張翔珂,高萌萌,陳銘,董雨萌,蘇慧,閻雪瑩

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150040)

化療是治療乳腺癌各個時期的重要治療手段,為提高單一化療藥物的療效,目前臨床常將兩種或多種化療藥物聯(lián)合使用[1]。除此之外,還可將化療與其他療法相結(jié)合,例如光療、免疫治療等[2-3],以提高對于腫瘤細胞的殺傷能力[4]。介孔二氧化硅納米粒(mesoporous silica nanoparticles,MSNs)作為近些年來發(fā)展起來的一種新型無機介孔納米材料[8],具有比表面積大以及良好的生物相容性等優(yōu)點,可在一定程度上增加藥物的負載量。盡管MSNs具有多方面的優(yōu)點,但是載藥MSNs存在一定的藥物突釋風(fēng)險,為此通常需要在MSNs表面上進行修飾,以實現(xiàn)對MSNs孔道的封堵,控制藥物釋放。

聚多巴胺(polydopamine,PDA)是鹽酸多巴胺在堿性條件下氧化而形成的具有強大黏附性的仿生聚合物[9],可以實現(xiàn)對MSNs表面覆蓋,而在腫瘤部位的酸性環(huán)境中產(chǎn)生裂解,可防止MSNs孔道內(nèi)藥物在非腫瘤部位的突釋。PDA作為光熱轉(zhuǎn)化材料在近紅外光區(qū)有強吸收性[10],經(jīng)808 nm近紅外激光照射后可產(chǎn)生熱能,當(dāng)溫度達到一定限度時,對腫瘤細胞產(chǎn)生殺傷作用,可實現(xiàn)化療和光熱治療的聯(lián)合作用[11]。另外由于其表面存在著豐富的官能團易實現(xiàn)靶頭的連接,可實現(xiàn)納米粒的主動靶向作用[12]。葉酸受體(folate receptors,FR)作為常用的腫瘤治療的受體,在正常組織中的表達處于高度保守狀態(tài),而作為FR亞型之一的FR-α則在乳腺癌等上皮譜系腫瘤中過度表達[13-14],因此FR-α可能成為乳腺癌的潛在治療靶點,因此本研究選擇葉酸作為納米粒的靶頭。

為構(gòu)建高效、低毒、高腫瘤靶向性的給藥系統(tǒng),本實驗擬制備本實驗中選擇臨床常見配伍方式蒽環(huán)類藥物和微管抑制類藥物中的代表藥物鹽酸吡柔比星(pirarubicin hydrochloride,THP)[5]和多西紫杉醇(docetaxel,DTX)[6-7]作為模型藥,以FR-α為靶點,以包覆聚多巴胺的介孔二氧化硅為載體,將化療與光療相結(jié)合的納米制劑對葉酸過表達型乳腺癌進行治療。本試驗中利用單因素考察對FA-PDA-THP-DTX-MSNs制備工藝進行優(yōu)化,并對其形貌、光熱效應(yīng)、體外釋放、體外藥效學(xué)以及大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)進行了考察。從藥劑學(xué)的角度為實現(xiàn)化療與光療相結(jié)合的靶向治療方法提供了新的策略和依據(jù)。

1 材料

1.1 試劑與藥品多西紫杉醇(批號:C12161879,上海麥克林生化科技有限公司);鹽酸吡柔比星[批號:A2110358,凱梅根(上海)生物科技有限公司];鹽酸多巴胺(批號:C11956740,上海麥克林生化科技有限公司);三羥甲基氨基甲烷(批號:2021/03,上海麥克林生化科技有限公司);葉酸(批號:0820171004,上海麥克林生化科技有限公司);N-羥基琥珀酰亞胺(批號:C12913790,上海麥克林生化科技有限公司);聚乙烯亞胺(批號:C12417098,上海麥克林生化科技有限公司);甲醇(色譜純,美國迪馬公司);乙腈(色譜純,美國迪馬公司);1-(3-二甲氨基丙基)-3乙基碳二甲胺(上海麥克林生化科技有限公司)。所有購買的試劑均未經(jīng)進一步純化直接使用,超純水由水純化系統(tǒng)(PALL Cascade III)制備。

1.2 儀器HZS-HA恒溫水浴振蕩器(哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司);e2695高效液相色譜儀(美國Waters公司);LR-MFJ-808nm近紅外激光器(長春鐳銳光電科技有限公司);Nano-ZS90納米粒度及Zeta電位分析儀(馬爾文儀器有限公司);熱電偶雙通道測溫器(東莞市?，攦x表有限公司);ASAP 2460全自動比表面及孔隙度分析儀(美國Micromeritics公司);粉末X射線衍射儀(德國布魯克公司);STA 449 F5同步熱分析儀(德國耐馳公司);FEI Tecnai F30透射電子顯微鏡(美國FEI公司)。

2 試驗方法與結(jié)果

2.1 MSNs的制備MSN按照改進的St?ber方法合成[15]并以酸化乙醇回流萃取法去除模板劑。具體操作如下:90 μL三乙醇胺(TEA)與60 mL H2O混合成稀的強堿溶液(pH=9.5),準確稱量0.50 g 十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)加入溶液中,95 ℃下磁力攪拌30 min后緩慢滴加614 μL 正硅酸乙酯(TEOS),在劇烈攪拌和恒溫下反應(yīng)3 h,離心(8 000 r·min-1,10 min)收集沉淀并用蒸餾水-乙醇交替洗3次,冷凍干燥得到MSN@CTAB白色粉末。

2.2 分析方法建立

2.2.1 色譜條件DTX色譜條件:色譜柱:Kromasil(C18,4.6 mm×150 mm,5 μm);流動相:甲醇:乙腈:水(35∶40∶25,V/V/V);檢測波長:230 nm;柱溫:25 ℃;流速:1 mL·min-1;進樣量:20 μL。

THP色譜條件:色譜柱:Kromasil(C18,4.6 mm×150 mm,5 μm);流動相:乙腈:0.1 mol·L-1醋酸銨溶液醋酸調(diào)至pH=4(35∶65,V/V);檢測波長:254 nm;柱溫:25 ℃;流速:0.8 mL·min-1;進樣量:20 μL。

2.2.2 專屬性試驗按“2.2.1”項下DTX和THP的色譜條件,分別進樣DTX和THP對照品溶液、未載藥納米粒(FA-PDA-MSNs)超聲上清溶液及載藥納米粒(FA-PDA-THP-DTX-MSNs)超聲上清溶液,檢測方法的專屬性。檢測結(jié)果如下圖所示,DTX和THP的出峰時間分別為5.514 min和7.218 min,峰形良好,且載體材料對DTX和THP的色譜峰均無影響。兩藥專屬性分別見圖1～2。

A.DTX標準品;B.MSNs;C.THP-DTX-MSNs

A.THP標準品;B.FA-PDA-MSNs;C.FA-PDA-THP-DTX-MSNs

2.2.3 標準曲線的繪制精密配制濃度為2.00、10.00、20.00、50.00、80.00、100.00 μg·mL-1的DTX標準溶液。按“2.2.1”項下的色譜條件進行測定,以峰面積(As)為縱坐標,以DTX濃度(C)橫坐標進行回歸分析,得標準曲線方程為:As=10 679.333 5C-18 389.564 1(R2=0.999 0),結(jié)果表明,DTX在2.00～100.00 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

精密配制濃度為1.78、4.44、8.88、22.20、35.52、44.40 μg·mL-1的THP標準溶液。按“2.2.1”項下的色譜條件進行測定,以峰面積(As)為縱坐標,以濃度(C)為橫坐標進行回歸分析,得標準曲線方程為:As=48 217.862 7C-69 630.331 8(R2=0.999 0)。結(jié)果表明,THP在1.78～44.40 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.4 精密度考察分別取低、中、高(10.00、50.00、100.00 μg·mL-1)濃度的DTX供試品溶液與低、中、高(4.44、22.20、44.40 μg·mL-1)濃度的THP供試品溶液,按“2.2.1”項下條件,每種樣品分別進樣6次,連續(xù)測定3 d,測定并記錄峰面積,計算DTX與THP日內(nèi)精密度及日間精密度,結(jié)RSD均小于2.00%,此方法的日內(nèi)、日間精密度良好,符合含量測定的要求。

2.2.5 加樣回收率的測定取1.0 mg·mL-1MSNs乙醇溶液1 mL分別與低、中、高(10.00、50.00、100.00 μg·mL-1)濃度的DTX供試品溶液或低、中、高(4.44、22.20、44.40 μg·mL-1)濃度的THP供試品溶液以1∶1體積比進行混合。按照“2.2.1”項下的色譜條件進行測定計算其藥物含量。回收率計算公式為:回收率=(測定量-樣品量)/加入量×100%。結(jié)果可知,兩藥加樣回收率均滿足《中國藥典》2020年版對于含量測定的要求。

2.3 藥物的負載以及包封率與載藥量檢測方法的建立稱取定量MSNs置于10 mL的載藥溶劑中,超聲至分散均勻,加入定量THP和DTX溶解,避光室溫攪拌數(shù)小時實現(xiàn)兩藥同時負載。

利用超聲溶解法對FA-PDA-THP-DTX-MSNs載藥量和包封率進行測定。即精密稱量少量FA-PDA-THP-DTX-MSNs放置于無水乙醇(1 mL)中,超聲30 min,8 000 r·min-1離心5 min,得上清,沉淀繼續(xù)加入無水乙醇(1 mL)超聲,重復(fù)3次。合并上清,以“2.2.1”項下液相條件對兩種藥物進行含量測定,計算載藥量、包封率,結(jié)果見表1。

表1 FA-PDA-THP-DTX-MSNs載藥量包封率測定結(jié)果(n=3)

表2 藥物載體比對兩藥包封率及載藥量的影響(n=3)

DL(%)=W載/W總×100%

EE(%)=W載/W投×100%

其中DL為載藥量,EE為包封率,W總為載藥載體的質(zhì)量,W載為載藥載體中藥物的質(zhì)量,W投為投藥量。

結(jié)果顯示,利用超聲溶解法測定FA-PDA-THP-DTX-MSNs中DTX和THP的包封率、載藥量準確度較高,重現(xiàn)性較好,可利用此法對納米給藥系統(tǒng)的包封率和載藥量進行測定。

2.4 制備工藝優(yōu)化

2.4.1 藥物載體比例的選擇為了優(yōu)化兩藥的負載條件,本部分對藥物載體比以及載藥時間分別進行了單因素考察。固定載藥時間為12 h,改變藥物載體比,兩藥包封率和載藥量結(jié)果顯示隨著MSNs載體的比例減小,兩種藥物的包封率均減小。當(dāng)藥物載體比在1∶1～2∶1之間時,載藥量僅有少量增加。造成這一現(xiàn)象的原因可能是由于當(dāng)藥物載體比達到1∶1時,MSNs孔道內(nèi)藥物幾乎達到飽和。因此選擇藥物載體比為1∶1。

2.4.2 載藥時間的選擇固定負載溶劑為25%乙醇溶液,藥物載體比為1∶1,改變載藥時間,兩藥包封率和載藥量結(jié)果如表3。結(jié)果顯示載藥時間在6～12 h時,隨著攪拌時間的增加,兩種藥物的載藥量和包封率均顯著增加,當(dāng)載藥時間在12～18 h時,兩種藥物的總載藥量僅有少量增加,這與在考察藥物載體比中所提到的MSNs孔道所能負載藥物達到飽和原因一致。兩種藥物隨著攪拌時間的增加,兩種藥物的進入MSNs孔道的比例時有所變化,這一現(xiàn)象產(chǎn)生的原因是由于兩種藥的結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同對于MSNs的吸附能力有所不同,因此存在一定的競爭關(guān)系。為了保證兩種藥物的最佳比例,選擇攪拌時間為12 h作為載藥時間。

表3 載藥時間對兩藥包封率及載藥量的影響(n=3)

2.4.3 聚多巴胺膜的包覆及條件優(yōu)化聚多巴胺膜包覆基本操作如下:稱取定量10.00 mg THP-DTX-MSNs置于10 mL 10 mmol·L-1的Tris-HCl溶液中(pH=8.5)超聲分散均勻,后向其中加入定量鹽酸多巴胺,室溫攪拌數(shù)小時,8 000 r·min-115 min離心得聚多巴胺膜包覆的載藥介孔二氧化硅納米粒(PDA-THP-DTX-MSNs)[16]。

首先固定包覆時間為3 h,向10 mmol·L-1的Tris-HCl(pH=8.5)溶液加入鹽酸多巴胺,使鹽酸多巴胺終濃度分別為0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 mg·mL-1。反應(yīng)結(jié)束后離心得PDA-THP-DTX-MSNs并使用激光粒度儀測定粒徑。

圖3結(jié)果表明,在鹽酸多巴胺濃度為1.0 mg·mL-1時系統(tǒng)PDI增加到0.657左右,表明測定溶液體系中粒徑大小分布十分不均勻,造成這種現(xiàn)象可能是由于溶液中鹽酸多巴胺濃度過大,部分鹽酸多巴胺自身氧化成球狀納米粒,而這種納米粒與PDA-THP-DTX-MSNs的粒徑相差較為懸殊,最終使得體系內(nèi)的PDI分散系數(shù)增加。另外為盡可能實現(xiàn)PDA對于MSNs孔道內(nèi)藥物的封堵作用,選擇鹽酸多巴胺濃度為0.50 mg·mL-1作為包覆濃度,此時納米粒子的粒徑約為183.5 nm,既可實現(xiàn)對于孔道內(nèi)藥物的封堵又滿足納米粒子被動靶向的粒徑要求。

圖3 鹽酸多巴胺濃度對于聚多巴胺膜包覆MSNs粒徑的影響(n=3)

圖4 攪拌時間對于聚多巴胺膜包覆介孔二氧化硅粒徑的影響(n=3)

在確定鹽酸多巴胺濃度的基礎(chǔ)上,分別攪拌2、3、4 h。反應(yīng)結(jié)束后離心得PDA-THP-DTX-MSNs。取少量利用去離子水超聲分散均勻,激光粒度儀測定粒徑。

結(jié)果顯示,隨著攪拌時間的增加,納米粒子的粒徑逐漸增加,PDI分散系數(shù)在固定鹽酸多巴胺濃度的條件下,無明顯變化。為同時滿足封堵及被動靶向作用,故選擇攪拌時間為3 h,此時粒徑約為186.5 nm。

2.5 葉酸的偶聯(lián)稱取1.0 mg PDA-THP-DTX-MSNs超聲分散于200 μL濃度為20 mg·mL-1的聚乙烯亞胺(PEI)溶液中,攪拌2 h,得到PEI功能化的納米顆粒。隨后將4 mL濃度為1 mg·mL-1的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)和10 mL濃度為1 mg·mL-1的N-羥基丁二酰亞胺(NHS)溶液加入1 mL FA溶液(1 mg·mL-1二甲基亞砜中),反應(yīng)30 min,以活化FA的羧基。將該溶液快速加入PEI功能化的PDA-THP-DTX-MSNs溶液中攪拌12 h,最后在8 000 r·min-1離心10 min,水和乙醇洗滌,收集FA偶聯(lián)的PDA-THP-DTX-MSNs納米粒子(FA-PDA-THP-DTX-MSNs),30 ℃條件下,鼓風(fēng)干燥,最終得FA-PDA-THP-DTX-MSNs干燥粉末。

2.6 FA-PDA-THP-DTX-MSNs納米粒的表征

2.6.1 納米粒的粒徑與電位由PDA-THP-DTX-MSNs透射電鏡圖(見圖5)可知,PDA-THP-DTX-MSNs的粒徑在MSNs的基礎(chǔ)上有所增加,在MSNs的外層有明顯的黑色薄膜形成。圖6顯示MSNs、PDA-THP-DTX-MSNs與FA-PDA-THP-DTX-MSNs 3種納米粒粒徑依次增加,PDI指數(shù)均小于0.3,具有良好的分散性。

A.MSNs;B.PDA-THP-DTX-MSNs

A.MSNs;B.PDA-THP-DTX-MSNs;C.FA-PDA-THP-DTX-MSNs

圖7顯示PDA-THP-DTX-MSNs因PDA表面羥基的存在[17]其Zeta電位在MSNs的基礎(chǔ)上進一步降低為(-24.77±1.15)mV,由于PEI胺基的質(zhì)子化,使得PEI-PDA-THP-DTX-MSNs電位反轉(zhuǎn)(+38.03±0.54)mV,最后活化后FA的羧基與PEI的胺基通過酰胺反應(yīng)進行連接。由于FA共軛作用以及對PEI胺基的質(zhì)子化覆蓋作用,使得FA-PDA-THP-DTX-MSNs的Zeta電位略微下降至(+23.3±0.67)mV[18]。

圖7 MSNs、PDA-THP-DTX-MSNs、PEI功能化PDA-THP-DTX-MSNs、FA-PDA-THP-DTX-MSNs Zeta電位(n=3)

2.6.2 N2吸附-解吸附分析N2吸附-解吸附分析試驗結(jié)果如圖8～9所示,PDA-MSNs及MSNs兩者的物理吸附-脫附等溫線均為典型的IV型脫附曲線。通過BET法和BJH法對PDA-MSNs的平均比表面積、孔容和孔徑進行計算分析,(比表面積為325.795 5 m2·g-1;孔容積為0.520 9 cm3·g-1;孔徑為3.11 nm)結(jié)果表明孔徑大小沒有變化,但是比表面積和孔容積均明顯減小,由此可得PDA可實現(xiàn)對于MSNs的封堵作用。

圖8 MSNs、PDA-MSNs氮氣吸附-解吸附等溫圖

圖9 MSNs、PDA-MSNs孔徑分布圖

2.6.3 傅立葉紅外變換光譜(FTIR)MSNs、PDA-MSNs、FA-PDA-MSNs以及FA的傅立葉紅外光掃描圖譜如圖10所示,1 087 cm-1處為Si-O-Si反對稱伸縮振動吸收峰,在966 cm-1處為Si-OH的彎曲振動吸收特征峰。808 cm-1為Si-O鍵的對稱伸縮振動吸收峰,其上均為MSNs的特征紅外峰。除FA單體外,其他樣品的紅外特征圖譜均在MSNs特征圖譜上增加其特征峰,3 814、1 541、1 238 cm-1等作為PDA苯環(huán)上的特征峰,在MSNs原有吸收的基礎(chǔ)上有一定程度的疊加,而在未共有波長處則由于PDA對MSNs進行了覆蓋,MSNs特征吸收有所減弱。1 622 cm-1和1 608 cm-1分別作為酰胺鍵的特征峰以及FA的紅外特征圖譜,均可作為FA成功偶聯(lián)的判斷依據(jù)[19-20]。

圖10 MSNs、PDA-MSNs、FA-PDA-MSNs以及葉酸的傅立葉紅外掃描圖譜

2.6.4 熱重分析(TG)圖11為熱重分析圖,圖中由上至下分別表示MSNs、PDA-MSNs和FA-PDA-MSNs的熱重曲線,結(jié)果顯示當(dāng)檢測溫度從室溫升至800 ℃時,三者的失重百分率分別為8.5921%、21.0634%以及28.8021%。MSNs在200 ℃以下重量的損失主要是由于高溫脫去其表面吸附的水;200 ℃至800 ℃之間主要是由于是制備過程中模板劑CTAB未被徹底煅燒所造成的[21]?？鄢０鍎┖臀剿氖е睾?PDA-MSNs、FA-PDA-MSNs在200 ℃至800 ℃之間的失重率分別為12.4713%和20.2100%。因此,該納米給藥系統(tǒng)中按照優(yōu)化后的條件PDA和FA靶向基團的接枝率分別為12.4713%和7.4687%。

圖11 MSNs、PDA-MSNs、FA-PDA-MSNs熱重分析曲線

2.7 體外釋藥方法與結(jié)果

2.7.1 體外釋藥試驗結(jié)果將透析袋中裝入2 mL FA-PDA-THP-DTX-MSNs 1% Tween-80 PBS以及相同劑量的THP-DTX游離溶液(各透析袋中THP、DTX含量盡量保持一致)分別放置于條件為pH 5.0、pH 7.4、pH 5.0+NIR、pH 7.4+NIR的環(huán)境中(n=3)。在釋藥開始后,分別于0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24、48、72、96 h量取1 mL釋藥介質(zhì)同時補加等量同溫空白介質(zhì)(激光照射組照射條件為2 W·cm-2,照射5 min后,后續(xù)同以上操作),計算藥物的累積釋放率Q(%)。不同條件下DTX及THP累計釋放百分率以及體外釋放曲線見圖12～13。各時間點藥物累積釋放百分率(Q)的計算公式為:

圖12 DTX和納米粒在各條件下的體外釋放曲線(n=3)

圖13 THP和納米粒在各條件下的體外釋放曲線(n=3)

式中Ct為在各時間點測得釋放介質(zhì)中的藥物濃度(mg·mL-1),W為投入藥物的總重量(mg),V0為釋放介質(zhì)的總體積,V為每次取樣的體積。

兩藥的累計釋放曲線如圖12～13所示,游離組在0～6 h快速釋放,累計釋放率可達到85%左右,且不隨pH值的變化而發(fā)生變化。而FA-PDA-THP-DTX-MSNs中的DTX及THP的釋放相較于游離藥物能夠顯著延長體外釋放時間,并且均表現(xiàn)出明顯的pH響應(yīng)。藥物在96 h的累計釋放結(jié)果顯示,FA-PDA-THP-DTX-MSNs在pH=5.0的酸性環(huán)境下釋放量可達至63.72%±1.66%,pH=7.4的中性環(huán)境下僅為16.57%±0.51%。這是由于在酸性條件下PDA會部分分解,有利于藥物的釋放。除此之外,分別在6、12、24、48、72 h時間點利用2 W·cm-2的NIR輻照5 min,結(jié)果顯示兩種藥物在NIR照射的條件下其釋放量均有一定程度的提高,且在酸性條件下,提高幅度更大約達20%。由此可見在酸性環(huán)境和近紅外激光的條件下可加快靶向納米給藥系統(tǒng)內(nèi)藥物的釋放,減少化療藥物非特異性釋放。

2.7.2 方程擬合依據(jù)上述兩藥在不同條件下各時間點下的累計釋放百分率,對FA-PDA-THP-DTX-MSNs的體外釋放曲線進行方程擬合,以進一步闡明FA-PDA-THP-DTX-MSNs的釋藥機制。

體外釋放曲線方程擬合結(jié)果顯示(見表4～5),兩種藥物無論是在pH為7.4還是5.0,以及是否有NIR照射的條件下,其釋藥曲線均與Weibull釋藥模型的擬合度最高,該模型可較好的適用于速釋和緩釋藥物的釋放擬合。為進一步研究其釋放機理,將不同條件下的藥物釋放曲線與Ritger-Peppas方程Q=Ktm(K、m為常數(shù))擬合。當(dāng)m≤0.45時,其藥物釋放機制為Fick擴散;當(dāng)0.45

表4 DTX累積釋藥曲線的擬合方程

表5 THP累積釋藥曲線的擬合方程

3 結(jié)論

本試驗中以MSNs作為納米藥物載體,DTX和THP作為模型藥物,負載于MSNs孔道及表面,利用鹽酸多巴胺在堿性條件下氧化形成PDA薄膜包覆于MSNs表面,最后利用酰胺反應(yīng)將FA靶頭修飾于PDA薄膜的表面成功制備得FA-PDA-THP-DTX-MSNs納米粒。對FA-PDA-THP-DTX-MSNs納米粒的制備工藝進行優(yōu)化,考察了優(yōu)化后納米粒的表征以及釋藥行為,證實了靶向納米粒的成功制備并能實現(xiàn)刺激性響應(yīng)釋藥。綜上所述,本研究從藥劑學(xué)的角度為實現(xiàn)化療與光療相結(jié)合的靶向治療方法提供了新的策略和依據(jù)。基于光熱效應(yīng)的聚多巴胺膜靶向納米粒作為一種新型的可實現(xiàn)光熱治療與化療相結(jié)合的納米粒,展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景,可為日后實現(xiàn)光熱治療和化療聯(lián)用提供一定的參考。但與此同時,新的遞送系統(tǒng)在臨床應(yīng)用方面還存在著各方面的困難,具體例如其表面正電荷極易與血液中的組分發(fā)生聚集而導(dǎo)致生物毒性增強和生物利用度降低,可使用如透明質(zhì)酸或中藥多糖進行逆轉(zhuǎn)電荷。因此在后續(xù)實驗中,FA-PDA-THP-DTX-MSNs納米遞送系統(tǒng)可進行生物安全性以及體內(nèi)外藥效學(xué)實驗,對其進行進一步優(yōu)化。