楊柳岸，白曉紅，修 禪，呂啟慧

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110847；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110032）

兒童慢性咳嗽是指兒童以咳嗽為主要癥狀或唯一癥狀，咳嗽時(shí)間>4周且胸部X片正常的慢性咳嗽[1]。中醫(yī)學(xué)根據(jù)其在臨床上的表現(xiàn)，將其歸屬“久咳”“久嗽”等范疇。慢性咳嗽在兒童中多發(fā)，病程遷延不愈，具有易反復(fù)、治療時(shí)間長(zhǎng)、難以根治等明顯區(qū)別于其他兒童呼吸道疾病的特點(diǎn)。目前通過(guò)中醫(yī)療法治療兒童慢性咳嗽已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，并取得一定的成果，但大多數(shù)中醫(yī)僅局限于采用清肺、潤(rùn)肺等治療上焦的方法[2]，而忽視了“上病下取”的理念。本研究分析“苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)治療兒童慢性咳嗽的理念及方法，同時(shí)通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討治療在兒童慢性咳嗽中可能的作用機(jī)制。

1 “上病下取”理論與兒童慢性咳嗽的關(guān)系

“上病下取”出自《素問(wèn)·五常政大論》“病在上，取之下”，該治法是一種中醫(yī)臨床治療手段，是中醫(yī)整體觀念的高度體現(xiàn)，旨在以治下而愈上。中醫(yī)理念中，人體為一個(gè)有機(jī)且統(tǒng)一的整體，臟腑之間上下、左右均有關(guān)聯(lián)，牽一發(fā)而動(dòng)全身，中醫(yī)治療不應(yīng)局限在疾病的局部臨床表現(xiàn)，更應(yīng)該判斷疾病的本質(zhì)[3]。兒童慢性咳嗽在中醫(yī)學(xué)屬肺系疾病，部分患兒伴有不同程度的便秘[4]，多表現(xiàn)為大便干燥粗長(zhǎng)。肺與大腸相表里，對(duì)于肺系疾病的治療，可從胃腸出發(fā)。《靈樞·本輸》曰“肺合大腸，大腸者，傳導(dǎo)之府”。肺氣如果可以正常地進(jìn)行肅降則大腸的傳導(dǎo)功能便會(huì)正常，而大腸傳導(dǎo)糟粕的功能如若失調(diào)，肺氣便會(huì)在肅降方面失調(diào)，發(fā)生慢性咳嗽[5]。唐宗海曰：“大腸之所以傳導(dǎo)者，以其為肺之腑。肺氣下達(dá)，故能傳導(dǎo)?！蔽笟馊缛羯夏娣阜危瑒t會(huì)發(fā)生咳嗽。如若通暢下焦氣機(jī)，令肺氣能夠正常肅降，咳嗽癥狀便會(huì)緩解甚至消失[6]。該理念是中醫(yī)整體觀依據(jù)氣機(jī)升降治則的精煉，與兒童慢性咳嗽聯(lián)系頗深，對(duì)其治療也有獨(dú)到之處。

2 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)對(duì)兒童慢性咳嗽的治療

苦杏仁，性味甘、苦，在人體氣機(jī)運(yùn)動(dòng)中可升可降，乃陰中陽(yáng)也，入肺、大腸經(jīng)?？嘈尤示哂欣?、除腸中燥滿之功，可除腸中郁結(jié)滯氣，通暢胸中之滿，對(duì)胸中氣逆喘促亦有很好的功效，且油脂豐富，具有潤(rùn)腸功能，在臨床表現(xiàn)為止咳、墜痰、通便。萊菔子，味辛、甘，入肺、胃經(jīng)，既可以下氣定喘，通達(dá)上焦氣機(jī)，治療肺系疾病，亦可以調(diào)理下焦氣機(jī)，治療食積氣滯、脘腹脹滿?！夺t(yī)學(xué)衷中參西錄》中闡述萊菔子可以順氣開(kāi)郁、消脹除滿，乃化氣之品，非破氣之品，表明萊菔子作用于慢性咳嗽并不是直接止肺中之咳，而是化下氣以通上氣。同時(shí)萊菔子中最主要的成分蘿卜苷具有消食化積功能，在促進(jìn)腸運(yùn)動(dòng)中發(fā)揮了作用[7]。二者具有上下焦共治的聯(lián)合作用，可疏通下焦氣機(jī)而調(diào)節(jié)上焦氣機(jī)，體現(xiàn)了“上病下取”的中醫(yī)臨床理念；二者都具有針對(duì)下焦病癥的有效成分，在臨床以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)對(duì)兒童慢性咳嗽有很好的療效[8-10]。

3 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

3.1 材料與方法

3.1.1 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)中有效成分及活性物質(zhì)的篩選

基于TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)，以“苦杏仁”“萊菔子”為關(guān)鍵詞進(jìn)行搜索，以口服生物利用度≥30%、類藥性≥0.18為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)苦杏仁、萊菔子的有效成分及其作用靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，再通過(guò)Unipro軟件將篩選出來(lái)的靶點(diǎn)轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)稱。

通過(guò)使用GeneCard數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genec ards.org/）、OMIM 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//www.omim.org/）、PharmGKB 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//www.pharmgkb.org/）、DrugBank 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//go.drugbank.com/），以“chronic cough in children”為關(guān)鍵詞查找與兒童慢性咳嗽有關(guān)的疾病基因，其中GeneCard數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）以評(píng)分>1作為篩選條件，將4個(gè)基因數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出的疾病基因取交集并繪制Venn圖。

3.1.3 藥物作用靶點(diǎn)基因與疾病相關(guān)基因交集

將從兩味中藥篩選出的靶點(diǎn)基因合并，去除重復(fù)靶點(diǎn)基因；將從兒童慢性咳嗽疾病基因庫(kù)中篩選出的疾病相關(guān)基因進(jìn)行合并，去除重復(fù)基因。取二者交集，得到交集基因并繪制Venn圖。

3.1.4 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

獲取“苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)活性成分與兒童慢性咳嗽疾病基因的交集靶點(diǎn)基因。利用Cytoscape軟件構(gòu)建“活性成分-交集靶點(diǎn)”復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。計(jì)算各個(gè)節(jié)點(diǎn)的連接度，評(píng)估網(wǎng)絡(luò)中各個(gè)節(jié)點(diǎn)的相互聯(lián)系程度。

廠房建設(shè)以發(fā)展聯(lián)合建筑為主，內(nèi)部空間進(jìn)行合理、明確的功能分區(qū)，將功能相近又互不影響的空間布置在一起，工作區(qū)域與非工作區(qū)域分開(kāi)，工作線路與參觀線路用不同道路線表示，生產(chǎn)車(chē)間與其輔助用房的安全出口分開(kāi)設(shè)計(jì)。做到廠房?jī)?nèi)部動(dòng)靜分明，工藝流程一目了然，人員疏散線路安全流暢。

3.1.5 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)及網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

利用STRING平臺(tái)構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，將藥物分子靶點(diǎn)與兒童慢性咳嗽相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行映射，以置信度≥0.4為標(biāo)準(zhǔn)篩選并隱藏孤立靶點(diǎn)，得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用信息，將蛋白互作網(wǎng)絡(luò)的結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件，通過(guò)CytoNCA插件對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行拓?fù)浞治?，根?jù)度中心性（DC）、接近中心性（CC）、介數(shù)中心性（BC）、局部平均中心性（LAC）、特征向量中心性（EC）以及網(wǎng)絡(luò)中心性（NC）6項(xiàng)拓?fù)鋮?shù)，以中位數(shù)為篩選條件進(jìn)行篩選，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)核心。

3.1.6 GO 基因功能和KEGG 通路富集分析

運(yùn)用R語(yǔ)言將PPI網(wǎng)絡(luò)核心靶標(biāo)進(jìn)行基因本體功能富集分析（gene ontology，GO）和京都基因和基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes，KEGG）通路富集分析，并繪制GO功能分析、KEGG通路富集分析的柱狀圖及圈圖，用以分析中藥有效活性成分、藥物作用核心靶標(biāo)及關(guān)鍵通路三者之間的關(guān)系。

3.2 結(jié) 果

3.2.1 “苦杏仁-萊菔子”主要活性成分及作用靶點(diǎn)

通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選收集得到苦杏仁有效成分16個(gè)，對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)207個(gè)；萊菔子有效成分2個(gè)，對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)3個(gè)。去除重復(fù)，得到70個(gè)靶點(diǎn)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 “苦杏仁-萊菔子”有效成分及對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)基因信息

3.2.2 兒童慢性咳嗽疾病基因篩選

通過(guò)GeneCard數(shù)據(jù)庫(kù)、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)、Pharm-GKB數(shù)據(jù)庫(kù)以及DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出與兒童慢性咳嗽相關(guān)疾病基因共3941個(gè)，4個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)交集基因共94個(gè)，繪制Venn圖，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 4 個(gè)基因數(shù)據(jù)庫(kù)兒童慢性咳嗽疾病基因Venn 圖

3.2.3 將藥物作用靶點(diǎn)基因與疾病相關(guān)基因取交集

將兩味中藥篩選出的靶點(diǎn)基因合并，去除重復(fù)，獲得70個(gè)基因；將從4個(gè)基因數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出的疾病相關(guān)基因合并，去除重復(fù)，獲得3941個(gè)基因；取二者交集，得到47個(gè)基因，繪制Venn圖，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 “苦杏仁-萊菔子”中有效成分靶點(diǎn)基因與兒童慢性咳嗽疾病基因的Venn 圖

3.2.4 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

“苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)與兒童慢性咳嗽相關(guān)的有效成分共16 個(gè)，靶點(diǎn)基因共47 個(gè)，依托Cytoscape軟件繪制“苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共獲得63個(gè)節(jié)點(diǎn)以及128條邊，計(jì)算圖中每個(gè)節(jié)點(diǎn)的連接度（degree），觀察活性成分和靶點(diǎn)基因在網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮的作用。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

3.2.5 構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

依 托STRING（https：//cn.string-db.org/）網(wǎng) 站構(gòu)建交集基因的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，分析“苦杏仁-萊菔子”和兒童慢性咳嗽的47個(gè)共有靶點(diǎn)，以置信度≥0.4為標(biāo)準(zhǔn)篩選并隱藏孤立靶點(diǎn)，得到蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，共含47個(gè)節(jié)點(diǎn)及306條連線。結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 “苦杏仁-萊菔子”藥對(duì)靶點(diǎn)與兒童慢性咳嗽靶點(diǎn)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

3.2.6 PPI 網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

將蛋白互作網(wǎng)絡(luò)中的基因依據(jù)BC、CC、DC、EC、LAC、NC的中位值BC=15.120 238 095 238、CC=0.411 214 953 271 028、DC=12、EC=0.129 108 443 856 239、LAC=5.333 333 333 333 33、NC=6.857 142 857 142 85 對(duì)靶點(diǎn)作進(jìn)一步篩選，最終獲得由12個(gè)核心靶點(diǎn)、145條邊構(gòu)建的PPI核心網(wǎng)絡(luò)，核心蛋白分別為溶質(zhì)載體系列6成員4（solute carrier family 6 member 4，SLC6A4）、熱休克蛋白90阿爾法家族A類成員1（heat shock protein 90 alpha family class a member 1，HSP90AA1）、雌激 素 受 體1（estrogen receptor 1，ESR1）、前 列 腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2，PTGS2）、溶質(zhì)載體系列 6成員3（solute carrier family 6 member 3，SLC6A3）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）、單胺氧化酶B（monoamine oxidase B，MAOB）、乙 酰膽 堿 酯 酶（acetylcholinesterase，ACHE）、絲 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶14（mitogenactivated protein kinase 14，MAPK14）、孕 激 素 受體（progesterone receptor，PGR）、多 巴 胺 受 體D2（dopamine receptor D2，DRD2）、多 巴 胺 受 體D1（dopamine receptor D2，DRD1）。結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 PPI 網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

3.2.7 GO 與KEGG 富集結(jié)果

通過(guò)使用R軟件包org.Hs.eg.db中基因的GO注釋，將基因映射到背景集合中，使用R軟件包c(diǎn)lusterProfiler進(jìn)行富集分析，獲得基因集富集的結(jié)果。設(shè)定最小基因集為5，最大基因集為5000，以P<0.05 和錯(cuò)誤發(fā)生率（FDR）>0.25 作為條件進(jìn)行篩選，包括細(xì)胞組件（BP）、生物學(xué)過(guò)程（CC）、分子功能（MF）3 個(gè)組成部分，分別獲得1000、293、364 條通路，核心靶點(diǎn)的BP依次與化學(xué)成分的反應(yīng)（response to chemical）、生物質(zhì)量的調(diào)節(jié)（regulation to biological quality）、細(xì)胞對(duì)化學(xué)刺激的反應(yīng)（cellular response to chemical stimulus）等過(guò)程相關(guān)；CC與內(nèi)膜系統(tǒng)（endomembrane member）、膜的固有成分（intrinsic component of membrane）、質(zhì)膜部分（plasma membrane part）等相關(guān)；MF與陽(yáng)離子結(jié)合（cation binding）、分子換能器活性（molecular transducer activity）、催化活性（catalytic activity）等相關(guān)，并分別篩選出前20條、前21條、前18條通路繪制柱狀圖，結(jié)果見(jiàn)圖6A。

圖6A 核心靶點(diǎn)GO 富集分析

圖6B 核心靶點(diǎn)KEGG 富集分析

通過(guò)使用KEGG rest API（https：//www.kegg.jp/kegg/rest/keggapi.html）獲取最新的KEGG Pathway基因注釋，將基因映射到背景集合中，使用R軟件包c(diǎn)lusterProfiler（version 3.14.3）進(jìn)行富集分析，獲得基因集富集的結(jié)果。設(shè)定最小基因集為5，最大基因集為5000，以P<0.05 和FDR>0.25 作為條件進(jìn)行篩選，共得出167條通路，主要涉及神經(jīng)活性配體-受體相互作用（neuroactive ligandreceptor interaction），癌 癥 相 關(guān) 通 路（pathways in cancer）、代 謝 通 路（metabolic pathways）、多 巴胺 能 突 觸（dopaminergic synapse）、鈣 信 號(hào) 通 路（calcium signaling pathway），根據(jù)富集程度篩選出前24條通路繪制圈圖，結(jié)果見(jiàn)圖6B。

4 臨床醫(yī)案

李某，男，5歲，2021年10月17日初診，主訴：反復(fù)咳嗽1年余?；純?年來(lái)反復(fù)咳嗽，每月發(fā)作一次，現(xiàn)癥見(jiàn)：流涕，咳嗽，有痰，痰質(zhì)黏色黃，汗多，脾氣可，納差，夜眠不實(shí)，大便2 日一行，偏干。體格檢查：神清狀可，呼吸平穩(wěn)，舌紅，苔薄白。中醫(yī)診斷：小兒咳嗽。證型：肺胃蘊(yùn)熱證。處方：玄參10 g，黃芩10 g，甘草3 g，柴胡6 g，桔梗6 g，防風(fēng)6 g，炒萊菔子10 g，苦杏仁10 g，佛手6 g，連翹10 g，陳皮6 g，荊芥10 g，茯苓10 g，法半夏6 g。中藥顆粒，12劑，口服。隨診。

二診：2021年10月26日，患者自述咳嗽、飲食、便秘好轉(zhuǎn)，夜眠不實(shí)改善，加白芷6 g，絲瓜絡(luò)10 g，炒薏苡仁10 g，繼服12劑。

三診：2021年11月10日，患者癥狀好轉(zhuǎn)，然近兩天感冒，流清涕，喉嚨不適，飲食可，便秘，大便干，2 日1 次。證型：風(fēng)痰證。處方：太子參10 g，黃芩10 g，麩炒蒼術(shù)10 g，甘草3 g，清半夏6 g，柴胡6 g，桔梗6 g，防風(fēng)6 g，炒萊菔子10 g，苦杏仁10 g，陳皮6 g，荊芥10 g，辛夷6 g，炒雞內(nèi)金6 g。10劑，口服。

四診：2021年11月25日，患者感冒好轉(zhuǎn)，偶清嗓。處方：茯苓10 g，苦杏仁10 g，甘草3 g，桔梗6 g，炒萊菔子10 g，法半夏6 g，黃芩10 g，焦山楂10 g，木蝴蝶6 g，玄參10 g，連翹10 g，陳皮6 g，芡實(shí)10 g，石膏30 g。10劑，口服。

1年后電話隨訪，患者自述咳嗽明顯減輕，1年內(nèi)無(wú)明顯反復(fù)咳嗽。

按語(yǔ)：該患者就診時(shí)自述反復(fù)咳嗽超過(guò)1年，且發(fā)病頻繁，每月發(fā)作一次，符合兒童慢性咳嗽的臨床表現(xiàn)，同時(shí)初診時(shí)除咳嗽外，伴有咳黃痰、納差、大便干燥等明顯肺胃蘊(yùn)熱表現(xiàn)，因此治療時(shí)需兼具上下焦。4次治療均根據(jù)癥狀改變進(jìn)行不同程度的藥物加減，根據(jù)初診患兒的腸胃表現(xiàn)4次治療均選擇使用“杏仁-萊菔子”，前2次治療中發(fā)揮了潤(rùn)腸通便、理下焦氣機(jī)，繼而清肺熱、止咳的功效；后2次治療風(fēng)痰證感冒，亦發(fā)揮除腸燥、除肺燥、化痰的功效。杏仁如《醫(yī)學(xué)啟源》中所言“除肺中燥，治風(fēng)燥在于胸膈”?！吨髦蚊卦E》亦云杏仁“潤(rùn)肺氣，消食，升滯氣”。《本草綱目》言“萊菔子之功，長(zhǎng)于利氣。生能升，熟能降，升則吐風(fēng)痰，散風(fēng)寒，發(fā)瘡疹；降則定痰喘咳嗽，調(diào)下痢后重，止內(nèi)痛，皆是利氣之效”。二者通過(guò)共同調(diào)理上下氣機(jī)，以下治上，在兒童慢性咳嗽的治療中發(fā)揮巨大作用。

5 討 論

小兒慢性咳嗽目前病因不明確且發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與成人咳嗽有明顯差異。兒童慢性咳嗽可能源于感染后咳嗽、支氣管擴(kuò)張、氣管軟化和哮喘等，一旦過(guò)了青春期，咳嗽的病因可能趨向于成人常見(jiàn)的原因，即胃食管反流、上氣道綜合征等[11]。從中醫(yī)學(xué)角度看，兒童慢性咳嗽的病因來(lái)源于各個(gè)臟腑，《內(nèi)經(jīng)》曰“五臟六腑皆令人咳，非獨(dú)肺也”。鑒于中藥成分的復(fù)雜性，本研究以“上病下取”理論作為出發(fā)點(diǎn)，從腸治肺，通過(guò)使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法，從多維度出發(fā)，解讀“杏仁-萊菔子”對(duì)于兒童慢性咳嗽治療的作用機(jī)制。

通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析“杏仁-萊菔子”治療兒童慢性咳嗽的各個(gè)成分可知，在“杏仁-萊 菔 子”中 左 旋 千 金 藤 啶 堿（l-SPD）、豆 甾醇（stigmasterol）、雌 酮（estrone）、甘 草 查 爾 酮B（licochalcone B）、烏藥堿（machiline）與疾病基因的相關(guān)值較高，提示其為治療作用的核心成分。目前的各項(xiàng)研究表明，l-SPD可通過(guò)突觸前D1 受體引起其對(duì)PL錐體細(xì)胞自發(fā)興奮性突觸后電流（sEPSC）頻率的影響，并且依賴于蛋白激酶A（PKA）和蛋白激酶C（PKC）信號(hào)通路，具有D1受體激動(dòng)劑和D2 受體拮抗劑雙重作用。同時(shí)l-SPD針對(duì)外源性添加的腎上腺素和神經(jīng)釋放去甲腎上腺素所誘導(dǎo)的α1腎上腺素，對(duì)其介導(dǎo)的收縮抑制作用可能有助于藥物降壓，用于松弛腸系膜小動(dòng)脈血管[12-14]。豆甾醇具有抗炎作用，可能由糖皮質(zhì)激素受體介導(dǎo)，在腸道和相關(guān)免疫細(xì)胞的分化和功能、對(duì)環(huán)境刺激的反應(yīng)和吸收過(guò)程損傷方面的調(diào)節(jié)具有潛力[15-16]。雌酮是雌激素的一種，不僅可以促進(jìn)女性生殖器官的發(fā)育以及維持第二性征，同時(shí)對(duì)心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等均有明顯的影響[17]。甘草查爾酮B可以抑制巨噬細(xì)胞中NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體的活化，但對(duì)黑色素瘤抑制因子2（AIM2）或含NLR家族CARD域蛋白4（NLRC4）炎性小體的活化沒(méi)有影響，是一種特異性NLRP3抑制劑[18]。烏藥堿具有強(qiáng)心、抗腫瘤、緩解支氣管哮喘、抗炎作用[19]。其中l(wèi)-SPD、豆甾醇、甘草查爾酮B均具有抗炎、潤(rùn)腸、緩腸的作用，與本研究上病下取治療咳嗽的理念趨同，更加表明了“上病下取”理念的正確性及科學(xué)性，為臨床治療兒童慢性咳嗽提供可行道路。

通過(guò)分析PPI網(wǎng)絡(luò)可得到核心靶點(diǎn)主要包括SLC6A4、HSP90AA1、PTGS2、SLC6A3 等。SLC-6A4 多態(tài)性的頻率和更高水平的5-羥色胺（5-HT）與腸易激綜合征（IBS）顯著相關(guān)，特別是在腹瀉和腹痛患者中，提示SLC6A4是參與IBS發(fā)病機(jī)制的潛在候選基因，同時(shí)SLC6A4也是功能性消化不良以及腸易激綜合征的病理因素之一[20-22]，從側(cè)面印證了治療消化系統(tǒng)可改善呼吸系統(tǒng)的理念。HSP90AA1通過(guò)調(diào)節(jié)自噬促進(jìn)牙齦卟啉單胞菌脂多糖（Pg-LPS）誘導(dǎo)的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGFs）的炎癥反應(yīng)。3-甲基腺嘌呤（3-methyl adenine，3-MA）的加入進(jìn)一步證實(shí)了自噬可能介導(dǎo)熱休克蛋白90α家族A類成員1（siHSP90AA1）以增強(qiáng)炎癥反應(yīng)[23]。通過(guò)產(chǎn)生前列腺素，PTGS2在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用[24]，在研究及查閱文獻(xiàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)SLC6A4、HSP90AA1、SLC6A3均在治療精神類疾病例如抑郁癥、自閉癥等，也就是中醫(yī)所述的情志病方面，具有直接或間接的作用[25-27]?？赡軐?duì)于兒童慢性咳嗽，情志方面的治療與管理在一定程度上具有積極效果，從而打開(kāi)了一條嶄新的治療兒童慢性咳嗽的思路，具體還需進(jìn)一步證明。

通過(guò)對(duì)“杏仁-萊菔子”的關(guān)鍵靶標(biāo)基因進(jìn)行GO基因功能富集分析以及KEGG通路富集分析，可得出7條通路與兒童慢性咳嗽進(jìn)展過(guò)程高度相關(guān)，可能是藥對(duì)發(fā)揮治療作用的主要途徑。神經(jīng)活性配體-受體相互作用信號(hào)通路是所有處于質(zhì)膜上和細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)通路有關(guān)系的受體以及配體的集合，與炎癥反應(yīng)顯著相關(guān)[28]。鈣信號(hào)通路可以參與控制代謝、分泌、受精、增殖和平滑肌收縮等過(guò)程，在控制炎癥反應(yīng)中起到了一定作用[29]。cAMP信號(hào)通路可以改善氣道炎癥，通過(guò)激活PKA，繼而促進(jìn)環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）轉(zhuǎn)錄，將膜上的Gq蛋白活化，進(jìn)一步激活蛋白激酶C，進(jìn)而激活肌球蛋白輕鏈激酶，最后達(dá)到促進(jìn)氣道平滑肌松弛的結(jié)果[30]。磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）信號(hào)通路可以通過(guò)影響人氣道上皮細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞（16HBE）自噬的發(fā)生，改善人體氣道炎癥反應(yīng)，也可以改善結(jié)腸的炎癥反應(yīng)，發(fā)揮對(duì)結(jié)腸的保護(hù)作用[31-32]。

綜上，本研究通過(guò)對(duì)“上病下取”理論的深入探究以及通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法深層次、多維度研究“杏仁-萊菔子”藥對(duì)對(duì)于兒童慢性咳嗽在上焦和下焦的多種作用機(jī)制，探查該藥對(duì)核心靶點(diǎn)的生物效應(yīng)，開(kāi)創(chuàng)地提出了情志對(duì)于兒童慢性咳嗽可能存在的影響。本研究挖掘結(jié)果均通過(guò)查閱文獻(xiàn)后得到了相應(yīng)的證實(shí)，為未來(lái)相關(guān)研究提供了一定的參考及支持，但本研究結(jié)果仍需要在實(shí)驗(yàn)研究方面進(jìn)行驗(yàn)證。