李晨夕

（洛陽市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南 洛陽 471000）

乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBⅤ）屬于環(huán)狀雙鏈DNA 病毒，可引起危害人類健康的肝臟傳染病，如慢性乙型肝炎[1]。乙型肝炎臨床可出現(xiàn)肝區(qū)痛、黃疸發(fā)熱等肝功能損害表現(xiàn)，部分患者出現(xiàn)乙型肝炎慢性化可發(fā)展為肝硬化[2]。全球約3.5 億HBⅤ感染者，而我國是HBⅤ感染高流行區(qū)，經(jīng)母嬰、血液、破損皮膚和黏膜等途徑傳播，嚴(yán)重影響人類健康[3-4]。因此正確選擇抗病毒治療時(shí)機(jī)是保證臨床治療獲得滿意療效的關(guān)鍵。

HBⅤ-DNA 載量可決定HBⅤ復(fù)制水平，是判斷HBⅤ復(fù)制和傳染性的金標(biāo)準(zhǔn)，HBⅤ抗原在肝細(xì)胞復(fù)制后部分于肝細(xì)胞膜與致敏的T 淋巴細(xì)胞結(jié)合，HBⅤ的活躍復(fù)制是激發(fā)肝臟炎性反應(yīng)的因素之一，其水平越高，說明病毒復(fù)制水平越高，傳染性越強(qiáng)，因此HBⅤ-DNA 定性及定量監(jiān)測是臨床乙肝檢查重要項(xiàng)目。研究顯示血清AST 活性明顯增高可提示炎性病變的進(jìn)展性及慢性化[5-6]。中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值（NLR）主要表現(xiàn)二者平衡狀態(tài)，可更穩(wěn)定的反映機(jī)體炎癥狀態(tài)，是近年來新發(fā)現(xiàn)的炎癥指標(biāo)[7]。

因此本研究探討乙肝病毒載量與乙型肝炎患者AST 及NLR 的相關(guān)性，為提高臨床乙型肝炎患者診療水平提高參考。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性分析我院2021 年3 月至2022 年5 月檢查治療的114 例慢性乙型肝炎患者，其中男21例，女93 例，年齡20～55（31.67±6.27）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合2004 年《病毒性肝炎防治方案》中相關(guān)[8]診斷標(biāo)準(zhǔn)；6 m 內(nèi)未使用可對(duì)血細(xì)胞產(chǎn)生影響的藥物；年齡≥18 歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有嚴(yán)重肝腎等臟器功能不全者；合并其它炎癥類疾病者，如心肌炎、痛風(fēng)、鼻咽、咽炎等；免疫功能紊亂或伴有惡性腫瘤者；肝硬化或肝癌者。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（202102034），患者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 HBV-DNA 載量檢測及分組

采集乙型肝炎患者治療前空腹靜脈血6 mL至無菌管，4 mL 靜脈血經(jīng)3500 rpm 離心15 min分離血清，置于2～8℃冰箱待測。取1.5 mL 血清至滅菌離心管，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測HBⅤ-DNA 復(fù)制水平，血清樣本加樣，PCR 反應(yīng)液配置，采用醫(yī)用PCR 分析儀（宏石slan-96p）進(jìn)行定量分析，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

根據(jù) HBⅤ-DNA 載量不同將患者分為≤5×102copy·mL-1；5×102～1×104copy·mL-1；1×104～1×106copy·mL-1；＞1×106copy·mL-1四組。

1.2.2 AST、NLR 水平檢測

NLR、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶/血小板比值（γglutamyl-transpeptidase-to-platelet ratio，γ-GT/PLT，GPR ）、AST/ 血小板比值指數(shù)（ Aspartate aminotransferase to platelet ratio index，AST/PLT，APRⅠ）檢測采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（邁瑞6800plus）進(jìn)行計(jì)數(shù)分析。采用邁瑞cl-2000i 全自動(dòng)生化檢測儀檢測血清AST 水平。乙型肝炎患者經(jīng)臨床常規(guī)治療后復(fù)查，空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周靜脈血6 mL 檢測AST、NLR、HBⅤ-DNA 水平。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）記錄乙型肝炎患者治療前后AST、NLR、HBⅤ-DNA 水平；（2）觀察乙型肝炎患者年齡、性別、HBⅤ-DNA 載量與血清AST、NLR 水平的相關(guān)性。（3）比較不同HBⅤ-DNA 載量患者GPR、APRⅠ水平變化及乙肝五項(xiàng)陽性情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0 軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)分析。采用pearson相關(guān)性分析乙型肝炎患者不同病理特征與AST、NLR 水平的相關(guān)性。P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙型肝炎患者治療前后AST、NLR、HBⅤ-DNA 水平比較

本研究發(fā)現(xiàn)，乙型肝炎患者治療后血液中的AST、NLR、HBⅤ-DNA 濃度水平相較于治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體見表1。

表1 乙型肝炎患者AST、NLR、HBV-DNA 水平比較（±SD，n=114）

表1 乙型肝炎患者AST、NLR、HBV-DNA 水平比較（±SD，n=114）

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2.2 治療前乙型肝炎患者不同病理特征AST 水平分析

本研究發(fā)現(xiàn)，不同HBⅤ-DNA 載量乙型肝炎患者血液中的AST 濃度水平對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體見表2。

表2 治療前乙型肝炎患者不同病理特征AST 水平比較（±SD）

表2 治療前乙型肝炎患者不同病理特征AST 水平比較（±SD）

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2.3 治療前乙型肝炎患者不同病理特征NLR 水平分析

本研究發(fā)現(xiàn)，不同HBⅤ-DNA 載量的乙型肝炎患者血液中的NLR 水平對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體見表3。

表3 治療前乙型肝炎患者不同病理特征NLR 水平比較（±SD）

表3 治療前乙型肝炎患者不同病理特征NLR 水平比較（±SD）

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2.4 乙型肝炎患者HBⅤ-DNA 載量與AST、NLR水平變化的相關(guān)性分析

本研究發(fā)現(xiàn)，HBⅤ-DNA 的載量與乙型肝炎患者血液中的AST（r=0.547，P＜0.05）、NLR（r=0.606，P＜0.05）水平呈正相關(guān)性。具體表4。

表4 乙型肝炎患者HBV-DNA 載量與AST、NLR 水平變化的相關(guān)性分析

2.5 不同HBⅤ-DNA 載量患者GPR、APRⅠ水平變化

本研究發(fā)現(xiàn)，不同HBⅤ-DNA 載量乙型肝炎患者之間的GPR、APRⅠ水平對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體見表5。

表5 不同HBV-DNA 載量患者GPR、APRI 水平變化（±SD）

表5 不同HBV-DNA 載量患者GPR、APRI 水平變化（±SD）

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2.6 不同HBⅤ-DNA 載量患者乙肝五項(xiàng)陽性比較

本研究發(fā)現(xiàn)，不同HBⅤ-DNA 載量乙型肝炎患者治療前HBcAb、HBeAg、HBeAb、HBsAg 陽性率對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表6。

表6 不同HBV-DNA 載量患者治療前乙肝五項(xiàng)陽性率[n(%)]

3 討論

乙型病毒性肝炎病原為HBⅤ屬嗜肝DNA 病毒科，為雙鏈、環(huán)形、不完全閉合DNA 病毒，其存活能力強(qiáng)HBⅤ攜帶患者體液、血液均具有傳染性，因此全球約20 億人曾感染或正感染HBⅤ，其中約4 億患者為慢性感染者[1-4]。HBⅤ-DNA 載量可決定HBⅤ復(fù)制水平，是判斷HBⅤ復(fù)制和傳染性的金標(biāo)準(zhǔn)[2]。NLR 是機(jī)體炎癥狀態(tài)指征，在腫瘤疾病中患者血液NLR 水平的升高與患者機(jī)體炎癥狀態(tài)及預(yù)后密切相關(guān)。

肝臟主要負(fù)責(zé)氨基酸合成及糖、蛋白質(zhì)等物質(zhì)代謝，HBⅤ感染患者隨著病情發(fā)展出現(xiàn)肝臟受損，影響造血功能導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥，使致死率升高。AST 同工酶ASTs、ASTm 分別存在于心、肝、腎和骨骼肌細(xì)胞質(zhì)及線粒體中，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)血液中AST 含量升高，可提示乙型肝炎肝臟的廣泛損害及預(yù)后情況[5]。

本研究結(jié)果顯示AST、NLR、HBⅤ-DNA 水平在乙型肝炎患者治療后明顯下降，提示AST、NLR、HBⅤ-DNA 水平可反應(yīng)臨床治療效果及乙型肝炎患者治療預(yù)后情況。不同HBⅤ-DNA 乙型肝炎患者血清AST、NLR 水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且HBⅤ-DNA 與AST、NLR 水平呈正相關(guān)。上述結(jié)果說明AST 和中性粒細(xì)胞與肝臟炎癥活動(dòng)活動(dòng)程度及肝細(xì)胞損傷發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，AST、NLR 水平可有效反應(yīng)肝內(nèi)炎癥活動(dòng)，是診斷肝細(xì)胞損傷的重要指標(biāo)。本研究顯示不同HBⅤ-DNA 載量患者GPR、APRⅠ水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果提示HBⅤ-DNA 載量越多患者肝臟實(shí)質(zhì)損傷月嚴(yán)重。γ-GT 血清來源于肝膽，主要分布于肝細(xì)胞胞漿和肝內(nèi)膽管上皮，是在肝細(xì)胞正常代謝過程中產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物，主要用于診斷肝膽疾病及肝臟炎癥活動(dòng)的指標(biāo)。脾臟功能亢進(jìn)會(huì)導(dǎo)致血小板水平下降出現(xiàn)機(jī)制障礙，有研究顯示GPR 可以作為評(píng)估肝纖維化的有效指標(biāo)。而HBⅤ-DNA 復(fù)制活躍可激活肝臟炎癥反應(yīng)，伴隨肝臟炎癥活動(dòng)程度上升，炎癥細(xì)胞廣泛浸潤肝細(xì)胞導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，影響肝功能增生纖維組織，推進(jìn)乙型肝炎病情發(fā)展。乙肝五項(xiàng)指標(biāo)是診斷HBⅤ感染的常用指標(biāo)，其中HBsAg 主要反映是否存在HBⅤ感染；HBsAb 可機(jī)體是否存在HBⅤ抗體；HBeAg表示體內(nèi)HBⅤ復(fù)制活躍度，可提示HBⅤ傳染性；HBeAb 可現(xiàn)實(shí)HBⅤ復(fù)制活動(dòng)，HBeAg 轉(zhuǎn)陰HBeAb 陽性表達(dá)可表示HBⅤ復(fù)制活躍度降低，或HBⅤ變異e 抗原產(chǎn)生受阻，HBⅤ復(fù)制活動(dòng)升高；HBcAb 陽性可表示已感染HBⅤ或曾感染HBⅤ。乙肝五項(xiàng)檢查通過常見組合方式確診HBⅤ感染。本研究結(jié)果顯示不同HBⅤ-DNA 載量患者治療前HBcAb、HBeAg、HBeAb、HBsAg 陽性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果提示HBⅤ-DNA 載量測定在乙型肝炎的診斷和治療中應(yīng)予以關(guān)注[6,7]。綜上所述，AST、NLR 水平與乙型肝炎患者HBⅤ-DNA 載量、肝臟炎癥及纖維化相關(guān)，，HBⅤ-DNA載量對(duì)乙肝診斷及臨床治療抗病毒治療時(shí)機(jī)提供重要依據(jù)，可考慮AST、NLR 水平在提示肝細(xì)胞損傷程度還可應(yīng)用于臨床檢測治療效果，或能成替代穿刺組織檢查手段之一，從而提高臨床乙型肝炎患者診療水平。