李敏　許友強(qiáng)　劉靜　賈全勝

【摘要】? 為確保聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)的真實(shí)性、準(zhǔn)確性，也為保證實(shí)驗(yàn)人員的安全性，制定嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室核酸污染防控策略尤為重要。本文以第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)新冠核酸PCR實(shí)驗(yàn)室大量核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為例，闡述第三方核酸實(shí)驗(yàn)室依靠嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)，完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施，合格的實(shí)驗(yàn)操作人員和嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)的質(zhì)量管理體系，并對(duì)污染進(jìn)行定期監(jiān)控和評(píng)估，在很大程度上能夠控制、避免和減少核酸污染。

【關(guān)鍵詞】? 第三方核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室；核酸污染；預(yù)防；控制

中圖分類(lèi)號(hào)：R115? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1672-1721（2023）01-0087-04

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.01.029

2019年底至今，席卷全球的新型冠狀病毒肺炎疫情，讓第三方醫(yī)學(xué)檢測(cè)機(jī)構(gòu)成為戰(zhàn)疫中新冠病毒核酸檢測(cè)的“主力軍”，金域醫(yī)學(xué)作為全國(guó)最大的第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)，2020年累計(jì)新冠核酸檢測(cè)量超過(guò)3 200萬(wàn)人份，約占同期全國(guó)總體核酸檢測(cè)量1/10。這龐大的檢測(cè)數(shù)據(jù)意味著疫情之下，當(dāng)面臨大量核酸檢測(cè)需求時(shí)，第三方醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室切實(shí)發(fā)揮了重要作用。

目前我國(guó)二級(jí)以上綜合醫(yī)院都具備核酸檢測(cè)能力，也都相應(yīng)設(shè)立了聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）實(shí)驗(yàn)室，高強(qiáng)度的核酸檢測(cè)任務(wù)已然成為了醫(yī)檢人員的工作常態(tài)。而一旦出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染，可能會(huì)造成假陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可信，甚至?xí)＜皩?shí)驗(yàn)室工作人員安全，應(yīng)對(duì)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室污染的最好方法就是防范于未然。新疆金域PCR實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行至2021年9月，已完成將近189萬(wàn)人次的核酸樣本檢測(cè)，作為新冠病毒核酸定點(diǎn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)，在監(jiān)控和解決核酸污染方面積累了大量的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文探討分析了核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室如何避免和減少核酸污染的產(chǎn)生以及污染處理策略，以供參考。

1? ? 核酸污染防控基本要求

1.1? ? 嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)? ? 通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、使用個(gè)體防護(hù)設(shè)施、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化工作及操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施，確保實(shí)驗(yàn)室工作人員及周?chē)h(huán)境不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的污染。按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》[1] （衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）規(guī)定，PCR實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行分區(qū)，每個(gè)步驟都在相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)區(qū)進(jìn)行，原則上應(yīng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)，每個(gè)區(qū)設(shè)置專一標(biāo)識(shí)，流轉(zhuǎn)順序?yàn)樵噭?zhǔn)備區(qū) → 核酸提取區(qū) → 擴(kuò)增區(qū) → 產(chǎn)物分析區(qū)。根據(jù)使用儀器的功能，部分區(qū)域可適當(dāng)合并，各區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全獨(dú)立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣直接相通。 試劑、樣本等在各區(qū)之間以相應(yīng)傳遞窗單向傳遞 ，嚴(yán)禁人員、器材和試劑倒流。各區(qū)均設(shè)有緩沖間，工作服和清潔消毒物品不得跨區(qū)混用。

各項(xiàng)檢測(cè)工作應(yīng)嚴(yán)格按相應(yīng)規(guī)定在各自的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，嚴(yán)禁在樣本制備區(qū)配制試劑。《新型冠狀病毒肺炎診療方案》（試行第八版）中明確提出：“在相對(duì)封閉的環(huán)境中長(zhǎng)時(shí)間暴露于高濃度氣溶膠情況下存在經(jīng)氣溶膠傳播的可能”[2]。可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)行新冠核酸檢測(cè)過(guò)程中，若防護(hù)不當(dāng)，不慎接觸新冠氣溶膠病毒也易感染新冠肺炎。核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的人、物及空氣流向都須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)方向，空氣壓力遞減的方式進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物隨人流、物流及空氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域，避免交叉污染。

1.2? ? 完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施? ? 核酸檢測(cè)中，PCR實(shí)驗(yàn)室所需的設(shè)備配置對(duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用，因此，越來(lái)越得到重視。由于PCR實(shí)驗(yàn)室所使用的檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒，并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷。完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器。試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、分析區(qū)儀器設(shè)備必須滿足正常實(shí)驗(yàn)開(kāi)展所需，在確保檢測(cè)實(shí)驗(yàn)順利完成的前提下，盡量實(shí)現(xiàn)高自動(dòng)化、高檢測(cè)通量、高信息化。工作區(qū)域儀器設(shè)備參考配置標(biāo)準(zhǔn)如下：

1.2.1? ? 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：2～8 ℃和-15 ℃冰箱、混勻器、微量加樣器（覆蓋1～1 000μl）、移動(dòng)紫外燈、消耗品（一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管、加樣器吸頭）、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品等。

1.2.2? ? 標(biāo)本制備區(qū)：2～8 ℃冰箱、-20 ℃或- 80℃冰箱、高速合式冷凍離心機(jī)、混勻器、水浴箱或加熱模塊、微量加樣器（覆蓋1～1 000μl）、紫外燈、超凈工作臺(tái)、清耗品（一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭），如需處理大分子DNA，應(yīng)備有超聲波水浴儀。

1.2.3? ? 擴(kuò)增反應(yīng)混合物和擴(kuò)增區(qū)：核酸擴(kuò)增儀、微量加樣器（覆蓋1～1 000μL）、紫外燈（近工作臺(tái)面）、消耗品（一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭）、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品等。

1.2.4? ? 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：視檢驗(yàn)方法不同而定，基本儀器設(shè)備如下：微量加樣器（覆蓋1～1 000μl）、紫外燈（近工作臺(tái)面）、消耗品（一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭）、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品等。

1.3? ? 合格的實(shí)驗(yàn)操作人員? ? WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》第四版，將實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求分為“核心要求”“加強(qiáng)要求”“最高要求”，主要是基于生物因子和人員能力的評(píng)估而確定，實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、運(yùn)行、監(jiān)管和評(píng)價(jià)需要高水平的專業(yè)人員、監(jiān)管人員和評(píng)審人員。

通常情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)或醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，具備大專以上學(xué)歷。技術(shù)人員必須是受過(guò)專業(yè)教育的技術(shù)人員，在獨(dú)立承擔(dān)檢測(cè)任務(wù)前須在中高級(jí)實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn)，達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)方可開(kāi)始工作。根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》第十四條規(guī)定：“醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門(mén)指定機(jī)構(gòu)技術(shù)培訓(xùn)合格后，方可從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作”[1] ，所有核酸檢測(cè)人員需持PCR上崗證上崗，必須進(jìn)行崗前培訓(xùn)（包括實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)和生物安全培訓(xùn)）并經(jīng)考核合格后方可進(jìn)行檢測(cè)工作，檢測(cè)過(guò)程全程嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行操作；實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格執(zhí)行《核酸實(shí)驗(yàn)室設(shè)置與管理規(guī)范》的管理，遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程；實(shí)驗(yàn)室工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育，自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作。對(duì)于新進(jìn)入本室的人員，如尚未取得PCR技術(shù)培訓(xùn)合格證，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室有培訓(xùn)合格證的上級(jí)技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作，實(shí)驗(yàn)報(bào)告由有資格人員出具，并應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)取得上崗培訓(xùn)合格證。此外，PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)工作需要配備足夠的工作人員，視工作量的增加和業(yè)務(wù)發(fā)展需要，適當(dāng)增加工作人員。

1.4? ? 嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)的質(zhì)量管理體系? ? 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體情況編寫(xiě)質(zhì)量體系文件《質(zhì)量手冊(cè)》《程序文件》《作業(yè)指導(dǎo)書(shū)》，并保證管理體系有效運(yùn)行。管理體系的特點(diǎn)應(yīng)有明確的目的、規(guī)范的管理、有效的制約、高效的機(jī)制、能自我發(fā)展的整體。依據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》等文件建立完備的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系。為保證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的生物安全性，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將政策、制度、計(jì)劃、程序和指導(dǎo)書(shū)制訂成文件，并傳達(dá)到全體實(shí)驗(yàn)室人員。生物安全管理體系應(yīng)始終貫穿于實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的整個(gè)過(guò)程，從采樣開(kāi)始到所有潛在危險(xiǎn)材料被處理。

實(shí)驗(yàn)室人員嚴(yán)格執(zhí)行《核酸實(shí)驗(yàn)室設(shè)置與管理規(guī)范》的管理，盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性；核酸實(shí)驗(yàn)室廢棄物嚴(yán)格按照《醫(yī)療廢物管理程序》執(zhí)行，廢液不能直接在實(shí)驗(yàn)室中傾倒；擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)[3]。

2? ? 污染的類(lèi)型和處理方式

PCR反應(yīng)雖然具有較強(qiáng)的擴(kuò)增能力和極高的靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，但也存在極易污染的棘手問(wèn)題，極其微量的污染都可能造成假陽(yáng)性結(jié)果。如果形成氣溶膠污染擴(kuò)散，則可導(dǎo)致整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)室污染，處理起來(lái)非常棘手，嚴(yán)重時(shí)甚至要關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室。核酸實(shí)驗(yàn)室具備超強(qiáng)的擴(kuò)增能力、高檢測(cè)靈敏度，因而極其微量的污染都會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)，所以防污染策略的實(shí)施尤為重要。實(shí)驗(yàn)室日常管理一定要做好清潔消毒工作，不能因?yàn)楣ぷ魇炀毦退尚赶聛?lái)，每日PCR實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后一定要按要求對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行徹底的清潔消毒，避免造成二次污染，甚至更嚴(yán)重的人員健康或其他經(jīng)濟(jì)損失。一旦出現(xiàn)污染情況要盡快處理，核酸實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的污染有：樣本之間的交叉污染、試劑污染、擴(kuò)增產(chǎn)物污染、克隆質(zhì)粒污染，以及半開(kāi)放核酸提取儀提取過(guò)程造成的交叉污染等，各類(lèi)型污染均會(huì)給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)假陽(yáng)性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。

2.1? ? 針對(duì)試劑污染，可分為：移液器污染，配制容器污染，其他溶液污染，陰陽(yáng)性對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)品混放導(dǎo)致的污染等?？梢圆扇∫韵路婪洞胧号鋫鋵Ｓ靡埔浩饔糜谂渲圃噭?，不得與加質(zhì)控品、樣本的移液器混用；配制試劑用的容器、EP管等務(wù)必為無(wú)菌管、不含RNA降解酶等；配制人員做好二級(jí)防護(hù)，避免體液毛發(fā)等污染試劑；配制試劑一定要遵守現(xiàn)配現(xiàn)用原則，以及配好的試劑密封。

2.2? ? 針對(duì)樣本污染，可分為：樣本之間的交叉污染，氣溶膠污染，陽(yáng)性質(zhì)控污染，提取好的模板之間的交叉污染等。根據(jù)以上情形可以采取以下防范措施：操作時(shí)，要勤更換一次性手套，防止在加液和移液時(shí)發(fā)生滴液、漏液，進(jìn)而污染工作臺(tái)面和其他樣本；開(kāi)樣本管蓋時(shí)小心操作、開(kāi)EP管蓋前稍離心收集液體于管底；在加入模板時(shí)，按照“陰性對(duì)照-待測(cè)樣品-陽(yáng)性對(duì)照”的加樣順序。

2.3? ? 針對(duì)核酸氣溶膠污染，可分為：陽(yáng)性樣本、陽(yáng)性質(zhì)控或標(biāo)準(zhǔn)品氣溶膠和擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠兩種情況，一般常發(fā)生在EP管爆蓋時(shí)、劇烈震蕩時(shí)、高速離心時(shí)、移液器反復(fù)吹打時(shí)?？梢圆扇∫韵麓胧簩?duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及重污染區(qū)進(jìn)行封閉，同時(shí)對(duì)區(qū)域內(nèi)被氣溶膠污染的相關(guān)設(shè)備、耗材等，用布或紙巾覆蓋并由外圍向中心傾倒0.5%的次氯酸消毒劑，約30 min后，清除污染物品，再用0.2%次氯酸消毒劑擦拭，然后用75%酒精進(jìn)行噴灑，最后開(kāi)啟固定紫外燈、使用移動(dòng)紫外車(chē)定點(diǎn)照射1 h，照射結(jié)束后有條件的應(yīng)開(kāi)窗通風(fēng)（通風(fēng)前做好其他未污染區(qū)域的防范）。在進(jìn)行去污消殺的同時(shí)，需做好環(huán)境、物表和操作人員手表核酸監(jiān)測(cè)與評(píng)估，上述去污措施可反復(fù)多次進(jìn)行，通過(guò)核酸監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)去污措施無(wú)效時(shí)，應(yīng)更換實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地或者使用不同引物的擴(kuò)增試劑。核酸氣溶膠污染不是瞬間產(chǎn)生的，而是一個(gè)累積的過(guò)程，在日常實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格按照相關(guān)要求進(jìn)行清潔消毒，遵守實(shí)驗(yàn)室各區(qū)獨(dú)立、物品嚴(yán)格分區(qū)、人流和氣流單一流向原則，在很大程度上可規(guī)避核酸氣溶膠污染[4]。

進(jìn)行PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，操作人員必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，最大程度地降低可能出現(xiàn)的PCR檢測(cè)過(guò)程中污染。實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生污染，檢測(cè)工作應(yīng)立即停止，污染的實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢，直到確認(rèn)污染消除后才能重新開(kāi)始檢測(cè)。首先，要查找污染源和明確污染范圍，根據(jù)污染源和污染范圍采取最有效的去污染措施，結(jié)合各種不同方法以達(dá)到最佳效果。規(guī)范的實(shí)驗(yàn)操作包括：實(shí)驗(yàn)應(yīng)在超凈工作臺(tái)進(jìn)行，工作臺(tái)內(nèi)應(yīng)放置PCR專用微量離心機(jī)、各量程移液器和其他必需物品；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中選擇最合適尺寸的手套并及時(shí)更換，在進(jìn)出不同實(shí)驗(yàn)區(qū)域時(shí)都應(yīng)更換實(shí)驗(yàn)服、口罩及手套，以避免不同實(shí)驗(yàn)區(qū)交叉污染；裝有PCR試劑的反應(yīng)管在打開(kāi)之前應(yīng)先瞬時(shí)離心，將管壁及管蓋上的液體離至管底，降低污染手套或加樣器的風(fēng)險(xiǎn)；謹(jǐn)慎開(kāi)啟反應(yīng)管，防止管內(nèi)液體濺出或形成氣溶膠導(dǎo)致污染；吸加試劑和模板的操作遵守“慢吸快打”原則，盡量一次性完成，忌多次抽吸，以避免氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。PCR試劑建議小量分裝，以減少反復(fù)凍融、重復(fù)取樣次數(shù)；多樣本PCR反應(yīng)時(shí)，先配制反應(yīng)混合液分裝至反應(yīng)管中，最后加入樣本核酸，且勿同時(shí)開(kāi)蓋，盡量保證單人單管，實(shí)現(xiàn)完全閉管操作；實(shí)驗(yàn)試劑應(yīng)與樣品和PCR產(chǎn)物分開(kāi)保存，不應(yīng)放于同處；PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)完成后及時(shí)將反應(yīng)管取出，用一次性手套將產(chǎn)物反應(yīng)管包裹丟棄，保證管蓋緊閉。

3? ? 污染的定期監(jiān)控和評(píng)估

2021年3月，西安某新冠肺炎定點(diǎn)醫(yī)院一位負(fù)責(zé)隔離病區(qū)患者核酸檢驗(yàn)的工作人員被診斷為確診病例。除了一線醫(yī)務(wù)人員，身為第三方醫(yī)檢機(jī)構(gòu)的核酸檢測(cè)人員，長(zhǎng)期暴露在高危的病毒檢測(cè)環(huán)境中，所承受的壓力和風(fēng)險(xiǎn)也是常人無(wú)法想象的。

一個(gè)合格的PCR實(shí)驗(yàn)室要時(shí)刻注意污染的監(jiān)測(cè)，以防遇到任何污染，在第一時(shí)間能夠及時(shí)采取有效解決措施。為保證實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的感染，周?chē)h(huán)境不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的污染，做好核酸實(shí)驗(yàn)室核酸污染的定期監(jiān)控工作很有必要，常規(guī)定期監(jiān)控要求做到：每天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室空氣采樣監(jiān)測(cè)，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、門(mén)把手、儀器設(shè)備表面等進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè)；每次檢測(cè)過(guò)程采用至少3個(gè)陰性對(duì)照隨機(jī)置放參與提取全過(guò)程；針對(duì)陽(yáng)性樣本，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立嚴(yán)格的可疑樣本和陽(yáng)性樣本復(fù)檢流程，選用另外1～2種靈敏度更高且擴(kuò)增不同區(qū)域的檢測(cè)試劑對(duì)原始樣本進(jìn)行復(fù)查檢測(cè)。安排實(shí)驗(yàn)人員記錄陽(yáng)性率及假陽(yáng)性的發(fā)生頻率，針對(duì)檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率異常升高、陰性對(duì)照頻繁出現(xiàn)假陽(yáng)性、未知擴(kuò)增條帶重復(fù)出現(xiàn)等問(wèn)題，很可能發(fā)生了核酸氣溶膠污染，應(yīng)立即進(jìn)行污染源的排除和清理。

除了日常的防污染監(jiān)控，還應(yīng)對(duì)所在實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)因子進(jìn)行定期評(píng)估，并制定避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露，防止向?qū)嶒?yàn)室擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的相應(yīng)預(yù)防措施。WHO第四版手冊(cè)[5]對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求主要是基于生物因子和人員能力的評(píng)估而確定，以確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的感染，周?chē)h(huán)境不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的污染。

本醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所作為在當(dāng)?shù)匦l(wèi)健委備案的獨(dú)立法人第三方檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)，為社會(huì)及政府提供各類(lèi)優(yōu)質(zhì)的醫(yī)學(xué)檢測(cè)服務(wù)、公證的數(shù)據(jù)，并出具具有法律效力的檢測(cè)報(bào)告。檢驗(yàn)所檢測(cè)水平的高低直接影響到企業(yè)的聲譽(yù)，PCR檢測(cè)作為目前新冠病毒流行大背景下日常檢測(cè)的重點(diǎn)項(xiàng)目，更應(yīng)該保證其檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和準(zhǔn)確性。因此，檢測(cè)過(guò)程中必須嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，提高防止交叉污染的意識(shí)，降低出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)，做好實(shí)驗(yàn)室日常清潔消毒和環(huán)境監(jiān)測(cè)工作，保證實(shí)驗(yàn)檢測(cè)及相關(guān)人員的生物安全性。

參考文獻(xiàn)

[1]? ? 醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）[S].國(guó)家衛(wèi)生部辦公廳，2010.

[2]? ? 新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第八版）（國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)函〔2020〕680號(hào)）[S].國(guó)家衛(wèi)健委，2020.

[3]? ? 曾勁峰.核酸實(shí)驗(yàn)室污染原因分析及污染控制對(duì)策[EB/OL].https：//wenku.baidu.com/view/351a46eaff4733687e21af45b307e87101f6f8fa.html

[4]? ? 醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）（聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療發(fā)〔2020〕271號(hào)）[S].國(guó)務(wù)院應(yīng)對(duì)新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療救治組，2020.

[5]? ? 張彥國(guó).WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（第4版草案）簡(jiǎn)介[J].暖通空調(diào)，2020，50（6）：81-85.

（收稿日期：2022-10-18）