王紅 高冬 王欣婷

【摘要】為保證蛹蟲草的食用安全性，避免農(nóng)藥殘留、重金屬超標(biāo)等對蛹蟲草行業(yè)的影響，本文依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)及常規(guī)檢驗方法，利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀及電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定蛹蟲草中的農(nóng)藥殘留含量及重金屬含量。檢測結(jié)果表明：測試樣品中的農(nóng)藥殘留甲氧滴滴涕、毒蟲畏、甲拌磷、甲基異硫磷、克百威、樂果、殺蟲畏、殺撲磷、乙酰甲胺磷、速滅磷均未檢出；重金屬總砷、鉛、總汞、鎘及鉻均有檢出，但數(shù)值均在安全食用范圍內(nèi)。

【關(guān)鍵詞】蛹蟲草；農(nóng)藥殘留；重金屬；檢測

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.05.029

Analysis of Pesticide Residues and Heavy Metal Pollutionin Cordyceps Militaris

WANG Hong， GAO Dong， WANG Xinting

（Fushun Inspection， Examination & Cerification Centre， Fushun 113006， China）

Abstract： In order to ensure the food safety of Cordyceps militaris and avoid the influence of pesticide residues and heavy metals on the industry of Cordyceps militaris in our country， this paper is based on the national standard and routine inspection methods， the contents of pesticide residues and heavy metals in Cordyceps militaris were determined by gc-ms and Inductively coupled plasma mass spectrometer. The test results show that， no methoxychlor of pesticide residues， dichlorvos， Pho， isothiophos-methyl， carbofuran， dimethoate， dichlorvos， chlorpyrifos， acephate and dimethoprim were detected in the samples tested. Total arsenic， lead， mercury， cadmium and chromium were all detected， but their values were within the safe range for consumption.

Key words： Cordyceps militaris； pesticide residues； heavy metals； detection

蛹蟲草（Cordyceps militaris）又稱北冬蟲夏草，與冬蟲夏草同屬異種，是蟲草屬的模式種，現(xiàn)被特批準(zhǔn)為食品原料。蛹蟲草中主要含有蟲草素、蟲草多糖、麥角甾醇和纖溶酶等多種天然生物活性物質(zhì)[1-2]。其保健作用與冬蟲夏草的藥用及保健價值較相近。目前人們把大部分注意力都放在了蛹蟲草藥用價值上，而對于蛹蟲草食用安全問題關(guān)注度還不夠。因此，建立一種準(zhǔn)確的農(nóng)藥殘留及重金屬檢測方法，對分析蛹蟲草中農(nóng)藥殘留及重金屬成分有著重要意義。本研究利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測定蛹蟲草中的10種農(nóng)藥殘留和重點關(guān)注的5種有害重金屬，對蛹蟲草中的農(nóng)藥殘留、重金屬超標(biāo)等問題進(jìn)行分析和檢測，為解決蛹蟲草的食用安全問題提供了理論依據(jù)，保證蛹蟲草食用安全。

1食用蛹蟲草的污染來源及危害

1.1農(nóng)藥殘留及危害

農(nóng)藥殘留來源基本有兩方面，一是直接使用農(nóng)藥對作物造成的污染，二是作物從已經(jīng)污染的環(huán)境中對農(nóng)藥的吸收。常見的農(nóng)藥殘留包括有機(jī)氯和有機(jī)磷類。由于大部分蛹蟲草都是人工種植，農(nóng)藥殘留問題日益嚴(yán)重。

1.2重金屬殘留及危害

重金屬含量超標(biāo)也是食品安全問題中較難解決的問題。食用菌富集重金屬只是食用菌對不良生長環(huán)境的一種自我保護(hù)機(jī)制，由于食用菌中廣泛存在的金屬硫蛋白可與重金屬特異性結(jié)合，會造成重金屬在食用菌中富集殘留。與維管植物相比，食用菌對于鎘、鉛、汞等環(huán)境中的金屬元素具有更強(qiáng)的富集吸收性能[3-4]?？偵?、總汞、鉛和鎘都是有害元素，都會引起身體不同程度的損傷，長期服用會在體內(nèi)產(chǎn)生蓄積性中毒，并且一旦進(jìn)入人體很難被排出。

2檢測項目與方法

蛹蟲草農(nóng)藥殘留確定檢測項目為：甲氧滴滴涕、毒蟲畏、甲拌磷、甲基異硫磷、克百威、樂果、殺蟲畏、殺撲磷、乙酰甲胺磷、速滅磷，測定方法依據(jù)GB 23200.113—2018《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》[5]。重金屬確定檢測項目為：總砷、鉛、總汞、鎘及鉻含量，測定方法依據(jù)GB 5009.268—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多元素的測定》[6]。

3試驗儀器設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與試劑耗材

3.1儀器設(shè)備

三重四極桿質(zhì)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（杭州譜育/ EXPEC5231GC2000/EI源）；分析天平（梅特勒/ML204T/02）；氮吹儀（上海屹堯/NS-10）；離心機(jī)（hitachi/CF16RN）；電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國PE/NexION 350x）；微波消解儀（美國CEM/MARS6）；超純水機(jī)（密理博/Milli-QA10）。

3.2標(biāo)準(zhǔn)品

環(huán)氧七氯B（CAS號：1024-57-3）（內(nèi)標(biāo)）：99.9%；甲氧滴滴涕（CAS號：72-43-5）、毒蟲畏（CAS號：470-90-6）、甲拌磷（CAS號：298-02-2）、甲基異硫磷（CAS號：99675-03-3），100μg/mL；克百威（CAS號：1563-66-2）、樂果（CAS號：60-51-5），100μg/mL；殺蟲畏（CAS號：22248-79-9），100μg/mL；殺撲磷（CAS號：950-37-8），100μg/mL；乙酰甲胺磷（CAS號：30560-19-1），100μg/mL；速滅磷（CAS號：338-45-4），100μg/mL?？偵椋?000μg/mL）、鉛（1000μg/mL）、總汞（1000μg/mL）、鎘（1000μg/mL）、鉻（1000μg/mL）。

3.3試劑耗材

乙腈（色譜純）；乙酸乙酯（色譜純）；硝酸（優(yōu)級純）；水：GB / T 6682規(guī)定的一級水；QUECHERS提取管（COPURECOQ050010H或其他相當(dāng)者）；QUECHERS凈化管（COPURECOQ015022H或其他相當(dāng)者）。

4試驗方法

4.1儀器條件

4.1.1氣相色譜條件

4.1.2電感耦合等離子體質(zhì)譜條件

霧化條件：PFA同心霧化器，霧化室溫度2℃；等離子體條件：射頻功率1500 W，載氣流量1.20 L/min；接口處：采樣錐（Ni）孔徑1.1 mm，截取錐（Ni）孔徑0.9 mm，超截取錐（Ni）孔徑1.0 mm；采樣深度8.0 mm。

4.2樣品分析步驟

4.2.1樣品制備

取不同種類蟲草樣品各500 g，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后混勻，樣品分成兩份，放入密封袋內(nèi)備用。

4.2.2農(nóng)藥殘留樣品前處理

稱取試樣2.0 g于50 mL離心管中，加入水8 mL，混勻后加入10 mL乙腈、一顆陶瓷均質(zhì)子，再加入一份QuEChERS提取鹽包，振蕩1 min后，6000 r/min離心5 min；吸取上清液6 mL于15 mL凈化管中，再次渦旋混勻1 min，6000 r/min離心5 min，取2 mL上清液于離心管中，進(jìn)行氮吹至近干。加入5 mg/L的環(huán)氧七氯B內(nèi)標(biāo)溶液20μL，用1 mL乙酸乙酯進(jìn)行復(fù)溶，過0.22μm有機(jī)相濾膜后待測定。同時進(jìn)行空白試驗。

4.2.3農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及上機(jī)測定

環(huán)氧七氯B內(nèi)標(biāo)溶液：稱取10 mg環(huán)氧七氯B，用乙酸乙酯定容至10 mL容量瓶中，此標(biāo)準(zhǔn)儲備液濃度為1000 mg/L，臨用時配制成5 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液。取10種1μg/mL的農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)混合溶液各0.1 mL，定容到100 mL。精確吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，逐級用乙酸乙酯稀釋成質(zhì)量濃度為0.005、0.01、0.05、0.1、0.5 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)使用液?？瞻谆|(zhì)（蟲草）溶液氮?dú)獯蹈珊螅尤?0μL內(nèi)標(biāo)溶液，加入下列質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液復(fù)溶，過0.22μm有機(jī)相濾膜后，待上機(jī)測定。將上述標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液上機(jī)測定，以保留時間和定性離子定性；以各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品定量離子峰面積和環(huán)氧七氯定量離子峰面積的比值為縱坐標(biāo)，以農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，內(nèi)標(biāo)法定量。

4.2.4重金屬殘留前處理

稱取0.2 g試樣于微波消解罐內(nèi)加入5 mL硝酸，加蓋放置1 h以上進(jìn)行微波消解。冷卻后取出，用水定容至25 mL，混勻備用，同時做空白試驗。

4.2.5重金屬殘留標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制及試樣溶液的測定

將總砷、鉛、鎘和鉻4種金屬元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液混合，用體積濃度為5%的硝酸溶液逐級稀釋成1.0、5.0、30.0、50.0μg/L混合系列，將總汞用積濃度為5%的硝酸溶液逐級稀釋成0.10、0.50、1.00、1.50、2.00μg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，并與上述四種標(biāo)準(zhǔn)工作液混合，然后注入電感耦合等離子體質(zhì)譜儀中，測定待測元素和內(nèi)標(biāo)元素的信號響應(yīng)值，以待測元素的濃度為橫坐標(biāo)，待測元素與所選內(nèi)標(biāo)元素響應(yīng)信號值的比值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將空白溶液和試樣溶液分別注入電感耦合等離子體質(zhì)譜儀中，測定待測元素和內(nèi)標(biāo)元素的信號響應(yīng)值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到消解液中待測元素的濃度。

5評價依據(jù)

農(nóng)藥殘留限量參考GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥殘留最大限量》[7]及GB 2763.1—2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中2，4-滴丁酸鈉鹽等112種農(nóng)藥最大殘留限量》[8]中食用菌的限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。重金屬總砷、鉛、總汞、鎘及鉻限量參考GB 2762—2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》[9]中食用菌及其制品的限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。

6結(jié)果與分析

6.1蛹蟲草農(nóng)藥殘留量檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性圖譜

蛹蟲草農(nóng)藥殘留量檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性圖譜見圖1～圖10。

6.2三種蛹蟲草的農(nóng)藥殘留量檢測結(jié)果及限量要求

三種蛹蟲草的農(nóng)藥殘留量檢測結(jié)果及限量要求見表1～表3。

通過表1、表2和表3可以看出，三種不同蛹蟲草樣品中甲氧滴滴涕、毒蟲畏、甲拌磷、甲基異硫磷、克百威、樂果、殺蟲畏、殺撲磷、乙酰甲胺磷、速滅磷10種農(nóng)藥殘留均未檢出，說明該蛹蟲草沒有直接或者間接受到農(nóng)藥污染，不存在質(zhì)量安全風(fēng)險。

6.3蛹蟲草重金屬含量檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性圖譜

蛹蟲草重金屬含量檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性圖譜見圖11～圖15。

6.4三種蛹蟲草的重金屬含量檢測結(jié)果及限量要求

三種蛹蟲草的重金屬含量檢測結(jié)果及限量要求見表4～表6。

從表4、表5及表6可以看出，三種蛹蟲草樣品中重金屬總鉛、砷、鎘及鉻均有檢出，其中總砷及鉻含量較高，蛹蟲草1號總砷含量為0.32 mg/kg，蛹蟲草2號和蛹蟲草3號鉻含量分別為0.40 mg/kg和0.42 mg/kg，鎘的數(shù)值較為平穩(wěn)，基本在0.02～ 0.04 mg/kg之間。雖然都有檢出，但檢測結(jié)果均低于國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限量?？偣坎桓撸枷x草1號總汞為未檢出，蛹蟲草2號及蛹蟲草3號均為0.01 mg/kg。5種重金屬的含量檢測結(jié)果均低于國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限量，因此，該三種蛹蟲草存在的質(zhì)量安全風(fēng)險較低。

7討論與結(jié)論

隨著人們對食品安全意識的不斷增強(qiáng)，對食品的質(zhì)量安全問題也更加關(guān)注。在關(guān)注蛹蟲草藥用價值的同時更應(yīng)該關(guān)注它本身的食用安全問題。因此，蛹蟲草污染因素的風(fēng)險評估及檢測對其食用安全性評價有重大意義。

根據(jù)本研究結(jié)果，蛹蟲草中甲氧滴滴涕、毒蟲畏、甲拌磷、甲基異硫磷、克百威、樂果、殺蟲畏、殺撲磷、乙酰甲胺磷、速滅磷農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果均為未檢出，總砷、鉛、鉻是該地蛹蟲草的主要重金屬污染元素，雖有檢出但結(jié)果均低于國家標(biāo)準(zhǔn)，所以可以放心食用。除了關(guān)注蛹蟲草成品的農(nóng)藥殘留及重金屬污染問題，還應(yīng)該嚴(yán)格控制容易引起蛹蟲草安全問題的源頭，比如蛹蟲草培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)基中的農(nóng)藥殘留及重金屬污染，在栽培前應(yīng)先做好培養(yǎng)基的農(nóng)藥殘留量及重金屬含量的檢測工作，從而在源頭上控制農(nóng)藥殘留及重金屬對蛹蟲草的污染，保證最終食用品質(zhì)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]RAETHONG N，WANG H，NIELSEN J，et al. Optimizing cultivation of Cordyceps militaris for fast growth and cordycepinoverproductionusingrationaldesignof synthetic media[J]. Computational and Struc-tural Biotechnology Journal，2019（18）：1-8.

[2]劉娟，周影，王芹，等.柞蠶蛹蟲草繼代培育其活性物質(zhì)變化規(guī)律[J].菌物學(xué)報，2020，39（12）：2328-2337.

[3]JERZY F，ROLAND T，DANIELA M. Distribution and bioconcentration of some elements in the edible mushroom Leccinum scabrum from locations in Poland[J].J Environ Sci Heal B，2021，56（4）：11-18.

[4]KOKKORIS V，MASSASI，POLEMISE，etal. Accumulation of heavy metals by wild edible mushrooms with respect to soil substrates in the Athens metropolitan area（Greece）[J].Sci Total Environ，2019，685：280-296.

[5]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：GB 23200.113—2018[S].

[6]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多元素的測定：GB 5009.268—2016[S].

[7]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763—2021[S].

[8]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中2，4-滴丁酸鈉鹽等112種農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763.1—2022[S].

[9]品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量：GB 2762—2022[S].

【作者簡介】

王紅，女，1985年出生，碩士，研究方向為食品檢驗和質(zhì)量管理。

高冬，女，1981年出生，碩士，研究方向為食品檢驗和質(zhì)量管理。

王欣婷，女，1986年出生，碩士，研究方向為食品檢驗和質(zhì)量管理。

（編輯：李加鵬）