張崢嶸,高 峰,楊紹杰,王訓(xùn)翠,姬曼曼,朱國(guó)旗

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)新安醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽 合肥 230012)

創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(post-traumatic stress disorder,PTSD)是指一個(gè)人暴露于極端的壓力或者經(jīng)歷創(chuàng)傷事件后出現(xiàn)的嚴(yán)重心理創(chuàng)傷。目前對(duì)PTSD的治療仍以心理干預(yù)為主［1］,臨床治療遠(yuǎn)低于預(yù)期,故尋找有效治療PTSD藥物仍是巨大挑戰(zhàn)。PTSD屬于情志病,主要由驚恐所致,驚恐?jǐn)_亂心神而致心氣虛,過恐而致腎精不足［2］。安神定志方(Anshen Dingzhi Prescription,ADP)是《醫(yī)學(xué)心悟》中記載的新安醫(yī)學(xué)名方,由茯苓、茯神、人參、遠(yuǎn)志、石菖蒲、龍齒組成,有安神定志、益氣鎮(zhèn)驚之功效。方中茯苓治驚悸、心神不安;茯神安魂魄以養(yǎng)神;人參補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚悸;遠(yuǎn)志強(qiáng)志而益智,石菖蒲開心竅以補(bǔ)五臟;龍齒可鎮(zhèn)靜安神而解心下結(jié)氣。諸藥同用,可使神志安定、心腎皆寧,故曰“安神定志”。安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院在PTSD的治療上積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn),運(yùn)用安神定志丸加減聯(lián)合草酸艾司西酞普蘭片治療PTSD的效果顯著［3］。前期項(xiàng)目組評(píng)價(jià)了ADP對(duì)PTSD的干預(yù)作用,但其藥效物質(zhì)與作用機(jī)制尚不清楚。

本研究擬運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對(duì)接技術(shù)和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,研究ADP治療PTSD的活性成分、靶點(diǎn)、通路及生物過程,旨在闡明該方的藥效物質(zhì)及作用機(jī)制,為臨床運(yùn)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 ADP活性成分篩選 通過中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫(kù)TCMSP、TCMID、HERB數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái),以口服生物利用度≥30%、藥物相似性≥0.18作為篩選條件,結(jié)合文獻(xiàn)挖掘與整理,獲得ADP的潛在活性成分。

1.2 ADP靶點(diǎn)預(yù)測(cè) 將篩選的有效成分結(jié)構(gòu)導(dǎo)入到SwissTarget Prediction平臺(tái),限定物種為Homo Sapiens,預(yù)測(cè)ADP活性成分中的潛在蛋白質(zhì)靶點(diǎn),選取前100位靶點(diǎn)中Probability≥0.1的靶點(diǎn)為有效成分潛在靶點(diǎn),并建立靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)。

1.3 ADP治療PTSD潛在靶點(diǎn) 收集應(yīng)用TTD、DrugBank和GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)以“post-traumatic stress disorder”為關(guān)鍵詞檢索PTSD疾病靶點(diǎn)。合并3個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)果并去除重復(fù)后作為PTSD相關(guān)靶點(diǎn)。將疾病相關(guān)靶點(diǎn)與活性成分作用靶點(diǎn)取交集,將交集靶點(diǎn)視為復(fù)方治療疾病的潛在靶點(diǎn)。

1.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)篩選 在STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中導(dǎo)入潛在靶點(diǎn),選擇multiple proteins,物種選擇Homo sapines,設(shè)定最低相互作用閾值為0.4,建立PPI網(wǎng)絡(luò)。

1.5 GO和KEGG富集分析 在DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)中導(dǎo)入篩選的核心靶點(diǎn),選擇物種為Homo sapiens,并將靶點(diǎn)基因校準(zhǔn)為Official Gene Symbol,然后進(jìn)行GO生物分子功能富集分析和KEGG通路富集分析。

1.6 “藥物—成分—靶點(diǎn)—通絡(luò)”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建 基于對(duì)PTSD相關(guān)通路的篩選結(jié)果,統(tǒng)計(jì)相關(guān)通路中涉及的靶點(diǎn),以及靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)的成分。將整理的結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件中,以度值大小構(gòu)建網(wǎng)絡(luò),并篩選出ADP核心活性成分、核心靶點(diǎn)和核心通路。

1.7 分子對(duì)接 選取ADP核心活性成分,用Chem3D進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化,保存能量最低的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象的mol2格式,在AutoDock Tools 1.5.6軟件中導(dǎo)出為pdpqt格式,設(shè)為配體;通過PDB數(shù)據(jù)庫(kù)獲得排名靠前的靶蛋白的pdb格式文件,導(dǎo)入Pymol軟件輸入“remove solvent”“remove organic”命令進(jìn)行去水和去小分子配體處理,再在AutoDock Tools 1.5.6軟件中加氫,導(dǎo)出為pdbq格式,設(shè)為受體。使用Autodock Vina將配體與受體進(jìn)行對(duì)接,取結(jié)合力最高的構(gòu)象用PyMol軟件進(jìn)行分析作圖。

1.8 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 18只雄性C57BL/6J小鼠(體質(zhì)量為20～25 g,3月齡),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心［生產(chǎn)許可證號(hào) SCXK(皖)2016-0009］。飼養(yǎng)于溫度(22±2)℃、相對(duì)濕度45%～65%的動(dòng)物房中,光照條件設(shè)置為12 h的明/暗循環(huán),小鼠可隨意飲水和攝食。實(shí)驗(yàn)經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn),倫理編號(hào):AHUCM-mouse-2022014。

1.9 ADP的制備 ADP由茯苓、茯神、人參、遠(yuǎn)志各30 g,石菖蒲、龍齒各15 g組成,購(gòu)于安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院。每劑用10倍量蒸餾水浸泡30 min,煮沸后維持微沸狀態(tài)40 min,用紗布濾出濾液;再用蒸餾水煮沸后保持微沸20 min,依上法濾出濾液。將2次濾液合并放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,減壓濃縮后冷凍干燥成ADP水提物凍干粉(1 g干粉相當(dāng)于17.44 gADP藥材量),低溫干燥條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.10 模型制備與給藥 C57BL/6J小鼠適應(yīng)1周后建立單次延長(zhǎng)應(yīng)激(single prolonged stress, SPS)模型。實(shí)驗(yàn)流程如下:束縛2 h、強(qiáng)迫游泳20 min、休息15 min后,用5%異氟烷麻醉,足部電擊(2 mA,2 s)。模型復(fù)制完成后,將18只小鼠隨機(jī)分為3組(n=6):正常對(duì)照組、模型組、ADP組。ADP組小鼠灌胃給藥ADP(36.8 mg/kg),正常對(duì)照組和模型組均給予等量生理鹽水。每日定時(shí)給藥1次,連續(xù)給藥14 d。在最后1天給藥后對(duì)小鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試。

(1)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 將待測(cè)小鼠放入曠場(chǎng)測(cè)試裝置中心區(qū),安靜環(huán)境下觀察小鼠5 min內(nèi)的自發(fā)活動(dòng),使用行為學(xué)自動(dòng)分析系統(tǒng)(上海欣軟信息科技)比較各組之間運(yùn)動(dòng)的總路程、進(jìn)入中央?yún)^(qū)域的次數(shù)及運(yùn)動(dòng)總路程。

(2)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn) 將小鼠放置于中央?yún)^(qū)域面對(duì)開放臂的方向,安靜環(huán)境下小鼠自由探索。采用行為學(xué)自動(dòng)分析系統(tǒng)(上海欣軟信息科技)記錄小鼠5 min內(nèi)進(jìn)入開臂、閉臂的滯留時(shí)間百分比。

1.11 透射電子顯微鏡觀察海馬突觸、神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu) 將海馬組織從2.5%戊二醛溶液中取出,經(jīng)過PBS沖洗后,用1%鋨酸固定,并經(jīng)過梯度乙醇脫水,樹脂浸透,包埋,切片(70 nm),鈾染、鉛染處理,透射電子顯微鏡下觀察海馬神經(jīng)元、髓鞘超微結(jié)構(gòu)及突觸和突觸小泡的數(shù)量。

1.12 Western blot法檢測(cè)AKT、mTOR通路蛋白的表達(dá)水平 將取材的小鼠海馬組織置于EP管中,加入RIPA裂解液,組織勻漿,12 000 r/min、4 ℃離心5 min,取上清。BCA測(cè)定蛋白濃度,SDS-PAGE分離蛋白質(zhì)樣品,PVDF轉(zhuǎn)膜,室溫下用5%脫脂牛奶封閉2 h,洗膜后加入AKT(1∶1 000,CST)和mTOR一抗(1∶1 000,CST),4 ℃過夜。對(duì)應(yīng)的二抗孵育2 h。洗膜,ECL顯色液顯影成像。采用Image J軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

虛擬知識(shí)型社群是網(wǎng)絡(luò)時(shí)代中不同個(gè)體利用網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)分享知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)而在一起進(jìn)行交流的群體，注重尋找持同一理念或擁有同一愛好的伙伴。在未來全球化視角下，虛擬知識(shí)型社群將成為知識(shí)匯集的貢獻(xiàn)者、網(wǎng)絡(luò)輿情的集散地，主導(dǎo)社會(huì)輿論走向。

2 結(jié)果

2.1 ADP的潛在活性成分 從TCMSP、TCMID、HERB 3個(gè)中醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中搜集到ADP中445個(gè)候選化合物,然后通過SwissADME平臺(tái)以候選化合物的口服生物利用度和類藥性為指標(biāo),共篩選出ADP中活性成分151個(gè),其中茯苓8個(gè)、茯神4個(gè)、人參70個(gè)、石菖蒲38個(gè)、遠(yuǎn)志30個(gè)、龍齒1個(gè)。去重后最終得到ADP活性成分145個(gè)。部分有效成分見表1。

2.2 ADP活性成分作用靶點(diǎn) 通過SwissTarget Prediction預(yù)測(cè)活性成分作用靶點(diǎn),以P>0.1為指標(biāo),篩選去除重復(fù)后得到912個(gè)活性成分作用靶點(diǎn)。其中人參728個(gè)、石菖蒲428個(gè)、遠(yuǎn)志524個(gè)、茯苓193個(gè)、龍齒59個(gè)、茯神22個(gè)。

2.3 ADP治療PTSD的潛在靶點(diǎn) 通過TTD、DrugBank、GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)檢索、篩查并去除重復(fù),共得到PTSD相關(guān)靶點(diǎn)844個(gè)。將ADP活性成分靶點(diǎn)與PTSD靶點(diǎn),使用Venny 2.1.0軟件處理分析后,最終獲得ADP治療PTSD的潛在作用靶點(diǎn)188個(gè)。見圖1。

圖1 ADP治療PTSD靶點(diǎn)的韋恩圖

2.4 ADP-PTSD靶點(diǎn)交集PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及拓?fù)浞治?使用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),去除一個(gè)逸出靶點(diǎn),將結(jié)果導(dǎo)入到Cytoscape 3.9.0軟件中,以節(jié)點(diǎn)連接度的大小繪制網(wǎng)絡(luò),篩選出核心靶點(diǎn)共75個(gè),選取前10個(gè)作為關(guān)鍵靶點(diǎn),具體信息見表2。

2.5 核心靶點(diǎn)基因GO富集分析和KEGG通路分析 利用Metascape平臺(tái),以P<0.05為篩選條件,對(duì)ADP與PTSD的912個(gè)共同靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析。GO富集分析共得到354個(gè)富集條目,其中生物過程238個(gè)、細(xì)胞組分54個(gè)、分子功能62個(gè)。GO分析生物過程主要涉及化學(xué)突觸傳遞、對(duì)藥物刺激的反應(yīng)、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄與凋亡過程的正調(diào)控、MAPK級(jí)聯(lián)的正調(diào)控、興奮性突觸后電位等;細(xì)胞組分主要涉及細(xì)胞質(zhì)膜、突觸、神經(jīng)元胞體及神經(jīng)元投射等;分子功能主要涉及蛋白質(zhì)、ATP、大分子化合物等合成及神經(jīng)遞質(zhì)激活。

KEGG通路富集分析共得到118條通路,篩選27條與PTSD相關(guān)通路,其機(jī)制主要涉及神經(jīng)活性配體—受體相互作用、神經(jīng)退行性多發(fā)通路、鈣信號(hào)、血清素能突觸、多巴胺能突觸、TNF、HIF-1、Rap1、MAPK、雌激素、谷氨酸能突觸、LTP、內(nèi)分泌抵抗、膽堿能突觸等。

表3 “藥物—活性成分—靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)度值前10的節(jié)點(diǎn)

2.7 分子對(duì)接結(jié)果 根據(jù)“藥物—成分—靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果,選擇節(jié)點(diǎn)度值排名靠前的核心活性成分山柰酚和啤酒甾醇為分子對(duì)接配體,與對(duì)應(yīng)排名靠前的核心靶蛋白(PTGS2、ESR1、MAPK14)進(jìn)行分子對(duì)接(見圖2、表4)。結(jié)果顯示,山柰酚和啤酒甾醇與選取的靶蛋白均可自發(fā)結(jié)合,且構(gòu)像穩(wěn)定。其中山柰酚與PTGS2、啤酒甾醇與MAPK14的結(jié)合能均≤-9 kcal/mol,形成數(shù)條氫鍵結(jié)合。另外,ESR1與山柰酚和啤酒甾醇都有較低的結(jié)合能,表明山柰酚和啤酒甾醇與對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)之間有較好的結(jié)合活性。這側(cè)面驗(yàn)證了ADP可能主要通過山柰酚和啤酒甾醇作用于PTGS2、MAPK14和ESR1,從而發(fā)揮防治PTSD的作用。

注:A.山柰酚-PTSG2;B.山柰酚-ESR1;C.山柰酚-MAPK14;D.啤酒甾醇-PTSG2;E.啤酒甾醇-ESR;F.啤酒甾醇-MAPK14

表4 ADP核心成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)的結(jié)合能

注:A.正常對(duì)照組;B.模型組;C.ADP組;與正常對(duì)照組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05

2.8 ADP改善SPS小鼠PTSD樣行為曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠進(jìn)入中心區(qū)域內(nèi)運(yùn)動(dòng)距離(圖3b)和進(jìn)入中心區(qū)域次數(shù)(圖3c)顯著減少(P<0.05)。與模型組比較,ADP組小鼠進(jìn)入?yún)^(qū)域內(nèi)運(yùn)動(dòng)距離和中心區(qū)域次數(shù)均增加(P<0.05)。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中,與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠進(jìn)入開放臂的探索時(shí)間明顯減少(P<0.05);與模型組比較,ADP組小鼠進(jìn)入在開放臂的探索時(shí)間顯著延長(zhǎng)(圖3d,P<0.05)。但給予ADP后不影響小鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的總路程(圖3a,P>0.05),表明ADP防治PTSD的焦慮和抑郁樣行為與小鼠的運(yùn)動(dòng)功能無關(guān)。

2.9 海馬神經(jīng)元和突觸結(jié)構(gòu)形態(tài)的變化 透射電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),正常神經(jīng)元細(xì)胞結(jié)構(gòu)較為完整,神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量多,排列整齊而緊密,胞漿豐富,細(xì)胞核清晰,圓形而居中。與正常神經(jīng)元比較,病變的神經(jīng)元數(shù)量減少,且排列疏松而不規(guī)則,細(xì)胞形態(tài)不一,部分神經(jīng)元皺縮,染色質(zhì)聚集,分布不均勻。正常髓鞘邊緣清晰,同心圓狀排列的膜性結(jié)構(gòu)較完整。病變的髓鞘同心圓狀排列的膜性結(jié)構(gòu)模糊不清。正常情況下,突觸前細(xì)胞的突觸小泡數(shù)量較多,排列緊密,而發(fā)生病變時(shí)突觸小泡的數(shù)量明顯減少,且排列稀疏。正常海馬神經(jīng)元中突觸數(shù)量較多,且神經(jīng)元軸突、樹突和突觸間隙結(jié)構(gòu)完整清晰,而病變的突觸數(shù)量明顯減少,神經(jīng)元軸突、樹突和突觸間隙模糊不清。見圖4。

注:A.正常對(duì)照組;B.模型組;C.ADP組;紅色箭頭示組織正常及病變部位;與正常對(duì)照組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05

與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠海馬神經(jīng)元數(shù)量顯著增多(P<0.05),髓鞘的病變數(shù)量呈升高趨勢(shì)(P>0.05);給予ADP后海馬神經(jīng)元和髓鞘有一定的改善作用,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠海馬突觸結(jié)構(gòu)中的突觸小泡數(shù)量和突觸的數(shù)量均明顯減少(P<0.05);ADP治療后可阻止部分突觸小泡(P<0.05)和突觸數(shù)量(P>0.05)的減少。見圖4。

2.10 ADP調(diào)節(jié)PTSD小鼠海馬組織AKT/mTOR信號(hào)通路 與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠海馬組織p-AKT、p-mTOR蛋白表達(dá)水平降低(P<0.05),在給予ADP干預(yù)后,小鼠海馬組織p-AKT、p-mTOR蛋白表達(dá)水平顯著上升(P<0.05)。結(jié)果提示,ADP能上調(diào)SPS小鼠海馬組織AKT、mTOR蛋白的表達(dá)水平。見圖5。

3 討論

PTSD是由單一或反復(fù)接觸創(chuàng)傷事件發(fā)展而來的神經(jīng)精神疾病。近年來,復(fù)方和單味中藥在防治PTSD及其并發(fā)癥中療效顯著。前期研究［4］發(fā)現(xiàn),ADP中富含皂苷、酚酸、醚類等活性成分,包括人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、葉黃素和茯苓酸B、α-細(xì)辛醚等。本研究顯示,山柰酚和啤酒甾醇是ADP的主要活性成分,主要集中于人參、遠(yuǎn)志、石菖蒲3味中藥,故提示人參在ADP治療PTSD時(shí)具有不可或缺的作用,其次是遠(yuǎn)志和石菖蒲。

為了明確共有靶點(diǎn)的相互作用,選取度值相對(duì)較高的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行拓?fù)浞治?結(jié)果發(fā)現(xiàn)ADP中活性成分主要通過AKT、TNF、IL6、PTGS2、VEGFA、ESR1、CASP3、GRIN2B、mTOR等靶點(diǎn)發(fā)揮作用。AKT在細(xì)胞存活、增殖和凋亡［5］及免疫系統(tǒng)［6］中起重要作用。mTOR參與神經(jīng)元發(fā)育和成熟神經(jīng)元的正常功能(細(xì)胞凋亡、自噬、生長(zhǎng)),主要通過整合細(xì)胞外多種信號(hào)刺激,參與體內(nèi)多條信號(hào)通路,影響轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成［7-8］。本研究選擇AKT/mTOR通路進(jìn)行驗(yàn)證。同時(shí),分子對(duì)接結(jié)果顯示PTGS2與山柰酚和啤酒甾醇有較強(qiáng)的結(jié)合力,這一結(jié)果提示,PTGS2可能是ADP防治PTSD的核心靶點(diǎn)。本研究?jī)H探討了AKT/mTOR通路的作用,今后將對(duì)PTGS2蛋白作進(jìn)一步的研究。

對(duì)GO生物過程分析結(jié)果表明,化學(xué)突觸傳遞、興奮性突觸后電位和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、凋亡過程正調(diào)控、神經(jīng)元投射、等離子體膜的組成、蛋白合成等可能是ADP治療PTSD尤為重要的生物過程。在對(duì)海馬突觸、神經(jīng)元和髓鞘形態(tài)的透射電子顯微鏡觀察中發(fā)現(xiàn),PTSD小鼠發(fā)生病變的海馬突觸、神經(jīng)元和髓鞘細(xì)胞多于正常小鼠,ADP在一定程度上可緩解病變細(xì)胞的形態(tài)與功能。

KEGG通路分析結(jié)果顯示,神經(jīng)活性配體—受體相互作用、鈣信號(hào)等途徑在ADP中起著重要作用。神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)通路,如5-羥色胺能突觸、多巴胺能突觸、谷氨酸能突觸、膽堿能突觸等均可影響突觸膜上受體神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。在某些情況下,這些神經(jīng)遞質(zhì)也參與神經(jīng)系統(tǒng)功能調(diào)節(jié),與PTSD的發(fā)生密切相關(guān)［9-10］。如5-羥色胺參與調(diào)節(jié)抑郁、焦慮等精神類疾?。?1］;多巴胺可調(diào)控獎(jiǎng)賞、動(dòng)機(jī)和情感等生理活動(dòng)［12］;谷氨酸能神經(jīng)元是腦內(nèi)主要的興奮性神經(jīng)元,其與GABA能神經(jīng)元在腦內(nèi)保持動(dòng)態(tài)平衡［13］;膽堿能神經(jīng)元能調(diào)控恐懼的學(xué)習(xí)和消退［14］。對(duì)上述通路進(jìn)行研究將有助于進(jìn)一步了解這些通路如何參與PTSD的發(fā)生,以及發(fā)現(xiàn)潛在的治療手段。

綜上所述,本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)多方向、多層次地深入研究ADP治療PTSD的有效活性成分、潛在靶點(diǎn)及潛在機(jī)制,進(jìn)一步結(jié)合分子對(duì)接技術(shù)、動(dòng)物行為功能和蛋白表達(dá)等實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。研究結(jié)果證實(shí),AKT/mTOR信號(hào)通路與突觸功能是影響PTSD發(fā)病的主要因素,其可能通過神經(jīng)活性配體—受體相互作用、鈣信號(hào)、血清素能突觸、多巴胺能突觸等通路發(fā)揮作用。