李 娟，闕延福，徐 林，朱 濱，廉 浩，王 理，喬 曄

(1.水利部中國科學(xué)院水工程生態(tài)研究所，水利部水工程生態(tài)效應(yīng)與生態(tài)修復(fù)重點實驗室，武漢 430079；2.湖北中水長江生態(tài)保護(hù)研究院有限公司，武漢 430079；3.廣西大藤峽水利樞紐開發(fā)有限責(zé)任公司，廣西桂平 537200)

魚類早期生活史階段是其對外界環(huán)境最敏感的時期，也是死亡高峰時期。其中仔魚開口攝食的階段為仔魚由內(nèi)源性營養(yǎng)轉(zhuǎn)向外源性營養(yǎng)的階段，這個時期在魚類早期生活史中非常重要[5，6]。所以，在混合營養(yǎng)階段選擇適口性好且營養(yǎng)全面的開口餌料直接決定規(guī)模化育苗培育的成敗[7]。而轉(zhuǎn)食是魚類在人工養(yǎng)殖過程中在其早期生活史階段的必經(jīng)過程，即早期仔稚魚由攝食生物活餌料完全轉(zhuǎn)食配合飼料的過程。在早期仔魚進(jìn)入外源性營養(yǎng)階段開始，用人工飼料代替生物餌料的可能性已經(jīng)有相關(guān)研究[8，9]，但從開口攝食開始就能完全代替生物活餌的人工飼料很少報道。

開展魚類早期生活史研究可以為魚苗培育提供重要的技術(shù)指導(dǎo)，開口餌料、轉(zhuǎn)食策略是影響仔魚生長、存活的重要因子[10，11]。且在苗種培育階段選擇最適開口餌料及轉(zhuǎn)食策略可以保證苗種的成活率[12-14]。目前，對烏原鯉的研究有人工繁殖、胚胎發(fā)育、精子活力、表型性狀及繁殖力、耗氧率與臨界窒息點等方面[15-18]。未發(fā)現(xiàn)對烏原鯉仔魚不同開口餌料及轉(zhuǎn)食策略有相關(guān)報道。本研究旨在探討不同開口餌料對烏原鯉仔魚生長、存活的影響，為烏原鯉仔魚開口餌料的選擇、轉(zhuǎn)食策略的方式及苗種培育提供理論依據(jù)，也為烏原鯉資源養(yǎng)護(hù)和人工增殖提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗用魚

2021年3月，在廣西壯族自治區(qū)來賓市紅水河魚類保護(hù)增殖站對烏原鯉親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)，干法受精獲得受精卵，在循環(huán)水系統(tǒng)中流水孵化獲得仔魚。選用烏原鯉初孵仔魚，全長(7.03±0.10)mm，體長(6.69±0.03)mm。

1.1.2 實驗餌料

仔魚開口餌料選擇豐年蟲、熟蛋黃、微粒子飼料。豐年蟲為皇冠大紅卵，微粒飼料為山東升索漁用飼料研究中心研發(fā)的魚苗專用微粒子配合飼料(S1#)。轉(zhuǎn)食策略中實驗餌料選擇豐年蟲、微粒子飼料、水蚯蚓。具體主要營養(yǎng)成分如表1。

表1 不同餌料的主要營養(yǎng)成分Tab.1 Main nutrition components of different diets %

1.2 實驗方法

1.2.1 不同開口餌料實驗

目前許多縣水行政執(zhí)法隊伍裝備相對落后，專用車輛常被挪作他用，辦案裝備不能及時配備和更新。專職的水行政執(zhí)法人員中具有專業(yè)水利技術(shù)職稱或法律專業(yè)知識的人員很少，知識結(jié)構(gòu)欠缺。一些縣執(zhí)法網(wǎng)絡(luò)不完善，水行政執(zhí)法難以有效開展。

分為蛋黃、豐年蟲、人工微粒飼料3種不同開口餌料投喂組，每組設(shè)置3個平行。選用5日齡烏原鯉魚苗置于培育框(120 cm×100 cm×50 cm)中培育，培育框固定在循環(huán)水養(yǎng)殖缸內(nèi)。取同批次4日齡仔魚，每框隨機(jī)放養(yǎng)200尾。實驗周期為15 d。實驗選取烏原鯉5、10、15、20日齡不同開口餌料魚苗進(jìn)行生長指標(biāo)測量，并記錄魚苗死亡尾數(shù)。

每日8：00、12：00、16：00、20：00分別進(jìn)行投喂，每日吸污，實驗期間采用YSI水質(zhì)分析儀記錄水體理化參數(shù)，水溫維持在22～25 ℃，氨氮含量處于安全范圍，溶解氧>6.0 mg/L。

1.2.2 轉(zhuǎn)食策略實驗

選用5日齡烏原鯉魚苗置于循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中的養(yǎng)殖缸中培育，在養(yǎng)殖缸中設(shè)置小網(wǎng)箱。依據(jù)轉(zhuǎn)食策略不同，共設(shè)計T20水蚯蚓組、T20微粒子組、T35水蚯蚓組、T35微粒子組4個實驗組和1個對照組。每組2個重復(fù)，每個重復(fù)100尾健康烏原鯉幼苗。對照組整個實驗期間只投喂豐年蟲；T20水蚯蚓組用豐年蟲開口15 d后轉(zhuǎn)食投喂水蚯蚓30 d；T20微粒子組用豐年蟲開口15 d后轉(zhuǎn)食投喂微粒子飼料30 d；T35水蚯蚓組用豐年蟲開口30 d后轉(zhuǎn)食投喂水蚯蚓15 d；T35微粒子組用豐年蟲開口30 d后轉(zhuǎn)食投喂微粒子飼料15 d。

每組隨機(jī)挑選10尾幼苗，測量全長(精確到0.5 mm)、體長(精確到0.5 mm)、體質(zhì)量(精確到0.000 1 g)、死亡數(shù)量等數(shù)據(jù)。實驗期間采用YSI水質(zhì)分析儀記錄水體理化參數(shù)，水溫維持在22～27 ℃，氨氮含量處于安全范圍，溶解氧>6.0 mg/L。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用EXCEL2019進(jìn)行常規(guī)計算后，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析實驗數(shù)據(jù)，各實驗組間差異顯著性利用單因素方差分析(One-way ANOVA)檢驗，顯著性檢驗采用Duncan′s multiplerange test法比較，P<0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示。

1.4 計算公式

仔魚生長特性以特定生長率(SGR)描述：

SGR=100%×(lnWt-lnW0)/t

K=(W/L3)×100

其中：SGR為特定生長率(%/d)，W0和Wt分別為初始體質(zhì)量和培育td后的體質(zhì)量(g)，t為實驗時間(d)；K為魚體肥滿度，W為魚體體質(zhì)量(g)，L為魚體體長(mm)。

2 結(jié)果

2.1 不同開口餌料對仔魚生長的影響

2.1.1 對全長、體長和體質(zhì)量的影響

不同開口餌料的仔魚全長變化如表2所示。仔魚5日齡開始投喂后5 d內(nèi)蛋黃組全長增長最慢，微粒子組、豐年蟲組仔魚全長差異不顯著。投喂10 d后，豐年蟲組增長最快，其次為微粒子飼料組。在實驗周期內(nèi)，蛋黃組仔魚全長增長速度最慢，豐年蟲組仔魚全長增長速度最快。在投喂10 d至實驗結(jié)束，豐年蟲組仔魚全長顯著高于微粒子組和蛋黃組，存在差異顯著。對烏原鯉仔魚體長影響與全長基本一致，僅在投喂5 d后存在差異，豐年蟲組體長增長最快，與微粒子組差異不顯著，與蛋黃組差異顯著。

表2 不同開口餌料下烏原鯉仔魚的生長指標(biāo)Tab.2 Growth indexs of P.merus larvae under different initial feeding

不同開口餌料對各組仔魚體質(zhì)量影響均隨日齡增長而增長，但三組仔魚體質(zhì)量增長速度存在差異。在投喂5 d(10日齡)，豐年蟲組增長最快，與微粒子組和蛋黃組存在顯著差異。該趨勢一直持續(xù)到實驗結(jié)束(20日齡)，且差異越來越顯著。在此期間，微粒子組與蛋黃組烏原鯉仔魚的體質(zhì)量存在顯著性差異。

2.1.2 對SGR的影響

不同開口餌料組仔魚SGR隨著實驗時間延長，整體開始下降并表現(xiàn)出一定的差異。5～10日齡，豐年蟲組仔魚SGR顯著高于微粒子組和蛋黃組；10～15日齡，豐年蟲組仔魚SGR最高，為(8.24±3.56)%/d，且與微粒子組差異不顯著，與蛋黃組差異顯著，SRG最低，為(-0.63±2.49)%/d(圖1)。

圖1 不同開口餌料下烏原鯉仔魚特定生長率變化Fig.1 Specific growth rate of P.merus larvae under different initial feeding同日齡肩標(biāo)字母不同表示有顯著差異性(P<0.05)。

2.1.3 對存活率的影響

烏原鯉仔魚從5日齡開始投喂至20日齡，在實驗過程中，未出現(xiàn)非正常的大量死亡現(xiàn)象。不同開口餌料組對烏原鯉仔魚存活率存在一定差異。實驗結(jié)束時(20日齡)，存活率最高是豐年蟲組，為(90.50±1.32)%，實驗中一直高于且與其他2組存在顯著差異；其次是微粒子組，為(86.50±1.32)%；蛋黃組存活率最低，為(60.83±1.76)%，實驗結(jié)束時，與微粒子組存活率存在顯著性差異(表3)。

表3 不同開口餌料下烏原鯉仔魚存活率Tab.3 Survival rate of P.merus larvae under different initial feeding %

2.1.4 對仔魚肥滿度的影響

投喂5 d，開始統(tǒng)計各實驗組的仔魚肥滿度指標(biāo)。從表4實驗結(jié)果看，10日齡時豐年蟲組烏原鯉仔魚肥滿度最高，其次為微粒子組，蛋黃組最低，三組間不存在顯著性差異。15日齡時，豐年蟲組仔魚肥滿度持續(xù)最高，其次為微粒子組，最低為蛋黃組，其中豐年蟲組仔魚肥滿度顯著高于蛋黃組，與微粒子不存在顯著性差異。實驗結(jié)束(20日齡 )時，豐年蟲組仔魚肥滿度顯著高于微粒子組與蛋黃組，微粒子組與蛋黃組仔魚肥滿度存在顯著差異。

2.2 不同轉(zhuǎn)食策略對稚魚的影響

不同轉(zhuǎn)食策略對烏原鯉稚魚全長、體長、體質(zhì)量、存活率和SGR的影響見表5。在全長方面，T35水蚯蚓組的全長顯著高于T20水蚯蚓組、T35微粒子組、T20微粒子組、對照組，存在顯著差異。在體長方面，T35水蚯蚓組生長最快，為(19.14±0.29)mm，其次為T20水蚯蚓組，為(18.29±0.42)mm，再次是T35微粒子組，為(17.55±0.23)mm，最低為對照組，僅(16.83±0.51)mm。在體質(zhì)量上，在45 d實驗結(jié)束時，T35水蚯蚓組生長最快，體質(zhì)量達(dá)(0.159 7±0.014 7)g，與其余實驗組體質(zhì)量差異顯著，其余實驗組間體質(zhì)量差異不顯著。對存活率的影響，在實驗過程中，未出現(xiàn)非正常大量死亡現(xiàn)象。實驗結(jié)束時，不同轉(zhuǎn)食策略實驗組存活率存在明顯差異。T35水蚯蚓組仔魚存活率最高(87.25±1.25)%，與對照組(83.25±2.25)%、T20水蚯蚓組(84.75±0.75)%差異不顯著，與T20微粒子組差異顯著。不同的轉(zhuǎn)食策略下，各組SGR表現(xiàn)出一定差異。T35水蚯蚓組SGR為(8.10±0.83)%/d，顯著高于其余轉(zhuǎn)食組；其次是T35微粒子組SGR為(7.34±0.40)%/d，與T35微粒子組、T20水蚯蚓、T20微粒子組差異不顯著；對照組SGR最低，為(6.88±0.73)%/d。

表5 不同轉(zhuǎn)食策略下烏原鯉仔稚魚的生長指標(biāo)、存活率和SGRTab.5 Growth indexes and survival rate of P.merus in larvae、juvenile and SGR under different weaning strategies

3 討論

3.1 不同開口餌料對烏原鯉仔魚生長和存活率的影響

本研究結(jié)果表明豐年蟲組的烏原鯉仔魚生長指標(biāo)、成活率顯著優(yōu)于微粒子組、蛋黃組。豐年蟲組烏原鯉仔魚在實驗過程中保持較快的生長，較高的存活率；而微粒子組在10日齡前，全長、體長、肥滿度與豐年蟲組未出現(xiàn)顯著差異，但體重、存活率等指標(biāo)與豐年蟲組顯著差異，隨著投喂時間延長，生長速度變慢，各指標(biāo)均與豐年蟲組出現(xiàn)顯著差異，這說明隨著開口時間延長人工配合飼料不能滿足仔魚生長需要。在實驗中蛋黃組投喂5日后，烏原鯉仔魚體長、體重、特定生長率均與豐年蟲組出現(xiàn)顯著差異，表明蛋黃不適合烏原鯉仔魚作為長期的開口餌料。實驗結(jié)束時(投喂15日)，蛋黃組烏原鯉仔魚生長指標(biāo)均顯著低于豐年蟲組、微粒子組，存活率僅(60.83±1.76)%，特定生長率甚至低于0，出現(xiàn)負(fù)增長(圖1)。這與葉繼丹等[21]對中華鱘(Acipensersinensis)、吳興兵等[22]對四川裂腹魚(SchizothoraxkozloviNikolsky)、王萬良等[23]對黑斑原鮡(Glyptosternummaculatum)、易建華[24]對胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)的開口餌料研究結(jié)果一致，就單一開口餌料來說，投喂天然餌料優(yōu)于配合飼料。主要原因可能是在自然水體中，烏原鯉屬于雜食性魚類，以小型螺螄、蚌類、蜆類為主，而蛋黃的營養(yǎng)物質(zhì)相較于豐年蟲和微粒子飼料較為單一，無法滿足烏原鯉仔魚長期生長發(fā)育的需求，造成較高的死亡率和生長緩慢。因此，本研究結(jié)果表明在烏原鯉仔魚開口階段，投喂豐年蟲能滿足仔魚生長發(fā)育需要，同時保證較高的存活率。

3.2 不同轉(zhuǎn)食策略對烏原鯉仔稚魚生長和存活率的影響

根據(jù)郭忠娣等[9]對胭脂魚、HAMLIN等[25]對黑線鱈(Melanogrammusaeglefinus)和BASKERVILLE-BRIDGES等[26]對太平洋鱈(Gadusmacrocephalus)的研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)食開始的時間不同會顯著影響到魚苗轉(zhuǎn)食期的生長和存活以及魚苗是否能夠成功攝食配合飼料，過早轉(zhuǎn)食飼料會影響仔魚對食物的消化，造成消極影響，過晚轉(zhuǎn)食飼料則會造成養(yǎng)殖成本的浪費。本實驗也證實了不同轉(zhuǎn)食起點的各組烏原鯉魚苗生長和存活存在一定的差異。各組魚苗的存活率中15日齡轉(zhuǎn)食微粒子組最低，對照組、15日齡轉(zhuǎn)食水蚯蚓組、30日齡轉(zhuǎn)食微粒子組存活率差異不顯著，30日齡轉(zhuǎn)食水蚯蚓組存活率最高。T20微粒子組與T35微粒子組隨著轉(zhuǎn)食飼料時間延后，轉(zhuǎn)食后體重、體長、特定生長率、存活率有所增大，分析原因可能為仔、稚魚消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，對人工配合飼料消化能力弱；較早開始投喂飼料部分仔、稚魚未適應(yīng)人工飼料，導(dǎo)致較高的死亡率。而在投喂開口餌料豐年蟲后轉(zhuǎn)食水蚯蚓能大大提高仔、稚魚的體重、體長、特定生長率、存活率等指標(biāo)，但由于水蚯蚓體內(nèi)富集大量致病菌、有機(jī)磷、有機(jī)氯和重金屬等毒害物質(zhì)，會導(dǎo)致幼魚階段某些疾病發(fā)生，需要在投喂前做好消毒工作。

4 結(jié)論

本次實驗結(jié)果表明，烏原鯉仔魚開口階段豐年蟲為最佳的開口餌料，投喂豐年蟲能滿足仔魚生長發(fā)育需要，同時保證較高的存活率。轉(zhuǎn)食策略中延后轉(zhuǎn)食時間起點和轉(zhuǎn)食水蚯蚓，烏原鯉仔稚魚的全長、體長、體重有增大趨勢，本實驗中30日齡 轉(zhuǎn)食水蚯蚓效果最佳。