◎ 白佩玲

（甘肅省定西市食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，甘肅 定西 743000）

近幾年，在經(jīng)濟(jì)高質(zhì)量發(fā)展的背景下，農(nóng)藥殘留所引起的食品安全問(wèn)題越來(lái)越受到人們的關(guān)注，進(jìn)而對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的能力提出了更高的要求，監(jiān)管部門(mén)組織的能力驗(yàn)證也越來(lái)越頻繁，且難度逐年遞增[1-2]。為從事農(nóng)藥殘留檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室能夠順利通過(guò)能力驗(yàn)證，本文就農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證給出了一些建議。

1 考核前的準(zhǔn)備工作

1.1 人員的準(zhǔn)備

按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）規(guī)定，農(nóng)藥殘留的檢測(cè)結(jié)果通常以mg·kg-1表示。目前，農(nóng)藥殘留的檢測(cè)儀器主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法，不管使用哪個(gè)儀器檢測(cè)，儀器初始測(cè)得的含量以質(zhì)量比體積表示，即儀器檢測(cè)結(jié)果顯示是ng·mL-1、μg·mL-1或者其他的質(zhì)量與體積比，最后檢測(cè)結(jié)果以mg·kg-1表示就需要進(jìn)行簡(jiǎn)單的計(jì)算，但部分檢測(cè)人員在樣品經(jīng)過(guò)一系列前處理后理不清換算關(guān)系，尤其在接到濃度比較大的盲樣考核后，要確保所測(cè)濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的中間點(diǎn)附近，就需要對(duì)樣品進(jìn)行稀釋處理，這樣導(dǎo)致一部分檢驗(yàn)人員無(wú)法正確對(duì)樣品進(jìn)行稀釋。因此，檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在接到盲樣考核后，應(yīng)選擇對(duì)相關(guān)項(xiàng)目操作熟練、理論知識(shí)扎實(shí)的檢驗(yàn)員。因?yàn)闃悠非疤幚砑皟x器設(shè)備操作的各環(huán)節(jié)都會(huì)影響到盲樣的檢測(cè)結(jié)果。例如，在乙酰甲胺磷的盲樣考核中，涉及氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法等，其中氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法樣品最后一步處理均需要經(jīng)過(guò)氮吹復(fù)溶，對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)上描述的“氮吹近干”這一步有好多檢驗(yàn)人員控制不當(dāng)，會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)，在盲樣考核中應(yīng)至少安排兩個(gè)人搭檔進(jìn)行，盲樣考核結(jié)果對(duì)于檢測(cè)機(jī)構(gòu)的聲譽(yù)很重要，因此，檢驗(yàn)人員在檢驗(yàn)過(guò)程中難免會(huì)出現(xiàn)緊張、思維混亂的現(xiàn)象，兩人配合能起到相互監(jiān)督和相互提醒的作用。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣的準(zhǔn)備

準(zhǔn)備能力驗(yàn)證樣品處理所用到試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)按需足量采購(gòu)能力驗(yàn)證樣品（以下簡(jiǎn)稱(chēng)盲樣）處理所用到試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣。試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣的采購(gòu)應(yīng)嚴(yán)格按照本單位的體系文件規(guī)定實(shí)施。例如，供應(yīng)商是經(jīng)過(guò)合格判定且有資質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)選擇能溯源到SI 測(cè)量單位或有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供應(yīng)商。建議檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)所申請(qǐng)的標(biāo)準(zhǔn)品試劑耗材是之前經(jīng)過(guò)驗(yàn)證符合標(biāo)準(zhǔn)要求的。這樣在盲樣檢測(cè)時(shí)間緊迫的情況下會(huì)減輕檢驗(yàn)人員的壓力，檢驗(yàn)人員不用再對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材進(jìn)行驗(yàn)證。

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)備

對(duì)農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品的采購(gòu)，建議最好購(gòu)買(mǎi)濃度為1 000 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，這樣經(jīng)過(guò)一步稀釋到100 μg·mL-1，濃度相對(duì)大，不僅保存期限長(zhǎng)而且后面盲樣檢測(cè)配制標(biāo)液過(guò)程中的選擇性也大。例如，某檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)所使用的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀是賽默飛TSQ8000Evo，在盲樣的檢測(cè)中，檢驗(yàn)人員在接到盲樣考核后，首先要對(duì)盲樣考核項(xiàng)目的儀器條件進(jìn)行優(yōu)化，而賽默飛TSQ8000Evo 在儀器條件的優(yōu)化過(guò)程中通常使用3 ～8 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，如果檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)申請(qǐng)購(gòu)買(mǎi)回來(lái)的原始標(biāo)準(zhǔn)品濃度為100 μg·mL-1，規(guī)格為1.2 mL/支，經(jīng)過(guò)一步稀釋到10 μg·mL-1，只有10 mL，通過(guò)幾步方法優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)溶液就被用完，嚴(yán)重制約了后續(xù)盲樣的檢測(cè)工作。

1.2.2 質(zhì)控樣的準(zhǔn)備

質(zhì)控樣作為內(nèi)部質(zhì)量控制的一種手段，是很多檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在盲樣考核中的首選，所以選擇合適的質(zhì)控樣尤為關(guān)鍵。建議食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在購(gòu)買(mǎi)質(zhì)控樣時(shí)。至少購(gòu)買(mǎi)兩個(gè)廠家的不同濃度的質(zhì)控樣，這樣就不會(huì)使檢驗(yàn)人員出現(xiàn)因一個(gè)質(zhì)控樣做不到范圍內(nèi)而懷疑質(zhì)控樣有問(wèn)題的僥幸心理。

1.3 確定檢測(cè)方法

檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在接到能力驗(yàn)證的通知后，依據(jù)自己所現(xiàn)有的資質(zhì)，選擇適宜的檢測(cè)方法。例如，某市場(chǎng)監(jiān)督管理部門(mén)組織的乙酰甲胺磷的能力驗(yàn)證，某檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)同時(shí)具有《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中331 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.121—2021）的資質(zhì)，氣相色譜法相較于氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)較弱，液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法相較于氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法能夠消除襯管的吸附作用。建議檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)同時(shí)用3 種方法進(jìn)行加標(biāo)回收和質(zhì)控樣的檢測(cè)對(duì)比分析，選擇結(jié)果良好的方法進(jìn)行盲樣檢測(cè)。

1.4 儀器設(shè)備的準(zhǔn)備

盲樣檢測(cè)過(guò)程中，確保所使用的儀器設(shè)備處于良好狀態(tài)。例如，運(yùn)用《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測(cè)定乙酰甲胺磷，前處理過(guò)程中用到三角瓶、燒杯、刻度吸管等玻璃容器，應(yīng)當(dāng)保證玻璃容器清洗干凈，以水滴既不聚集成滴，也不成股流下為標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)刻度吸管等對(duì)檢測(cè)結(jié)果計(jì)算有影響的應(yīng)當(dāng)提前進(jìn)行校準(zhǔn)。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在接到能力驗(yàn)證通知后，按照實(shí)驗(yàn)室自身所具有的資質(zhì)，最好能夠啟動(dòng)所具備資質(zhì)的所有儀器設(shè)備，以便對(duì)結(jié)果進(jìn)行更好的對(duì)比。提前優(yōu)化儀器條件，使儀器達(dá)到良好的狀態(tài)，應(yīng)將儀器設(shè)備及相關(guān)參數(shù)和分析條件調(diào)至最優(yōu)，避免雜峰及拖尾現(xiàn)象，保證相應(yīng)參數(shù)的峰型滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范的要求。

2 考核過(guò)程中的質(zhì)量控制

2.1 關(guān)鍵點(diǎn)把控

盲樣檢測(cè)的過(guò)程中，檢驗(yàn)人員應(yīng)該對(duì)關(guān)鍵點(diǎn)進(jìn)行控制。整個(gè)能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)包括前處理過(guò)程和儀器分析過(guò)程。前處理過(guò)程要求操作人員細(xì)心、準(zhǔn)確[3-4]。例如，在稱(chēng)樣過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)清晰準(zhǔn)確地記錄稱(chēng)樣量。一般在稱(chēng)樣時(shí)，加標(biāo)回收、質(zhì)控樣、盲樣都會(huì)稱(chēng)平行樣，有一少部分檢驗(yàn)員會(huì)將兩個(gè)平行樣的稱(chēng)樣量因馬虎大意而記反，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果計(jì)算出現(xiàn)誤差。再比如，在《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測(cè)定乙酰甲胺磷時(shí)，在蔬菜水果樣品的提取過(guò)程中，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定稱(chēng)取20 g 左右的樣品，加入40 mL 乙腈，用高速勻漿機(jī)15 000 r·min-1勻漿2 min，有些檢驗(yàn)員會(huì)因單位自身設(shè)備不符合要求，隨意改變轉(zhuǎn)速或者縮短提取時(shí)間，導(dǎo)致最后結(jié)果異常。此外，在準(zhǔn)確吸取10 mL 在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干的過(guò)程中，好多檢驗(yàn)員因使用刻度吸管不當(dāng)而影響檢驗(yàn)結(jié)果。因此，作為檢驗(yàn)員，不管是在平時(shí)的檢驗(yàn)過(guò)程中還是在盲樣檢測(cè)過(guò)程中，都應(yīng)當(dāng)對(duì)關(guān)鍵點(diǎn)進(jìn)行控制，耐心細(xì)致地應(yīng)對(duì)檢驗(yàn)過(guò)程中的每一個(gè)重要環(huán)節(jié)，保證檢驗(yàn)結(jié)果的客觀準(zhǔn)確。

2.2 加強(qiáng)內(nèi)部質(zhì)量控制

檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在接到能力驗(yàn)證通知后，在試劑、耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣采購(gòu)回來(lái)，儀器狀態(tài)正常后，應(yīng)進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制活動(dòng)。在能力驗(yàn)證中，所用到的內(nèi)部質(zhì)量控制主要有質(zhì)控樣和加標(biāo)回收兩種。建議先用加標(biāo)回收的結(jié)果對(duì)樣品前處理過(guò)程進(jìn)行評(píng)價(jià)，如果加標(biāo)回收結(jié)果良好，接下來(lái)就可以采取加標(biāo)回收和質(zhì)控樣同時(shí)進(jìn)行，只有加標(biāo)回收和質(zhì)控樣的結(jié)果都在標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定范圍內(nèi)，才可以對(duì)盲樣進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)加標(biāo)回收和質(zhì)控樣兩者中有一方結(jié)果不符合標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定時(shí)，操作人員需對(duì)其所有影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素進(jìn)行分析，找出原因[5]。

2.3 能力驗(yàn)證樣品（盲樣）的檢測(cè)

當(dāng)實(shí)驗(yàn)室在接到盲樣后，如果不能立即進(jìn)行測(cè)試，應(yīng)按照盲樣的要求對(duì)其進(jìn)行妥善的儲(chǔ)存保管。如果加標(biāo)回收和質(zhì)控樣結(jié)果都在標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定范圍內(nèi)時(shí)，由于時(shí)間原因，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡快對(duì)盲樣進(jìn)行測(cè)試，在盲樣測(cè)試過(guò)程中，由于盲樣的樣品量有限，建議實(shí)驗(yàn)室先按之前成熟的前處理方法稱(chēng)取一份樣品對(duì)其進(jìn)行處理，上機(jī)大概確定盲樣的結(jié)果值，當(dāng)盲樣的結(jié)果大概確定后，考慮稱(chēng)樣量、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的配制，使盲樣的結(jié)果濃度最好落在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的中間點(diǎn)附近。以上因素均無(wú)疑惑后，應(yīng)對(duì)盲樣盡快測(cè)試，在盲樣測(cè)試過(guò)程中，應(yīng)同時(shí)帶加標(biāo)回收和質(zhì)控樣對(duì)盲樣結(jié)果進(jìn)行監(jiān)控和評(píng)價(jià)。

3 結(jié)果提交前的數(shù)據(jù)分析

盡管前處理過(guò)程和儀器設(shè)備對(duì)盲樣結(jié)果的影響很大，但也有一些檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)因數(shù)據(jù)處理出現(xiàn)問(wèn)題導(dǎo)致結(jié)果不滿(mǎn)意。因此，在數(shù)據(jù)處理過(guò)程注意倍數(shù)關(guān)系以及單位換算，詳細(xì)地分析依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)給出的計(jì)算公式，再結(jié)合處理步驟，尤其是當(dāng)接到檢測(cè)結(jié)果比較大的盲樣（上機(jī)濃度大于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的最大點(diǎn)）時(shí)，為了確保上機(jī)濃度在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的中間點(diǎn)附近，需對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)@時(shí)結(jié)果的計(jì)算一定要把稀釋倍數(shù)帶進(jìn)去。以《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測(cè)定乙酰甲胺磷為例，一檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)接到的盲樣是果蔬汁中的乙酰甲胺磷能力驗(yàn)證，在樣品的處理過(guò)程中按照蔬菜水果、食用菌對(duì)樣品進(jìn)行處理，其他處理步驟完全按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，只在后面將準(zhǔn)確吸取10 mL 在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干后用丙酮洗滌最后定容到5 mL 改為準(zhǔn)確吸取2.5 mL在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干后用丙酮洗滌最后定容到5 mL，這樣在結(jié)果的計(jì)算過(guò)程中應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)處理的基礎(chǔ)上給最終的結(jié)果乘以2 才是實(shí)際的結(jié)果。

4 結(jié)語(yǔ)

能力驗(yàn)證作為評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部檢測(cè)/校準(zhǔn)能力的活動(dòng)，是考察實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系是否運(yùn)行良好、檢驗(yàn)結(jié)果是否準(zhǔn)確有效的有效手段，所以參加實(shí)驗(yàn)室應(yīng)慎重對(duì)待，同時(shí)鼓勵(lì)實(shí)驗(yàn)室積極主動(dòng)參與權(quán)威機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室比對(duì)/能力驗(yàn)證活動(dòng)。