李琳 趙寒冬 楊金生 袁陸 劉云志 劉沂霖 苑冬梅

摘 要：鵝星狀病毒是引起雛鵝痛風(fēng)的主要原因，該病毒可以導(dǎo)致4～16日齡雛鵝發(fā)病和死亡，發(fā)病率和死亡率均達(dá)到50%以上。本文主要從鵝星狀病毒的分子生物學(xué)特征、發(fā)病機(jī)理、流行病學(xué)、病毒分離和鑒定、治療、預(yù)防和控制等方面進(jìn)行了綜述，希望對(duì)該病毒今后的研究、防控提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：鵝星狀病毒；分子生物學(xué)；發(fā)病機(jī)理；分離與鑒定；預(yù)防

中圖分類號(hào)：S858.335.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-1085（2023）09-0060-04

1? 星狀病毒簡(jiǎn)介

Madeley和Cosgrove（1975年）最早報(bào)道了星狀病毒，他們?cè)谟?guó)蘇格蘭患腸炎的嬰兒糞便中用電鏡觀察到一種圓形的病毒小顆粒，整個(gè)粒子呈星狀結(jié)構(gòu)[1]。1980年，McNulty等[2]首次從下痢和死亡的11日齡火雞雛的腸內(nèi)容物中鑒定出星狀病毒。國(guó)際病毒分類委員會(huì)ICTV（http：//www.iah-virus.org/astroviridae/）將星狀病毒分為2個(gè)屬，哺乳動(dòng)物星狀病毒屬和禽星狀病毒屬（Avastrovirus），其中禽星狀病毒分為禽星狀病毒1型、2 型和3型。2010年，ICTV將鵝星狀病毒（GoAstV）歸屬于禽星狀病毒3型（AAstV-3）。該病引起雛鵝痛風(fēng)，以心包、肝、腎臟等內(nèi)臟以及關(guān)節(jié)出現(xiàn)大量尿酸鹽為主要特征，可使4～16日齡雛鵝發(fā)病和死亡，發(fā)病率和死亡率達(dá)到80%和50%，2016年首次在中國(guó)發(fā)現(xiàn)[3]，目前在我國(guó)沿海省份（福建、江蘇、浙江、廣東等）、遼寧、黑龍江和內(nèi)蒙古等區(qū)域均發(fā)現(xiàn)該病，并在一些地區(qū)流行。鵝星狀病毒病是近幾年養(yǎng)鵝業(yè)新發(fā)疫病之一，研究處于初級(jí)階段，致病機(jī)理尚不明確，本文從分子生物學(xué)特征、發(fā)病機(jī)理和流行病學(xué)、分離鑒定及治療等方面對(duì)鵝星狀病毒進(jìn)行綜述，希望給科研工作者帶來(lái)一定的幫助，減少該病對(duì)水禽養(yǎng)殖帶來(lái)的嚴(yán)重?fù)p失。

2? 分子生物學(xué)特征

星狀病毒是一種無(wú)囊膜、單股正鏈RNA病毒[4]，直徑為25～35 nm。在電子顯微鏡下，典型的星狀病毒粒子呈細(xì)小的圓形結(jié)構(gòu)，病毒表面有5個(gè)或6個(gè)星狀突起，呈20面體對(duì)稱。鵝星狀病毒基因組由一個(gè)5′非翻譯區(qū)（UTR）、三個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORFs：ORF1a、ORF1b和ORF2）、一個(gè)3′UTR和一個(gè)多聚腺苷酸（Poly A）尾組成，長(zhǎng)度約為7.2 kb。多數(shù)哺乳動(dòng)物的星狀病毒ORF1a和ORF1b位于相同的＋1讀框，ORF1b位于＋2讀框，而禽星狀病毒基因組差異則相對(duì)較大。星狀病毒5′非翻譯區(qū)（UTR）相對(duì)較短，長(zhǎng)10～85 nt。ORF1a、ORF1b和ORF2具有長(zhǎng)度多樣性，這種多樣性可能與ORF1a 3′端基因片段的插入或缺失有關(guān)[5]。星狀病毒ORF1a和ORF1b閱讀框之間存在重疊區(qū)域，禽星狀病毒重疊區(qū)域則為12～45nt。高變區(qū)編碼衣殼蛋白位于病毒粒子的外表面，能夠形成纖突（capsid spike）結(jié)構(gòu)，參與細(xì)胞表面相關(guān)受體的識(shí)別及機(jī)體的免疫應(yīng)答[6-7]。目前研究人員將鵝星狀病毒分成GAstV Ⅰ和GAstV II兩個(gè)基因型[8]，且都能引起鵝痛風(fēng)的臨床癥狀。鵝星狀病毒基因組結(jié)構(gòu)[9]見(jiàn)圖1。

3? 發(fā)病機(jī)理和流行病學(xué)

從患病雛鵝的腎、脾、肝等內(nèi)臟器官中均可分離出鵝星狀病毒，其中腎臟檢出率最高，且腎臟病變最明顯，主要表現(xiàn)為出血和腫大。研究表明，鵝星狀病毒通過(guò)糞-口途徑自然傳播，也可以垂直傳播，用GAstV接種種母鵝后，能夠從感染種鵝所產(chǎn)種蛋孵出的鵝胚的卵黃膜、胚胎和尿囊液中檢測(cè)到病毒RNA，且在傳播過(guò)程中可以跨物種傳播，感染雞、鴨，且感染后臨床癥狀與鵝相似，包括拉白色糞便、食欲不振、抑郁、嗜睡，感染后4～5 d后死亡。在人工感染試驗(yàn)中，1～15日齡的雛鵝易感，感染后導(dǎo)致雛鵝生長(zhǎng)抑制，嚴(yán)重的內(nèi)臟尿酸沉積，甚至死亡。相比之下，25～35日齡的雛鵝，感染后癥狀較輕[10]。雛鵝發(fā)生痛風(fēng)可能是條件性的，嚴(yán)重的痛風(fēng)一般都伴隨著其他病原體混合感染，但這需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。因此，在家禽的養(yǎng)殖過(guò)程中，有許多因素可誘發(fā)痛風(fēng)癥狀，星狀病毒感染是其中一個(gè)關(guān)鍵因素。

4? 病毒的分離與鑒定

對(duì)9～11日齡無(wú)特定病原體的健康SPF鵝胚尿囊腔接種分離、增殖該病毒，48 h照蛋一次，棄去死亡胚，留存48 h后死亡的鵝胚，之后24 h照蛋2次，記錄死亡情況，并采集48～168 h內(nèi)死亡鵝胚的尿囊液，保存胚胎和尿囊膜，并觀察是否有病變，該病毒盲傳4～5代后對(duì)胚胎[11，12]的致死率可達(dá)100%。但目前SPF鵝胚不易獲得，科研工作者正在嘗試采用SPF雞胚、鴨胚或細(xì)胞系進(jìn)行病毒分離，有報(bào)道GoAstV已從雞胚、雞肝癌細(xì)胞（LMH）、雞胚成纖維細(xì)胞（DF-1）和鵝胚腎細(xì)胞[13，14]中分離出來(lái)，但大多數(shù)鵝星狀病毒并不適應(yīng)雞、鴨胚和細(xì)胞系，目前還沒(méi)有較好的實(shí)驗(yàn)室增殖系統(tǒng)，這使得對(duì)GAstV的研究十分困難。

目前，免疫電鏡（IEM）技術(shù)是鑒定糞便和腸道樣品中星狀病毒的首選方法。采用該方法是通過(guò)免疫電鏡發(fā)現(xiàn)典型的星狀病毒顆粒聚集體。隨著分子診斷技術(shù)快速發(fā)展，建立的逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）[15]、基于taqman的一步實(shí)時(shí)RTPCR檢測(cè)[16]和real實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)[17]、逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增[18]等方法已被用于GoAstV的快速檢測(cè)。

5? 治療、預(yù)防和控制

該病迄今沒(méi)有有效的化學(xué)治療藥物、疫苗或其他方法控制和預(yù)防鵝星狀病毒感染，只能通過(guò)嚴(yán)格的生物安全防控降低GoAstV感染。哺乳動(dòng)物星狀病毒對(duì)滅活劑的滅活作用有很強(qiáng)的抵抗力，同樣，其他的星狀病毒又很穩(wěn)定，并且對(duì)酸性、氯仿、多種去垢劑、熱、室溫和脂溶劑等的滅活作用有抗性[19] 。Kurtz[20]證實(shí)，星狀病毒對(duì)大多數(shù)醇類有抗性，但90%的甲醇能滅活純化的星狀病毒和糞便中的星狀病毒。及早發(fā)現(xiàn)病雛鵝，并分群飼養(yǎng)，加強(qiáng)引種、日常飼養(yǎng)管理及不同時(shí)期營(yíng)養(yǎng)平衡的飼料投喂還是十分必要的！

5? 小結(jié)

鵝星狀病毒近年剛剛在我國(guó)出現(xiàn)，長(zhǎng)期被人們忽視，給養(yǎng)殖場(chǎng)（養(yǎng)殖戶）造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。雖然高蛋白飼料可引起鵝痛風(fēng)病的發(fā)生，但鵝星狀病毒才是鵝痛風(fēng)病發(fā)生的主要原因。弄清該病毒的發(fā)病機(jī)制、自然宿主和實(shí)驗(yàn)宿主，研制出制備方法簡(jiǎn)單且有效的疫苗是行之有效的方法，將從根本上解決鵝星狀病毒引起痛風(fēng)的問(wèn)題。

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Research Advances on Goose Astrovirus

LI Lin1，ZHAO Handong2，YANG Jinsheng1，YAN Lu1，LIU Yunzhi1，LIU Yilin1，YUAN Dongmei1

（1.Jilin Academy of Animal Science and Veterinary Science， Changchun? 130062， Jilin ， China;

2. Changchun Modern Agricultural Park， Changchun? 130117， Jilin ，China）

Abstract：? Goose astrovirus is the main cause of gout in goslings. The virus can cause morbidity and mortality of goslings aged 4 to 16 days， and the incidence rate and mortality rate are more than 50%. This article mainly reviews the molecular biological characteristics， pathogenesis， epidemiology， virus isolation and identification， treatment， prevention， and control of goose stellate virus， hoping to provide reference basis for future research and prevention and control of the virus.

Keywords：Goose astrovirus virus;Molecular biology;Pathogenesis; Separation and identification; Prevention