吳曉蘭，鄔一楠，周磊

·論 著·

配戴角膜塑形鏡對角膜上皮下神經(jīng)纖維的影響

吳曉蘭，鄔一楠，周磊

寧波市眼科醫(yī)院眼視光科，浙江寧波 325040

利用激光共焦顯微鏡觀察配戴角膜塑形鏡1年半的患者角膜組織變化。選取2019年1月至2019年12月于寧波市眼科醫(yī)院配戴角膜塑形鏡的患者102例（186眼），觀察配戴前及配戴1個月、3個月、6個月、12個月、18個月后，患者角膜上皮及上皮下神經(jīng)纖維密度、分支數(shù)量、彎曲度、內(nèi)皮等方面的數(shù)據(jù)變化。隨著角膜塑形鏡配戴時間的增加，角膜上皮層厚度有所變薄，但角膜上皮細胞并無明顯改變。配戴角膜塑形鏡前后，患者角膜上皮細胞、角膜中周邊及中央角膜神經(jīng)纖維主干密度、角膜神經(jīng)纖維分支密度、角膜神經(jīng)纖維密度、角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量比較，差異均無統(tǒng)計學意義（>0.05）。角膜神經(jīng)纖維彎曲度隨著角膜塑形鏡配戴時間的增加而增加。配戴前后角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量比較，差異無統(tǒng)計學意義（>0.05）。配戴角膜塑形鏡有著較好的安全性，可應用于控制青少年近視進展。

角膜塑形鏡；激光共焦顯微鏡；角膜；上皮下神經(jīng)纖維

角膜上皮是角膜與外界接觸的第一道防線，也是最易引起病變的組織，是評價長期配戴角膜塑形鏡安全性的最敏感指標[1]。角膜塑形鏡被廣泛應用于控制青少年近視進展，其與眼瞼、角膜、結(jié)膜和淚膜直接接觸，容易引起眼表生理的變化，同時還可能引起角膜內(nèi)部細胞和組織結(jié)構(gòu)的改變。激光共焦顯微鏡成像具有高分辨率、高放大倍數(shù)、高對比度、不受角膜水腫和瘢痕影響的特點，可在細胞水平上進行活體、無創(chuàng)、動態(tài)觀察。本研究從角膜上皮下神經(jīng)纖維密度、分支數(shù)量、彎曲度、角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量等方面的改變來分析角膜塑形鏡對角膜的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2019年12月于寧波市眼科醫(yī)院眼視光科就診的患者102例（186眼），男46例，女56例。年齡8～18歲，平均（11.2±2.6）歲。納入標準：①球鏡度–1.00～–6.00D；②眼表、全身健康，各項指標均符合角膜塑形鏡配戴原則。排除標準：①存在配戴禁忌證；②無法按要求隨訪；③無法配合檢查。本研究通過寧波市眼科醫(yī)院醫(yī)院倫理委員會審議通過（倫理審批號：2018-KY007）。所有患者均自愿參加實驗并簽署知情同意書。

1.2 方法

所有患者均使用亨泰角膜塑形鏡（鏡片材料采用Boston Equalens Ⅱ，透氧系數(shù)為140，光學中心厚度≤0.22mm，南鵬亨泰科技開發(fā)公司生產(chǎn)），熒光素鈉染色后調(diào)整角膜塑形鏡至良好配適，在配戴前及配戴后1個月、3個月、6個月、12個月、18個月時，使用角膜激光共焦顯微鏡進行檢查。

使用鹽酸丙美卡因滴眼液（生產(chǎn)廠商：s.a. ALCON-COUVREUR n.v，注冊證號：國藥準字HJ20160133，規(guī)格：15ml:75mg）行眼部表面麻醉，置開瞼器后，頭部置于頭托，在德國海德堡角膜激光共焦顯微鏡（型號：HRT 3）鏡頭表面安裝一次性接觸帽，確認接觸帽輕輕接觸角膜表面，調(diào)整焦距。采集角膜上皮、上皮神經(jīng)纖維叢、基質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞圖像。

在角膜周邊部及中央部各取3個區(qū)域進行角膜神經(jīng)纖維主干密度（corneal nerve libre density，CNLD）、角膜神經(jīng)纖維分支密度（corneal nerve branch density，CNBD）、角膜神經(jīng)纖維密度（corneal nerve fiber density，CNFD）以及角膜神經(jīng)纖維彎曲度（corneal nerve fiber tortuosity，CNFT）測定，應用NAVIS圖像分析軟件進行細胞密度計算，所有結(jié)果取3個視野進行計數(shù)后取平均值。角膜上皮下CNFT分為4級，級別越高說明神經(jīng)纖維走行越彎曲。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 角膜結(jié)構(gòu)形態(tài)學改變

激光共焦顯微鏡下可見隨著角膜塑形鏡配戴時間的增加，角膜上皮層厚度有所變薄，但角膜上皮細胞并無明顯改變，沒有出現(xiàn)角膜上皮內(nèi)微小囊樣變、高反光物等，角膜上皮朗格漢斯細胞、翼狀細胞未見明顯改變，見圖1。

2.2 配戴角膜塑形鏡前后患者角膜神經(jīng)主干、分支、密度情況比較

配戴前后，患者角膜中央及中周邊CNLD、CNBD、CNFD比較，差異均無統(tǒng)計學意義（>0.05），見表1。患者角CNFT隨著角膜塑形鏡配戴時間的增加而增加，見表2。

圖1 配戴角膜塑形鏡18個月后激光共焦顯微鏡圖

A、B.雙眼角膜上皮下神經(jīng)纖維密度、走行未見明顯變化；C.角膜內(nèi)皮細胞形態(tài)數(shù)量正常；D.基質(zhì)細胞結(jié)構(gòu)正常

表1 配戴角膜塑形鏡前后患者CNLD、CNBD、CNFD比較（，個/mm2，n=102）

表2 配戴角膜塑形鏡前后患者CNFT變化（%，n=102）

2.3 配戴角膜塑形鏡前后患者角膜內(nèi)皮細胞數(shù)比較

配戴前患者的角膜內(nèi)皮細胞數(shù)為（3234.26±234.35）個/mm2，配戴1個月、3個月、6個月、12個月、18個月時，患者的角膜內(nèi)皮細胞數(shù)分別為（3228.89±299.76）個/mm2、（3206.67±267.89）個/mm2、（3189.57±324.67）個/mm2、（3187.78±235.81）個/mm2、（3196.56±198.67）個/mm2，隨著配戴時間的增加，角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量比較，差異無統(tǒng)計學意義（=1.037，0.302）。

3 討論

激光共焦顯微鏡為角膜神經(jīng)研究提供了新的方法，可隨時在活體狀態(tài)對角膜神經(jīng)的改變進行重復觀察。本研究利用激光共焦顯微鏡對配戴角膜塑形鏡不同時期的角膜形態(tài)進行檢測，隨著角膜塑形鏡配戴時間的增加，角膜上皮細胞形態(tài)、排列無明顯變化，無明顯的上皮脫落，未發(fā)現(xiàn)上皮內(nèi)的微小囊腫，高反光物，角膜小滴等，角膜上皮朗格漢斯細胞、翼狀細胞未見明顯改變。這與硬性角膜接觸鏡的高透氧率有關(guān)，其對角膜氧飽和度狀態(tài)影響較小。

本研究結(jié)果顯示，在配戴角膜塑形鏡前及配戴后18個月時，角膜中周邊及中央上皮下神經(jīng)纖維密度變化比較，差異無統(tǒng)計學意義。這可能與其低親水性材料，能抗蛋白質(zhì)與脂質(zhì)沉淀，以及對患者加強護理宣教，日常護理中不斷規(guī)范操作和每周1次的除蛋白、定期更換鏡片等有關(guān)，可維護鏡片的高透氧力，有利于角膜健康狀態(tài)的維持，使得角膜組織的慢性缺氧改變輕微。有學者通過1個月短期研究發(fā)現(xiàn)，配戴角膜塑形鏡后上皮下神經(jīng)密度與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義，但角膜敏感性較配戴前降低[2]。

目前對于眼干燥癥對角膜基底層下神經(jīng)密度的影響也存在不同的研究結(jié)果。有研究顯示，眼干燥癥患者角膜基底層下神經(jīng)密度均顯著低于對照組，同時另有研究并未發(fā)現(xiàn)神經(jīng)密度的改變，甚至有研究證明干燥綜合征患者的角膜神經(jīng)密度增加[3-5]。Labbe等[6]研究發(fā)現(xiàn)眼干燥癥患者角膜下神經(jīng)密度與中央角膜敏感度呈正相關(guān)，另有一些研究未發(fā)現(xiàn)基底層下神經(jīng)密度有變化[7]。出現(xiàn)不同結(jié)果的原因，可能是各項研究納入患者的眼干燥癥病情分級和嚴重程度不同[8]。但各項研究均發(fā)現(xiàn)眼干燥癥患者角膜基底層下神經(jīng)彎曲度及反光程度增加[9-10]。本研究結(jié)果顯示，配戴角膜塑形鏡后中周邊角膜基底層下神經(jīng)主干、分支密度雖有所增加，但差異無統(tǒng)計學意義，且隨著配戴時間的增加，患者CNFT增加，這可能與角膜塑形鏡配戴后有眼部干澀，知覺減退有關(guān)。

有研究發(fā)現(xiàn)配戴角膜塑形鏡后淚膜穩(wěn)定性降低[11]。角膜塑形鏡后表面由多個弧段組成，與角膜上皮直接接觸，可直接刺激角膜上皮，同時受刺激的上皮細胞會產(chǎn)生花生四烯酸，P450細胞色素代謝通道產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可誘發(fā)角膜慢性炎癥反應，導致角膜上皮排列疏松[12]。本研究結(jié)果顯示，比較角膜塑形鏡配戴前后患者的角膜內(nèi)皮細胞數(shù)，差異無統(tǒng)計學意義，這與王帥等[13]的研究結(jié)果一致。角膜內(nèi)皮細胞對維持角膜透明有著至關(guān)重要的作用，本研究結(jié)果顯示，患者配戴角膜塑形鏡后，未發(fā)現(xiàn)細胞中除正常結(jié)構(gòu)外的異常物質(zhì)沉積和內(nèi)皮失代償現(xiàn)象，說明配戴角膜塑形鏡對角膜組織的影響較小。

綜上所述，角膜塑形鏡的材料具有較高的透氧性，只要掌握驗配的適應證及方法，其具有較好的安全性，可在臨床中普及應用。未來應進一步深入研究長期配戴角膜塑形鏡對角膜的影響，為指導患者用鏡及臨床醫(yī)生如何合理應用角膜塑形鏡提供科學有效的依據(jù)。

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Effects of wearing orthokeratology lens on corneal subepithelial nerve fibers

Department of Optometry, Ningbo Eye Hospital, Ningbo 325040, Zhejiang, China

To investigate the changes of corneal in patients wearing orthokeratology lens for one and a half years by laser confocal microscopy.A total of 102 patients (186 eyes) who were fitted with orthokeratology lenses at Ningbo Eye Hospital from January 2019 to December 2019 were selected to observe the data changes in corneal epithelial and subepithelial nerve fibre density, number of branches, curvature, and endothelium of the corneas of the patients before wearing and after 1 month, 3 months, 6 months, 12 months, and 18 months of wearing.The thickness of the corneal epithelial layer thinned with the increase of orthokeratology lens wearing time, but the corneal epithelial cells did not change significantly. Comparison of corneal epithelial cells, corneal nerve fibre trunk density, corneal nerve fibre branch density, corneal nerve fibre density, and corneal endothelial cell counts before and after orthokeratology lens wear was not statistically significant (>0.05). Corneal nerve fibre curvature increased with the increase of orthokeratology lens wearing time. Comparison of the number of corneal endothelial cells before and after wear showed no statistically significant difference (>0.05).Corneal orthokeratology lens have a good safety profile and can be used to control the progression of myopia in adolescents.

Orthokeratology; Laser confocal microscopy; Corneal; Subepithelial nerve fibers

R772.2

A

10.3969/j.issn.1673-9701.2023.23.003

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃項目（2019KY631）

吳曉蘭，電子信箱：wuxiaolan2006@163.com

（2022–10–24）

（2023–07–24）