后，用105℃鼓風(fēng)干燥箱恒溫干燥至恒重，分別置于25℃的不同濕度環(huán)境中（25%、35%、45%、55%、65%、75%）吸濕平衡24h后，精密測(cè)定其重量，計(jì)算吸濕百分率（表3），并做折線圖，圖1即為混合物料的吸濕曲線。

由圖1可知，本產(chǎn)品混合物料的吸濕率隨著環(huán)境濕度的增大而升高，在環(huán)境濕度為35%-45%時(shí)，吸收率的升高速率較為緩慢，綜合考慮后將生產(chǎn)環(huán)境濕度定為≤45%（若條件允許≤35%更好）。經(jīng)計(jì)算得出混合物料的相對(duì)臨界濕度為61.31%，環(huán)境濕度達(dá)到該值時(shí)，物料吸濕性將會(huì)發(fā)生明顯變化。

（2）溫度的確定。結(jié)合本產(chǎn)品原輔料性質(zhì)及生產(chǎn)車間生產(chǎn)粉劑類產(chǎn)品時(shí)的環(huán)境溫度，將生產(chǎn)環(huán)境溫度定為18℃-25℃。

三、工藝驗(yàn)證

按照《食品工藝學(xué)》《中藥制劑學(xué)》《藥劑學(xué)》《化藥口服固體制劑混合均勻度和中控劑量單位均勻度研究技術(shù)指導(dǎo)原則》等相關(guān)書籍中工藝研究的指導(dǎo)原則，結(jié)合配方中原料的特點(diǎn)，制定生產(chǎn)工藝。其中，混合時(shí)間為影響產(chǎn)品安全性、各營養(yǎng)素均一性的主要工藝參數(shù)，故需進(jìn)行驗(yàn)證。

將上述各種原料分別過178μm（80目）篩，木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糊精分別過250μm（60目）篩網(wǎng)以去除雜質(zhì)，使顆粒粒度分布均勻，然后加入混合機(jī)中混合一定時(shí)間，使物料充分混合均勻。該產(chǎn)品中營養(yǎng)素成分添加種類較多且量較低，其中維生素A添加量是所有上述成分中最低的，混合工藝最難保證其均一性，故選擇該成分進(jìn)行混合均勻度的驗(yàn)證。

參照程秀花對(duì)不同混合機(jī)最佳混合時(shí)間的研究方法，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：混合時(shí)間分別設(shè)為10min、20min、30min、40min，每組從上部、中上部、中部、中下部、下部5個(gè)不同取樣點(diǎn)進(jìn)行取樣，取樣時(shí)不允許有任何翻動(dòng)或混合，分別測(cè)定每個(gè)樣品的維生素A含量，根據(jù)變異系數(shù)評(píng)價(jià)混合的均勻程度，試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果詳見表4。

實(shí)驗(yàn)室制備樣品時(shí)物料混合30min后，變異系數(shù)<5%，且混合時(shí)間在30min、40min時(shí)，變異系數(shù)均≤5%。為了節(jié)約能源、提高生產(chǎn)效率，初步確定中試生產(chǎn)混合時(shí)間為30min。中試擴(kuò)大生產(chǎn)工藝驗(yàn)證混合工藝的物料均勻度情況，驗(yàn)證結(jié)果詳見表5。中試擴(kuò)大生產(chǎn)時(shí)物料混合30min，維生素A含量的變異系數(shù)<5%，故生產(chǎn)工藝中混合時(shí)間為30min，可以保證各營養(yǎng)素的均一性。

四、保質(zhì)期

參考《保健食品穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》的要求，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行加速試驗(yàn)以考察其穩(wěn)定性。加速試驗(yàn)設(shè)定貯存條件為溫度（37±2）℃，相對(duì)濕度（75±5）%，將包裝完整的產(chǎn)品避光貯存3個(gè)月，在0、1、2、3個(gè)月時(shí)對(duì)產(chǎn)品品的感官、水分、維生素、礦物質(zhì)和微生物等指標(biāo)進(jìn)行考察，產(chǎn)品的理化、有效成分、微生物等各項(xiàng)指標(biāo)未發(fā)生明顯變化，可以判斷使用藥用復(fù)合膜包裝的產(chǎn)品在避光、陰涼、干燥處密封保存的保質(zhì)期為24個(gè)月。

五、效果評(píng)價(jià)

進(jìn)行人體試服試驗(yàn)，對(duì)該口服美容營養(yǎng)粉的效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象。選擇健康女性60名，年齡在25-35歲（不含妊娠、擬妊娠或哺乳期女士）。

2.受試樣品的劑量和測(cè)試。將60名受試者隨機(jī)分成2組（試驗(yàn)組和對(duì)照組），每組30人，試驗(yàn)組服用該口服美容營養(yǎng)粉，對(duì)照組服用安慰劑，按照每日2次、每次20克直接服用。試服期間不改變?cè)瓉淼娘嬍沉?xí)慣，正常飲食，但要保證不使用促進(jìn)表皮再生的藥物及其他激光治療，不口服及外用抗組胺、糖皮質(zhì)激素類藥物，不食辛辣、甜食并忌酒等。

選取受試者面頰皮膚的相應(yīng)部位，用無創(chuàng)性皮膚生理功能測(cè)試儀檢測(cè)皮膚油脂含量、角質(zhì)層含水量和皮膚彈性。試服0天時(shí)檢測(cè)一次，連續(xù)服用28、56天后，再次檢測(cè)。測(cè)量條件為：室內(nèi)，無陽光直射，室溫20℃-25℃，空氣相對(duì)濕度50%-60%。測(cè)量前，受試者用溫水洗臉后不使用任何化妝品，保持皮膚處于自然狀態(tài)2小時(shí)以上。測(cè)量時(shí)，患者取坐位，測(cè)量儀器與測(cè)量部位皮膚表面垂直接觸，根據(jù)測(cè)試內(nèi)容的不同停留適當(dāng)時(shí)間，讀出數(shù)值并記錄。每一測(cè)量部位均測(cè)量3次，取平均值。測(cè)試結(jié)果如表6所示。

試驗(yàn)組28天和56天后，皮膚的油脂含量、角質(zhì)層含水量明顯上升，皮膚彈性也有改善；試驗(yàn)組服用前后以及與對(duì)照組比較，皮膚生理狀態(tài)差異顯著（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.討論。本次選取的受試者平均年齡為32.6歲，最大與最小受試者年齡相差近10歲。年輕受試者的皮膚彈性原本就好，所以受試前后皮膚彈性增加效果不太明顯。這可能提示，年齡更大的人群服用口服美容營養(yǎng)粉后，皮膚彈性會(huì)有更為顯著的改善。

作者簡介：孫明紅，學(xué)士學(xué)位，主要研究方向?yàn)楣δ苄允称?、保健食品、運(yùn)動(dòng)營養(yǎng)等產(chǎn)品開發(fā)以及營養(yǎng)成分配伍之間的協(xié)同性。