沙 靜,陳秀華,胡雪靚,李 莉

(1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院 婦產(chǎn)科,新疆 烏魯木齊830092;2.新疆維吾爾自治區(qū)婦幼保健,新疆 烏魯木齊830001;3.新疆維吾爾自治區(qū)腫瘤醫(yī)院 婦外一科,新疆 烏魯木齊830011)

宮頸癌為女性群體常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,宮頸鱗癌為其常見病理類型,疾病為宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤變(CIN)至浸潤(rùn)性癌的持續(xù)進(jìn)展過程[1-2]。宮頸鱗癌具備發(fā)病隱匿、進(jìn)展緩慢等特征,疾病早期多無特異性臨床表現(xiàn),出現(xiàn)癥狀就診時(shí)疾病通常已屬中晚期,喪失最佳治療時(shí)機(jī)[3-4]。因此,如何對(duì)疾病進(jìn)行準(zhǔn)確的評(píng)估以指導(dǎo)臨床進(jìn)行針對(duì)性治療,從而保證疾病預(yù)后轉(zhuǎn)歸效果仍是研究熱點(diǎn)。臨床研究指出,宮頸鱗癌為多種基因協(xié)同作用的結(jié)果,故通過測(cè)定腫瘤細(xì)胞特異性抗原對(duì)疾病進(jìn)行評(píng)估成為可能[5]。P53為臨床公認(rèn)抑癌基因,其失活/突變和多種惡性腫瘤疾病的發(fā)病及進(jìn)展具有密切關(guān)聯(lián)性,其過表達(dá)狀態(tài)和腫瘤病情及預(yù)后密切相關(guān),同時(shí),腫瘤患者中P53喪失保護(hù)基因組完整性的作用[6]。Ki67為重要的核增殖標(biāo)記物,可預(yù)測(cè)宮頸癌、宮頸炎發(fā)病及進(jìn)展,其異常表達(dá)可反映宮頸鱗癌細(xì)胞生物學(xué)行為[7]。ELF5為Ets轉(zhuǎn)錄因子家族重要成員,可對(duì)細(xì)胞發(fā)育與分化凋亡予以調(diào)節(jié),還可影響細(xì)胞增殖、腫瘤發(fā)病[8]?；诖?本研究選取新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院宮頸鱗癌患者進(jìn)行分析研究,旨在明確宮頸鱗癌患者組織中ELF5、Ki67、P53表達(dá)特征及與疾病分期、預(yù)后的關(guān)聯(lián)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年5月—2021年9月新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院宮頸鱗癌患者30例設(shè)為宮頸鱗癌組、低級(jí)別CIN患者20例設(shè)為低級(jí)別CIN組、高級(jí)別CIN患者20例設(shè)為高級(jí)別CIN組、慢性宮頸炎患者20例設(shè)為慢性宮頸炎組。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)宮頸鱗癌組符合《宮頸癌診斷與治療指南(第四版)》[9]中宮頸鱗癌診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)經(jīng)病理檢查確診;(3)臨床資料完整;(4)均有術(shù)后隨訪,主要包括門診、電話及微信隨訪。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)存在其他良惡性腫瘤者;(2)妊娠期、哺乳期女性;(3)納入研究前接受放化療等相關(guān)治療者;(4)存在免疫系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)病變者;(5)存在全身性感染性疾病者。宮頸鱗癌組年齡39～71歲,平均(54.97±12.05)歲,疾病FIGO分期:Ⅰ期7例、Ⅱ期14例、Ⅲ期9例;低級(jí)別CIN組年齡36～70歲,平均(56.01±10.97)歲;高級(jí)別CIN組年齡35～73歲,平均(55.45±11.71)歲;慢性宮頸炎組年齡31～76歲,平均(55.79±10.82)歲。四組年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 方法

標(biāo)本均來自2019年5月—2021年9月新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院婦科行手術(shù)治療的患者在病理科存檔的組織蠟塊,采取免疫組織化學(xué)法測(cè)定各個(gè)組織內(nèi)P53、Ki67、ELF5表達(dá)情況,經(jīng)顯微鏡輔助進(jìn)行閱片:P53、Ki67、ELF5陽性細(xì)胞定位在細(xì)胞核,以出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒作評(píng)定標(biāo)準(zhǔn),參照染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比值評(píng)定為陽性/陰性;陽性細(xì)胞比例:0分:<1%,1分:1%～25%,2分:26%～50%,3分:51%～75%,4分:>75%;染色強(qiáng)度:0分:無染色,1分:淺棕黃色,2分:棕黃色,3分:棕褐色;陽性細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度乘積為0～2分評(píng)定為陰性,乘積≥3分則評(píng)定為陽性[10];P53、Ki67、ELF5單克隆抗體均購(gòu)于北京博奧森生物技術(shù)有限公司,三者均制作2張切片一同上機(jī)實(shí)施染色處理,封片后由科室內(nèi)經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師2名通過雙盲法閱片,若意見存在不同則重新染色后再次閱片,并商討結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)統(tǒng)計(jì)4組P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況。(2)統(tǒng)計(jì)宮頸鱗癌組不同F(xiàn)IGO分期、患者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況。(3)統(tǒng)計(jì)分析P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況與宮頸鱗癌FIGO分期的關(guān)聯(lián)性。(4)統(tǒng)計(jì)不同預(yù)后(將治療后12個(gè)月內(nèi)影像學(xué)檢查疾病進(jìn)展、復(fù)發(fā)者分為預(yù)后不良,其余評(píng)定為預(yù)后良好)的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較

宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達(dá)率(33.33%)低于低級(jí)別CIN組(85.00%)、高級(jí)別CIN組(75.00%)、慢性宮頸炎組(90.00%),P53、Ki67陽性表達(dá)率(76.67%、83.33%)高于低級(jí)別CIN組(20.00%、25.00%)、高級(jí)別CIN組(45.00%、55.00%)、慢性宮頸炎組(5.00%、5.00%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較[n(%)]

2.2 不同F(xiàn)IGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較

不同F(xiàn)IGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且隨著FIGO分期增高,ELF5陽性表達(dá)率持續(xù)降低,P53、Ki67陽性表達(dá)率持續(xù)增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 不同F(xiàn)IGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較[n(%)]

2.3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關(guān)聯(lián)性分析

檢驗(yàn)可知,P53、Ki67陽性表達(dá)率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著正相關(guān)關(guān)系,ELF5陽性表達(dá)率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05),見表3。

表3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關(guān)聯(lián)性分析

2.4 不同預(yù)后者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較

本組30例患者中預(yù)后良好者19例、預(yù)后不良者11例(其中疾病復(fù)發(fā)9例、病死2例),預(yù)后不良者ELF5陽性表達(dá)率(10.53%)低于預(yù)后良好者(72.73%),P53、Ki67陽性表達(dá)率(94.74%、100.00%)高于預(yù)后良好者(45.45%、45.45%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 不同預(yù)后者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況比較[n(%)]

3 討論

宮頸鱗癌在女性群體中較常見,近年來其發(fā)病率持續(xù)增高,且發(fā)病人群趨向年輕化,對(duì)患者身心健康及生存質(zhì)量均造成了嚴(yán)重威脅[11]。研究指出,宮頸鱗癌主要是由癌前病變(CIN)逐漸進(jìn)展至浸潤(rùn)性癌,但CIN不一定均會(huì)進(jìn)展為惡性腫瘤,CIN發(fā)病至進(jìn)展為宮頸癌通常需10年左右,受疾病缺乏典型表現(xiàn)及主觀因素等影響,導(dǎo)致其存在一定的誤診或漏診風(fēng)險(xiǎn),以致部分患者接受了過度治療[12-13]。因此,準(zhǔn)確對(duì)疾病進(jìn)行診斷評(píng)估極為重要,可保證治療方案的針對(duì)性及有效性。

隨著臨床研究深入發(fā)現(xiàn),細(xì)胞生長(zhǎng)周期紊亂在腫瘤疾病發(fā)生及進(jìn)展中具有重要作用,P53基因?yàn)榕R床已知的和腫瘤疾病關(guān)聯(lián)性最緊密的抑癌基因,P53產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞核,屬細(xì)胞周期相關(guān)蛋白[14]。同時(shí),P53蛋白包括突變型及野生型,其中突變型P53蛋白在惡性腫瘤組織內(nèi)呈異常高表達(dá)狀態(tài),且無抑癌作用,可促進(jìn)細(xì)胞過度增殖,造成腫瘤發(fā)病與惡變;野生型P53蛋白則于正常細(xì)胞內(nèi)呈低表達(dá)[15]。白菊萍等[16]研究結(jié)果顯示,慢性炎癥組、CIN組及宮頸癌組患者P53陽性表達(dá)情況存在顯著差異,且隨著病情程度加劇而持續(xù)增高。本研究結(jié)果表明,宮頸鱗癌組P53陽性表達(dá)率高于低級(jí)別CIN組、高級(jí)別CIN組、慢性宮頸炎組,且不同疾病分期的宮頸鱗癌患者P53陽性表達(dá)率存在顯著差異(P<0.05),與上述學(xué)者研究結(jié)果具有一致性,表明P53過表達(dá)在宮頸鱗癌發(fā)病與進(jìn)展過程中具有重要作用,通過測(cè)定其水平可對(duì)宮頸鱗癌的早期診斷提供一定參考依據(jù)。

Ki67屬細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白,在腫瘤細(xì)胞增殖能力評(píng)估中具有重要作用,其表達(dá)情況和惡性腫瘤惡性程度、預(yù)后存在密切關(guān)聯(lián)性,可參與惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移及侵襲等過程[17]。臨床研究證實(shí),Ki67可作為評(píng)估惡性腫瘤人群高危個(gè)體的重要生物學(xué)標(biāo)記物,其陽性表達(dá)和多種惡性腫瘤發(fā)病與進(jìn)展、轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)等關(guān)系密切[18]。另有研究指出,多種惡性腫瘤和癌前病變患者Ki67均為過表達(dá),故推測(cè)Ki67可能為原癌基因,其陽性表達(dá)過高可造成惡性腫瘤發(fā)病及進(jìn)展[19]。錢琳等[20]對(duì)宮頸鱗癌患者組織內(nèi)Ki67表達(dá)情況進(jìn)行探究,結(jié)果顯示宮頸鱗癌患者陽性表達(dá)率異常增高(80.8%),且侵襲浸潤(rùn)者Ki67陽性表達(dá)率(92.6%)高于無侵襲浸潤(rùn)者(60.0%)。劉瑞等[21]研究也證實(shí),宮頸鱗癌患者及高/低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變患者Ki67呈高表達(dá)狀態(tài),并隨病變級(jí)別增高而增高。本研究結(jié)果顯示,宮頸鱗癌組Ki67陽性表達(dá)率高于低級(jí)別CIN組、高級(jí)別CIN組、慢性宮頸炎組,且隨著疾病分期增高,宮頸鱗癌患者Ki67陽性表達(dá)率持續(xù)增高(P<0.05),與上述學(xué)者研究結(jié)果相一致,提示宮頸鱗癌發(fā)病及進(jìn)展中細(xì)胞增殖活性持續(xù)強(qiáng)化,進(jìn)一步證實(shí)宮頸鱗癌發(fā)病為逐漸進(jìn)展的過程,Ki67在CIN和宮頸鱗癌的診斷評(píng)估中也具有重要作用。

此外,Ets家族成員可調(diào)節(jié)細(xì)胞發(fā)育、增殖、分化、凋亡等生理活動(dòng),ELF5為Ets家族重要成員,其包括2個(gè)可辨別結(jié)構(gòu)域,即1個(gè)包含所有Ets轉(zhuǎn)錄因子且可結(jié)合TTCC核心序列的基因序列與1個(gè)參與蛋白相互作用的結(jié)構(gòu)域[22]。當(dāng)前臨床關(guān)于ELF5的研究多集中于乳腺癌、乳腺細(xì)胞等,ELF5主要由乳腺導(dǎo)管前體細(xì)胞生成,為乳腺腺泡細(xì)胞發(fā)育的調(diào)節(jié)因子,不僅能影響腺泡細(xì)胞,且能調(diào)節(jié)妊娠期乳腺泌乳小泡結(jié)構(gòu),影響胚胎形成和乳腺小泡增生[23]。近年來臨床研究證實(shí),ELF5屬潛在腫瘤抑制因子,其在惡性腫瘤發(fā)病與進(jìn)展過程中可發(fā)揮抑癌基因作用,細(xì)胞系內(nèi)ELF5表達(dá)降低,故推測(cè)調(diào)節(jié)ELF5轉(zhuǎn)錄水平可為惡性腫瘤的臨床治療提供新的方向[24]。本研究對(duì)宮頸疾病患者組織內(nèi)ELF5表達(dá)情況進(jìn)行探究,結(jié)果顯示宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達(dá)率低于低級(jí)別CIN組、高級(jí)別CIN組、慢性宮頸炎組,且ELF5陽性表達(dá)率與宮頸鱗癌患者FIGO分期存在顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05),表明ELF5在宮頸鱗癌發(fā)病及進(jìn)展中也具有重要作用。本研究對(duì)不同預(yù)后的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達(dá)情況進(jìn)行探究,結(jié)果顯示預(yù)后不良者ELF5陽性表達(dá)率低于預(yù)后良好者,P53、Ki67陽性表達(dá)率高于預(yù)后良好者(P<0.05),上述指標(biāo)在宮頸鱗癌的預(yù)后預(yù)測(cè)中具有較高價(jià)值,可通過測(cè)定上述指標(biāo)陽性表達(dá)情況對(duì)宮頸鱗癌的預(yù)后進(jìn)行早期預(yù)測(cè),指導(dǎo)臨床制定或調(diào)整干預(yù)方案,保證疾病良好轉(zhuǎn)歸。

綜上所述,宮頸鱗癌組織中P53、Ki67情況異常增高,其增高幅度與疾病分期具有密切關(guān)聯(lián)性,ELF5在宮頸鱗癌組織表達(dá)降低,且不同預(yù)后情況者上述指標(biāo)表達(dá)間存在顯著差異,其可用于疾病預(yù)后的預(yù)測(cè)。