管慶林 樸晟源 秦艷青 王俊 向歡 張華述 雷云康 趙銘欽

摘要：為給高香氣雪茄煙葉生產(chǎn)提供技術(shù)參考，本試驗以主栽雪茄煙品種德雪l號為材料，以生產(chǎn)上常規(guī)施肥為對照（CK），設(shè)計6個不同中微量元素配施處理（CK+Mg、CK+S、CK+Mg+S+Zn、CK+Mg+S+Mn、CK+Mg+S+B和CK+Mg+S+Zn+Mn+B），研究其對發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香成分、非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的影響，并分析發(fā)酵后煙葉中性致香成分與非揮發(fā)性有機(jī)酸含量間的相關(guān)性。結(jié)果表明，中微量元素配施顯著提高發(fā)酵后煙葉類胡蘿h素降解產(chǎn)物、類西柏烷類降解產(chǎn)物、葉綠素降解產(chǎn)物含量，提高中性致香物質(zhì)及非揮發(fā)有機(jī)酸總量。煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸總量與2-乙?；量?、新植二烯呈顯著正相關(guān)，與B-大馬酮含量呈極顯著正相關(guān)；與苯甲醇、苯乙醇、5-甲基糠醛和巨豆三烯酮3含量呈顯著負(fù)相關(guān)，與芳樟醇、2，6-壬二烯醛、芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物及其它類香氣成分總量呈極顯著負(fù)相關(guān)。處理間綜合比較，T2處理（CK+S）發(fā)酵后煙葉類胡蘿卜素降解產(chǎn)物和螺巖蘭草酮、藏花醛、愈創(chuàng)木酚含量最高，其它類香氣成分及中性致香成分總量也最高，非揮發(fā)性有機(jī)酸含量適宜，2-乙?；秽⑿轮捕?、B-大馬酮和其它類香氣等致香成分含量積累俱佳。綜之，中微量元素合理配施有利于促進(jìn)發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香成分積累，改善煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸類物質(zhì)含量，提高雪茄煙葉香氣可用性。

關(guān)鍵詞：中微量元素；雪茄煙；發(fā)酵后煙葉；中性致香成分；非揮發(fā)性有機(jī)酸；相關(guān)性

中圖分類號：S572.01 文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942（2023）02-0110-09

雪茄煙作為一種特殊的煙草制品，具有香氣量足、吃味濃、勁頭大、煙氣醇厚且豐富多變等特點，并且其抽吸方式?jīng)Q定雪茄煙對香氣的要求更高。香氣是評定雪茄煙葉及其制品品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)，而中性致香物質(zhì)的組成、含量和平衡比例綜合影響著煙葉、煙氣香氣狀況和風(fēng)格特色。當(dāng)前，煙葉香氣不足是制衡雪茄煙葉原料品質(zhì)提升的主要因素，而非揮發(fā)性有機(jī)酸雖然對煙葉煙氣和香氣沒有明顯的直接作用，但可以中和堿性香氣物質(zhì)，使吸味醇和，增加煙氣濃度，間接影響香氣質(zhì)量。由于雪茄煙葉香氣品質(zhì)除受栽培、晾制技術(shù)等因素影響外，發(fā)酵工藝也尤為重要，發(fā)酵后煙葉刺激性和青雜氣降低可使煙葉內(nèi)含物質(zhì)更協(xié)調(diào)，香氣和吃味更顯露。因此，研究發(fā)酵后雪茄煙中性致香物質(zhì)和非揮發(fā)性有機(jī)酸含量對改善雪茄煙葉的香氣特征具有重要意義。

大中微量元素對煙草非揮發(fā)性有機(jī)酸及香氣物質(zhì)的積累具有重要作用。有研究表明，氮素是煙堿的重要組成成分，對煙葉香氣組成、吸味及刺激性均有重要作用：磷素參與煙葉體內(nèi)的各種化學(xué)過程和生物代謝過程，間接影響煙草的香吃味；施用鉀肥能影響煙株體內(nèi)各種內(nèi)含物質(zhì)的積累，顯著改善煙葉香吃味，降低焦油含量；過量施硫肥會使煙葉油分較少，香氣質(zhì)與香氣量較差，雜氣與刺激性較大；適量施Mg2+可增加質(zhì)體色素含量，提高煙葉品質(zhì)。陳麗鵑等研究發(fā)現(xiàn)，在火山灰土上增施硫酸鋅和硼砂能提高烤煙煙葉質(zhì)體色素降解產(chǎn)物、糠醛、糠醇和苯甲醇等揮發(fā)性香氣物質(zhì)的含量。同時，李國明等研究也發(fā)現(xiàn)，鎂、錳可通過影響葉綠素的合成以及多種酶的活化作用，對三羧酸循環(huán)產(chǎn)生影響，進(jìn)而調(diào)控?zé)煵萦袡C(jī)酸、高級脂肪酸以及萜類化合物的合成。目前，關(guān)于雪茄煙中性致香成分以及非揮發(fā)性有機(jī)酸與煙葉品質(zhì)關(guān)系的研究主要集中于晾制和發(fā)酵措施方面，而從中微量元素配施角度對發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香成分和非揮發(fā)性有機(jī)酸含量影響的研究暫未見報道。為此，本試驗以當(dāng)?shù)厣a(chǎn)上常規(guī)施肥為對照，研究在此施肥水平基礎(chǔ)上配施不同種類中微量元素對發(fā)酵后煙葉中性致香物質(zhì)和非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的影響，并對非揮發(fā)性有機(jī)酸與各香氣組分含量間的關(guān)系進(jìn)行分析，旨在為四川優(yōu)質(zhì)高香氣雪茄煙葉生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)途徑。

1材料與方法

1.1試驗材料

試驗于2021年在四川省什邡市師古鎮(zhèn)洛陽村（東經(jīng)104°04′，北緯31°10′，海拔543 m）進(jìn)行。試驗地土壤為水稻土，有機(jī)質(zhì)含量31.24g／kg、堿解氮120.42 mg/kg、速效磷38.14 mg/kg、速效鉀89.14 mg/kg、交換性鎂50.54 mg/kg、有效硫23.93mg/kg、有效鋅0.63 mg/kg、有效錳3.95 mg/kg、有效硼0.49 mg/kg，pH值6.33。

供試雪茄煙品種為德雪1號。MgO、硫磺粉、硼砂、ZnSO4和MnSO4購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2試驗設(shè)計

參考前人研究，試驗共設(shè)7個處理，具體設(shè)計見表1。隨機(jī)區(qū)組排列，重復(fù)3次。小區(qū)面積66.7m2。于2月10日采用漂浮育苗法育苗，于4月20日（六葉一心）移栽。煙株行距120cm，株距40 cm。

按照當(dāng)?shù)厣a(chǎn)方案進(jìn)行起壟和常規(guī)施肥，Mg0、硫磺粉、ZnS04、MnS04、硼砂均于移栽前穴施。每處理按純N 165 kg/hm2計施，施肥比為N：P2O5；K2O為1：0.8：2?；蕳l施，用量為60％的硝酸鉀（N：P2O5：K20=13：0：46）、100％的煙草專用復(fù)合肥（N：P20S：KZO=10：20：20）和油菜餅肥（N：P205：K20=3.5：2.5：1.5），移栽后35 d再追施40%的硝酸鉀。其它田間農(nóng)事操作與調(diào)制管理均按當(dāng)?shù)貎?yōu)質(zhì)雪茄煙葉生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范統(tǒng)一進(jìn)行。

1.3取樣方法

各處理均取發(fā)酵后中部二級煙葉3 kg，60℃烘干，粉碎過篩，進(jìn)行中性致香物質(zhì)和非揮發(fā)性有機(jī)酸含量測定。

1.4測定項目與方法

1.4.1非揮發(fā)性有機(jī)酸含量測定 采用《煙草及煙草制品多元酸的氣相色譜法》（YC/T 288-2009）測定蘋果酸、檸檬酸、丙二酸和草酸等含量。

1.4.2中性致香物質(zhì)含量測定 采用美國安捷侖7890B-5977E型氣一質(zhì)聯(lián)用儀測定煙葉中性致香物質(zhì)含量。樣品前處理過程：于1 000 mL圓底燒瓶中加入粉末狀煙葉20g、檸檬酸2 g和蒸餾水600 mL，置于同時蒸餾裝置一側(cè)，另一側(cè)250mL圓底燒瓶中加入二氯甲烷40 mL和內(nèi)標(biāo)（硝基苯）1 mL，同時置于60℃水浴中，打開通水閥，待樣品沸騰分層時計時2.5 h，收集有機(jī)相。加入無水硫酸鈉10 g左右，搖勻澄清后轉(zhuǎn)移至雞心瓶，并置于60℃水浴中濃縮有機(jī)相至1 mL左右即可。

GC/MS分析條件如下。色譜柱：HP-5（60 mX0.25 mm，0.25um）；載氣及流速：氦氣，0.8 mL/min；進(jìn)樣口溫度：250℃；傳輸線溫度：280℃；離子源溫度：177℃。升溫程序：50℃（2 min）-2℃/min-120℃（5 min）-2℃/min-240℃（30 min）：分流比與進(jìn)樣量：1：15，2ul；電離能：70 eV；質(zhì)量數(shù)范圍：50-500 amu；MS譜庫：NIST02。

1.5數(shù)據(jù)處理與分析

采用Microsoft Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)整理及作表，DPS 7.05軟件進(jìn)行煙葉致香物質(zhì)與非揮發(fā)性有機(jī)酸含量間相關(guān)性分析（P<0.05）及處理間多重比較（Duncan's）。

2結(jié)果與分析

2.1不同中微量元素配施對發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香成分含量的影響

2.1.1對發(fā)酵后雪茄煙葉類胡蘿卜素降解產(chǎn)物的影響 類胡蘿卜素降解形成的香氣物質(zhì)其香味具有閾值低、刺激性小、香氣貢獻(xiàn)率大的特點，如B-大馬酮、巨豆三烯酮、二氫獼猴桃內(nèi)酯，可增加煙葉的花香和甜香，降低煙氣的刺激性。從表2中可以看出，各處理類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量均顯著高于CK，表現(xiàn)為T2>T3>T5>T4>T1>T6>CK，因此單從類胡蘿卜素降解產(chǎn)物方面考慮，T2處理有利于產(chǎn)生香氣豐韻的煙葉，其次為T3。從不同降解產(chǎn)物含量分布看，不同處理間差異較大：T3處理B-環(huán)檸檬醛、B-大馬酮和B-二氫大馬酮含量顯著高于其它處理：T6處理6-甲基-5-庚烯-2-醇、法尼基丙酮含量最高：T6和T1處理香葉基丙酮含量顯著高于其余處理，但兩者間差異不顯著；對照（CK）6-甲基-5-庚烯- 2-酮含量最高：T2處理巨豆三烯酮1、巨豆三烯酮2、巨豆三烯酮3、巨豆三烯酮4、異佛爾酮、二氫獼猴桃內(nèi)酯和3-羥基-B-二氫大馬酮含量均最高，且各降解產(chǎn)物含量也較為平衡。說明中微量元素合理配施有利于提高類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量，而單施硫處理效果則更為顯著。

2.1.2對發(fā)酵后雪茄煙葉芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物的影響 由表3可知，與CK相比，T3處理可顯著提高發(fā)酵后煙葉芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物含量，增幅達(dá)3.16%。T2處理芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物總量與T1相當(dāng)，T5、T6和T4處理含量較低且處理間差異顯著，并均顯著低于CK。4種產(chǎn)物中苯乙醛含量相對較高，尤其是T3處理，其含量占芳香族氨基酸類香氣代謝產(chǎn)物總量的54.89%，這對增加煙葉果香香氣有重要作用。

2.1.3對發(fā)酵后雪茄煙葉棕色化反應(yīng)產(chǎn)物含量的影響 棕色化反應(yīng)產(chǎn)物與煙草堅果香、甜香和可可香等香味的形成密切相關(guān)，是煙葉香味的重要來源。由表4可以看出，所測6種棕色化反應(yīng)產(chǎn)物中，各處理均以糠醛含量最高，平均占總量的54.84%。不同處理間棕色化反應(yīng)產(chǎn)物含量有明顯差異，除T4外，各處理其總量較CK均顯著增加，T1、12、T3、T5、T6處理較CK分別增加8.98％、9.53%、18.58%、10.15％和11.73％。T3處理糠醇、5-甲基糠醛含量顯著高于其余處理，且處理間差異顯著：T6處理糠醛、2-乙?；量┖?，4-=甲基-2，5-呋喃二酮含量最高：T2處理2-乙?；秽孔罡?，處理間差異多達(dá)顯著水平。說明T3和T6處理對提高發(fā)酵后煙葉棕色化反應(yīng)產(chǎn)物有顯著的促進(jìn)作用。

2.1.4對發(fā)酵后雪茄煙葉類西柏烷類及葉綠素降解產(chǎn)物含量的影響 新植二烯是煙草中性致香物質(zhì)中含量最高的成分，與其降解產(chǎn)物西柏一三烯二醇都是煙葉重要的香味成分，本身具有很好的香氣，可提高煙葉香氣和吃味。而且其在煙葉燃燒過程中可作為載體捕集煙氣氣溶膠內(nèi)的香氣物質(zhì)并將之帶人煙氣中，是煙葉重要的增香劑。類西柏烷類降解產(chǎn)物茄酮及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物（茄醇、茄尼呋喃、降茄二酮等）均是煙草重要的香味物質(zhì)，其特有的雜雙環(huán)結(jié)構(gòu)使其具有特殊的香味，對改善煙草的香吃味具有重要意義。由表5可知，各處理煙葉茄酮含量均顯著高于CK，以T6最高，其次為T3，分別為37.66、35.71ug／g。不同處理煙葉新植二烯含量較CK均顯著增加，表現(xiàn)為T5>T2>T1>T3>T4>T6>CK，分別較CK增加44.55％、41.95%、37.29%、35.51%、33.26％和30.24％。不同處理間致香物質(zhì)總量（除去新植二烯）以T3處理最高，為214.22 ug/g，其它依次為T2、T6、T5、Tl、T4處理，均顯著高于CK。該類中性致香物質(zhì)總量范圍為701.25-961.83 ug/g，除T4和T6處理間無顯著差異外，其余各處理間差異均達(dá)到顯著水平，且均顯著高于CK。茄酮占該類中性致香物質(zhì)總量（除新植二烯）比率的范圍為0.1121-0.1933，T6處理最高，T3次之，為16.67%，各處理間差異顯著：而新植二烯占該類中性致香物質(zhì)總量的比率以T4和T5處理最高，且二者間無顯著差異。

2.1.5對發(fā)酵后雪茄煙葉其它類香氣成分含量的影響 由表6可以看出，煙葉其它類香氣成分中，不同處理間螺巖蘭草酮、藏花醛、愈創(chuàng)木酚、2，6-壬二烯醛含量及其總量均以T2處理最高，均顯著高于CK;CK芳樟醇含量顯著高于其它各處理，為1.38 ug/g。

2.2不同中微量元素配施對發(fā)酵后雪茄煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的影響

煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸具有調(diào)節(jié)煙氣酸堿性、中和游離堿、醇和吸味、平衡煙氣的作用。蘋果酸、檸檬酸和草酸等非揮發(fā)酸可與生物堿結(jié)合成鹽，調(diào)節(jié)煙氣質(zhì)子化和游離態(tài)煙堿比例，調(diào)節(jié)煙草的酸堿度，增加煙氣濃度，平衡煙氣；硬脂酸、棕櫚酸等在煙草中的含量較高，具有弱的脂蠟香，能使煙氣醇和，且有蠟味：而油酸等不飽和脂肪酸則會增加煙氣刺激性，產(chǎn)生澀味。由表7可以看出，相比CK，中微量元素配施處理大多不同程度地提高煙葉6種非揮發(fā)性有機(jī)酸含量，處理間差異顯著，但非揮發(fā)性有機(jī)酸組成和含量處理間存在明顯差異。草酸、富馬酸和蘋果酸含量以T6最高，且處理間差異顯著：T4和Tl處理丙二酸含量顯著高于其它處理：T1和T3處理丁二酸含量顯著高于其它處理：檸檬酸含量以CK最高，T6處理最低，分別為97.40、64.73 mg／g；十六酸含量除CK外，其它各處理均未檢測到：油酸含量以CK最高，顯著高于各中微量元素配施處理。以上說明中微量元素配施有利于提高蘋果酸、草酸等非揮發(fā)性酸含量，降低油酸等不飽和脂肪酸含量，醇和煙氣，降低刺激性，消除澀味。

2.3不同處理下發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香物質(zhì)與非揮發(fā)性有機(jī)酸總量間的相關(guān)性分析

由于測定的香氣物質(zhì)較多，在此僅列出與非揮發(fā)性有機(jī)酸總量相關(guān)性達(dá)到顯著水平的致香物質(zhì)。由表8可以看出，非揮發(fā)性有機(jī)酸與2-乙酰基吡咯、新植二烯含量呈顯著正相關(guān)，與B-大馬酮含量呈極顯著正相關(guān)，由此推斷配施中微量元素提高發(fā)酵后煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的同時，也可提高煙葉新植二烯、2-乙?；量┖虰-大馬酮的含量。而非揮發(fā)性有機(jī)酸含量與苯甲醇、苯乙醇、5-甲基糠醛和巨豆三烯酮3含量呈顯著負(fù)相關(guān)，與芳樟醇、2，6-壬二烯醛、芳香族氨基酸代謝產(chǎn)物和其它類香氣成分總量呈極顯著負(fù)相關(guān)，表明煙葉中非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的提高會抑制苯甲醇、苯乙醇、5-甲基糠醛、巨豆三烯酮3、芳樟醇、2，6-壬二烯醛、芳香族氨基酸代謝產(chǎn)物和其它類香氣成分的形成。

3討論

3.1中微量元素配施對發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香成分含量的影響

煙田平衡施用中微量元素可明顯改善煙葉中性致香物質(zhì)含量。葉協(xié)鋒等研究發(fā)現(xiàn)，氮磷鉀合理配施有利于烤煙類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量的積累以及煙葉香氣質(zhì)和香氣量的提高，而劉國順等研究也發(fā)現(xiàn)，施用中微量元素肥料可明顯提高類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量和中性致香物質(zhì)總量。本研究表明，中微量元素配施均可顯著增加類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量，T2處理（配施硫磺粉）效果最好：各配施處理類胡蘿卜素降解產(chǎn)物中各組分含量除6-甲基-5-庚烯-2-酮外，其余各組分含量大多高于CK。這可能是由于中微量元素配施下煙株生長關(guān)鍵時期能夠保證礦質(zhì)元素營養(yǎng)充足供應(yīng)，促進(jìn)煙株生長發(fā)育和葉綠素合成，進(jìn)而有利于煙葉香氣物質(zhì)的形成。其中，硫素營養(yǎng)可增大煙草前期的葉面積和葉綠素合成，促進(jìn)類胡蘿卜素（質(zhì)體色素）降解，利于煙葉香氣總量的提高。

韋鳳杰、齊永杰等研究發(fā)現(xiàn)，硼、鋅處理促進(jìn)葉片芳香族氨基酸類香氣物質(zhì)的形成，利于煙葉香氣總量的提高。而孫立娟等的研究則顯示，施用錳、硼元素減少芳香族氨基酸類香氣物質(zhì)總量，不利于香氣形成。本研究中，配施中微量元素除T3處理（鎂、硫和鋅配施）芳香族氨基酸類香氣成分總量高于對照外，其余各處理均低于對照。鎂、硫、硼元素配施處理芳香族氨基酸類香氣總量及苯甲醛等香氣組分含量均低于對照，這與孫立娟等的研究結(jié)果吻合。這可能是因為四川什邡當(dāng)?shù)貧夂驖駶櫠嘤?，植煙土壤中有效硼淋失較多、含量較低，煙株存在不同程度的缺硼癥狀，導(dǎo)致蛋白質(zhì)代謝和生物堿合成受阻，從而不利于芳香族氨基酸類物質(zhì)積累。

棕色化反應(yīng)產(chǎn)物是氨基和羰基化合物在一定條件下發(fā)生分子重排形成的類黑素，其香氣受反應(yīng)物的種類、溫度等條件的影響較大。本試驗結(jié)果顯示，除T4外，各處理棕色化反應(yīng)產(chǎn)物含量較CK均有所增加，以T3處理含量最高。表明配施錳元素減少葉片棕色化反應(yīng)產(chǎn)物的形成，抑制雪茄煙葉香氣總量的提高，這與聶新柏等的研究結(jié)果相反。這可能是由于四川地區(qū)的弱酸性土壤和淹水灌溉方式，使得土壤有效錳含量偏高，高錳脅迫下植物葉片輸導(dǎo)組織壞死，蛋白質(zhì)合成受阻，氨基酸類化合物含量較低，導(dǎo)致棕色化反應(yīng)進(jìn)程受阻。施鋅促進(jìn)葉片棕色化反應(yīng)產(chǎn)物的形成，提高煙葉香氣含量。這是因為鋅是多種酶的組成成分和活化劑，參與煙株的光合作用、氮素代謝進(jìn)程，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成和糖類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化，豐富棕色化反應(yīng)物的種類，進(jìn)而促進(jìn)葉片棕色化反應(yīng)產(chǎn)物的形成。

本研究還發(fā)現(xiàn)，配施中微量元素各處理煙葉茄酮、新植二烯含量均高于CK，其中茄酮含量以T6最高，新植二烯含量以T5處理最高。這可能與T6處理含有煙草正常生長發(fā)育所需的各種營養(yǎng)元素有關(guān)，均衡的養(yǎng)分促進(jìn)細(xì)胞發(fā)育、生理代謝以及物質(zhì)能量轉(zhuǎn)化，從而提高煙草萜烯類化合物和茄酮含量的積累。而硼元素參與葉綠素的合成，施硼可提高煙草葉綠素含量，進(jìn)而在葉綠素酶的作用下生成新植二烯和呋喃等化合物，促進(jìn)新植二烯香氣物質(zhì)的形成。

不同處理間煙葉螺巖蘭草酮、藏花醛、愈創(chuàng)木酚、2，6-壬二烯醛含量和其它類香氣總量均以施硫處理（T2）最高，表明施硫可以促進(jìn)煙葉香氣物質(zhì)的形成．改善香氣質(zhì)量，這與張曉海等的研究結(jié)果一致。原因可能是：土壤硫的供應(yīng)水平?jīng)Q定著葉肉細(xì)胞內(nèi)葉綠體蛋白上的有機(jī)硫含量，影響葉綠體的形成及其功能的正常發(fā)揮，而施硫可顯著提高葉綠素a和葉綠素b含量，且葉綠素是香氣前體物質(zhì)：同時，硫是蛋氨酸和半胱氨酸組成的必需元素，施用硫肥提高一些必需氨基酸尤其是蛋氨酸含量，為煙葉棕色化反應(yīng)提供反應(yīng)物。

3.2中微量元素配施對發(fā)酵后雪茄煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的影響

中性致香物質(zhì)、非揮發(fā)性有機(jī)酸的組成和含量與煙葉香味品質(zhì)有密切關(guān)系。本研究結(jié)果表明，配施中微量元素提高發(fā)酵后煙葉的非揮發(fā)性有機(jī)酸含量，降低檸檬酸、十六酸和油酸的含量，這與葉協(xié)鋒、張豹林等的研究結(jié)果相吻合。各配施處理中非揮發(fā)性有機(jī)酸總量以T4處理（配施Mg0、硫磺粉和MnSO4）最高，這可能是錳元素通過影響葉綠素合成以及多種酶的活化作用對三羧酸循環(huán)產(chǎn)生作用，進(jìn)而促進(jìn)煙草有機(jī)酸及高級脂肪酸含量的積累。

3.3中微量元素配施下發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香物質(zhì)與非揮發(fā)性有機(jī)酸總量間的相關(guān)性分析

煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸與中性致香物質(zhì)含量間的相關(guān)性比較密切。其中，非揮發(fā)性有機(jī)酸與2-乙?；量?、新植二烯、B-大馬酮含量呈顯著或極顯著正相關(guān)，而與苯甲醇、苯乙醇、5-甲基糠醛、巨豆三烯酮3、芳樟醇、2，6-壬二烯醛、芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物和其它類香氣成分總量呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān)。說明非揮發(fā)性有機(jī)酸在煙草中可通過參與碳水化合物、含氮化合物的合成以及酶或非酶的作用，活化催化香味物質(zhì)形成的原料，進(jìn)而影響致香物質(zhì)的形成，但其具體的分子機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

4結(jié)論

在當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)施肥基礎(chǔ)上配施中微量元素顯著提高發(fā)酵后煙葉類胡蘿h素降解產(chǎn)物、類西柏烷類產(chǎn)物、葉綠素降解產(chǎn)物含量，提高中性致香物質(zhì)及非揮發(fā)性有機(jī)酸總量，改善煙葉香氣質(zhì)量。煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸與致香物質(zhì)間的相關(guān)性分析表明，非揮發(fā)性有機(jī)酸與2-乙酰基吡咯、新植二烯、B-大馬酮含量呈顯著或極顯著正相關(guān)，與苯甲醇、苯乙醇、5-甲基糠醛、巨豆三烯酮3、芳樟醇、2，6-壬二烯醛及芳香族氨基酸類代謝產(chǎn)物、其它類香氣成分總量呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān)。處理間比較，T2處理（CK+S）發(fā)酵后煙葉類胡蘿卜素降解產(chǎn)物和螺巖蘭草酮、藏花醛、愈創(chuàng)木酚含量最高，其它類香氣物質(zhì)及中性致香物質(zhì)總量也最高，非揮發(fā)性有機(jī)酸含量適宜，2-乙?；秽⑿轮捕?、B-大馬酮以及其它類香氣等成分含量積累俱佳，利于高香氣雪茄煙葉的形成。本研究得出的中微量元素配施下發(fā)酵后雪茄煙葉中性致香物質(zhì)和非揮發(fā)性有機(jī)酸含量的積累規(guī)律，可為四川高香氣雪茄煙葉開發(fā)提供理論參考。