顧冬花

（青海省大通縣畜牧獸醫(yī)站，青海 大通 810100）

包蟲病又名棘球蚴病，是由寄生于犬、狼、狐等肉食動(dòng)物小腸內(nèi)的棘球絳蟲的中絳期幼蟲—棘球蚴感染中間宿主而引起的一種人畜共患病。該病在全球范圍內(nèi)廣泛傳播，是嚴(yán)重危害人畜健康的寄生蟲病，不但阻礙畜牧業(yè)生產(chǎn)發(fā)展，而且還嚴(yán)重影響人類的身體健康。本病有人類“第二癌癥”之稱[1]，危害嚴(yán)重。包蟲病在許多國(guó)家導(dǎo)致嚴(yán)重公共衛(wèi)生問(wèn)題和經(jīng)濟(jì)損失，包蟲病在我國(guó)西北大部分地區(qū)已達(dá)到了較高的流行水平[2]，主要流行于青海、甘肅、四川、新疆、西藏、內(nèi)蒙等西部地區(qū)的七個(gè)?。ㄗ灾螀^(qū)）的牧區(qū)和半牧區(qū)[3]。農(nóng)業(yè)部、衛(wèi)生部等十四個(gè)部委聯(lián)合印發(fā)了《防治包蟲病行動(dòng)計(jì)劃（2016-2020》，這是多個(gè)部委針對(duì)于單一疫病提出防治計(jì)劃的首例。2020年青海省對(duì)包蟲病防治又提出了新的計(jì)劃和要求。

青海省西寧市大通縣地處青海省東部農(nóng)業(yè)區(qū)北部，屬省會(huì)西寧市轄縣，全縣總面積3090 km2，轄20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，共41萬(wàn)人，物產(chǎn)資源豐富，可利用草場(chǎng)1.56×105hm2，林地面積103 hm2，森林覆蓋率26.4%，自然環(huán)境多樣性，經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)地域差異較大，外川片區(qū)長(zhǎng)寧鎮(zhèn)和橋頭鎮(zhèn)以工業(yè)、農(nóng)業(yè)為主；東峽鎮(zhèn)和城關(guān)鎮(zhèn)以農(nóng)業(yè)、牧業(yè)為主。畜牧業(yè)的收入在本縣占較高的比例，有的地區(qū)畜牧業(yè)收入遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了其他收入成為主要經(jīng)濟(jì)來(lái)源。據(jù)徐海撫等[4]測(cè)定，在同等飼養(yǎng)條件下，由于棘球蚴病的感染造成綿羊體重下降3.01 kg、羊毛產(chǎn)量下降0.2 kg。因此，加強(qiáng)包蟲病防治對(duì)于促進(jìn)畜牧業(yè)穩(wěn)定發(fā)展，保障人體健康，維護(hù)公共衛(wèi)生安全尤為重要。大通縣自2015年以來(lái)，通過(guò)對(duì)家畜包蟲病感染情況的調(diào)查和終末宿主陽(yáng)性率的檢測(cè)，基本掌握了本縣家畜、犬及人包蟲病感染情況，為今后進(jìn)一步防治包蟲病提供了數(shù)據(jù)參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設(shè)備 37 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱、酶標(biāo)儀均購(gòu)自上海捷呈實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;12道微量移液器、單道微量移液器購(gòu)自大龍儀器有限公司。

1.1.2 檢測(cè)試劑 包蟲病犬糞抗原檢測(cè)間接ELISA試劑盒購(gòu)自深圳康百得生物科技有限公司。

1.1.3 樣品來(lái)源 4084份犬糞樣品均隨機(jī)采自散養(yǎng)戶家中驅(qū)蟲后新鮮犬糞，于2016-2022年春秋兩季集中檢測(cè)時(shí)間，樣品采完后立即送到實(shí)驗(yàn)室，-70 ℃ 滅活1周后開(kāi)始檢測(cè)。

1.2 方法

1.2.1 抽樣方法 （1）中間宿主調(diào)查。每年利用牛、羊屠宰季，對(duì)全縣不同區(qū)域屠宰牛羊剖檢臟器（被檢臟器有肝、肺、腎、脾以及胃腸），在屠宰過(guò)程中隨機(jī)抽樣檢查，主要以眼觀、觸摸、切片的方法，計(jì)算感染牛羊陽(yáng)性數(shù)和陽(yáng)性率。（2）人員感染調(diào)查。根據(jù)縣衛(wèi)生健康委員會(huì)的反饋，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院按照片區(qū)進(jìn)行B超篩查，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)告需省級(jí)衛(wèi)生部門進(jìn)行復(fù)診，最后根據(jù)診斷結(jié)果進(jìn)行手術(shù)或藥物治療，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院工作人員對(duì)患者進(jìn)行跟蹤回訪，隨時(shí)掌握治療情況。（3）終末宿主調(diào)查。對(duì)犬采用犬糞抗原檢測(cè)，每年5月、10月集中采樣檢測(cè)2次，檢測(cè)方法采用間接ELISA法，對(duì)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的樣品，剖檢采樣犬，進(jìn)一步確診檢測(cè)結(jié)果。

1.2.2 檢測(cè)方法與結(jié)果判定 （1）洗滌液配制。用蒸餾水或去離子水將洗滌液按1:10稀釋，充分混勻即為工作濃度洗滌液。（2）樣品稀釋液配制。用蒸餾水或去離子水將洗滌液按1:1稀釋，充分混勻即為工作濃度樣品稀釋液。（3）樣品處理。犬糞樣品需要預(yù)先低溫（-70 ℃ 以下）冷凍7 d以上，以滅活蟲卵。稱取1 g犬糞，加入1 mL工作濃度樣品稀釋液，充分?jǐn)嚢杌炀o止10 min，再3000 rpm離心10 min，取上清液待檢。（4）加樣反應(yīng)。樣品孔，每孔加入100 uL待檢樣品；陰性對(duì)照兩孔，每孔僅加100 uL陰性樣品；陽(yáng)性對(duì)照兩孔，每孔僅加100 uL陽(yáng)性樣品。蓋好封板膜，37 ℃ 避光反應(yīng)30 min。（5）洗板。甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作濃度洗滌液洗板6次，每次均需靜止1 min；最后一次甩凈，拍干。（6）加酶反應(yīng)。每孔加酶結(jié)合物100 uL，蓋好封板膜，37 ℃ 避光反應(yīng)30 min。甩去孔內(nèi)液體，如上洗板，拍干。（7）顯色反應(yīng)。按所需用量，臨用前取等體積底物和顯色劑充分混勻后每孔加100 uL，蓋好封板膜，37 ℃ 避光反應(yīng)10 min。（8）終止反應(yīng)。加終止液50 uL，用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下，讀取OD值。（9）參考值。COV=陰性對(duì)照平均OD值×2.1（陰性對(duì)照孔OD值＜0.15時(shí)按0.15計(jì)）。陰性對(duì)照孔OD值≤0.3（若大于0.3則實(shí)驗(yàn)無(wú)效）；陽(yáng)性對(duì)照孔OD值≥0.5（若小于0.5則實(shí)驗(yàn)無(wú)效）。結(jié)果判定：樣品OD值≥COV，判為包蟲抗原陽(yáng)性；樣品OD值＜COV，判為包蟲抗原陰性。

2 結(jié)果

2.1 牛、羊、犬包蟲病感染情況調(diào)查結(jié)果

2015年牛羊棘球蚴感染較為嚴(yán)重，感染主要在肝臟，其次肺臟（經(jīng)調(diào)查這部分屠宰羊主要來(lái)自海晏縣），牛的感染率為8%，羊感染率為16.67%。2016年牛的感染率為0.99%，羊感染率為7.43%。2017年牛的感染率為0，羊感染率為0.74%，感染強(qiáng)度為3.35%。2018年牛的感染率為0，羊感染率為0.65%，感染強(qiáng)度為1.56%。從2019年至2022年牛羊調(diào)查結(jié)果均為陰性。牛羊兩者的感染強(qiáng)度相比，羊的感染率高于牛的感染率，這與羊分布區(qū)域有關(guān)，2015年檢查的陽(yáng)性牛中4頭來(lái)自海南州，2016年調(diào)查的羊大部分來(lái)自海晏縣。從此表1可見(jiàn)牛羊感染率每年逐漸下降，說(shuō)明大通縣牛羊包蟲病防控已取得一定成效。

表1 牛、羊、犬包蟲病感染情況調(diào)查結(jié)果

2.2 犬糞抗原檢測(cè)結(jié)果

犬糞抗原檢測(cè)2015年699份，陽(yáng)性率12.3%；2016年1093份，陽(yáng)性率13.4%；2017年556份，陽(yáng)性率9.9%；2018年551份，陽(yáng)性率3.4%；2019年622份，陽(yáng)性率2.7%；2020年569份，陽(yáng)性率3.5%；2021年513份，陽(yáng)性率1.6%，2022年180份，陽(yáng)性率3.3%。糞抗原陽(yáng)性率呈逐年下降趨勢(shì)，犬剖檢74只，犬下水99付，結(jié)果均為陰性。

2.3 人包蟲病感染情況調(diào)查結(jié)果

人包蟲病2016-2021年共調(diào)查464807人，陽(yáng)性患者58人，其中藥物治療40人，手術(shù)治療29人（表2）。2016年調(diào)查310428人，陽(yáng)性患者6人；2017年調(diào)查68373人，陽(yáng)性患者19人；2018年調(diào)查73621人，陽(yáng)性患者15人；2019年調(diào)查2018人，患者6人；2020年調(diào)查4160人，患者7人；2021年調(diào)查6207人，患者5人。這6年調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，人的感染率有所上升，各級(jí)部門要引起高度重視。

表2 人感染情況調(diào)查

3 討論與結(jié)論

就以上調(diào)查結(jié)果而言，大通縣中間畜主牛羊和人包蟲病均有不同程度感染，雖然感染率較低，但包蟲病防控任務(wù)依然很艱巨，今后工作中應(yīng)繼續(xù)按照上級(jí)業(yè)務(wù)部門的防控要求，完成犬驅(qū)蟲、糞抗原檢測(cè)、犬剖檢、牛羊剖檢等工作要求，同時(shí)針對(duì)不同宿主對(duì)該病的傳播途徑開(kāi)展不同防控措施。（1）人的感染主要是對(duì)包蟲病知識(shí)了解少，缺乏防護(hù)意識(shí)，因此，針對(duì)不同人群加強(qiáng)健康教育、宣傳培訓(xùn)，普及包蟲病防控知識(shí)，提高全民的防范意識(shí)，根除以感染病畜內(nèi)臟喂犬和亂拋的陋習(xí)。（2）本縣草山放牧牛羊及從海晏等外地調(diào)入的草山牛羊包蟲病感染率較高，主要是由于野生犬科動(dòng)物、放牧犬與牛羊形成反復(fù)循環(huán)感染的可能較大，因此，今后加強(qiáng)野生犬科動(dòng)物感染情況的調(diào)查，切斷傳播途徑，預(yù)防牛羊感染，對(duì)調(diào)入牛羊?qū)嵭袇^(qū)域化養(yǎng)殖。（3）加強(qiáng)屠宰檢疫，嚴(yán)格執(zhí)法，對(duì)檢出的患病臟器100%無(wú)害化處理，犬進(jìn)行拴養(yǎng)，實(shí)行定期驅(qū)蟲，月月投藥，驅(qū)蟲后5 d糞便無(wú)害化處理，預(yù)防家犬與牛羊間的循環(huán)感染，逐步從各個(gè)環(huán)節(jié)根除包蟲病的存在，最終實(shí)現(xiàn)包蟲病凈化。