程海鵬　楊近越　耿久榮

摘 要：鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉是《中國獸藥典》上為數(shù)不多的復方抗生素獸藥，抗菌譜和活性比單方制劑更廣更強，是抗生素聯(lián)合應用的典范之一。市售部分產(chǎn)品采用粉碎工藝增加溶解性，有些采取添加抗結劑防止板結，少量產(chǎn)品進行輻照滅菌后用于注射。本文就鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉的制劑工藝及其產(chǎn)品穩(wěn)定性進行了試驗研究，以期能對本品制劑工藝和現(xiàn)場使用有一定指導作用。

關鍵詞：鹽酸大觀霉素；鹽酸林可霉素；制劑工藝；臨床應用

中圖分類號：S943? ? ?文獻標識碼：B 文章編號：1673-1085（2023）07-0001-08

鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉可用在5～7日齡雛雞革蘭氏陰性細菌、革蘭氏陽性細菌及支原體感染[1]，能有效控制雛雞大腸桿菌和支原體混合感染，有效防控氣囊炎和心包炎[2]。羅永江等[3]發(fā)現(xiàn)，鹽酸林可—硫酸大觀霉素可溶性粉在治療霉形體病或與大腸桿菌混合感染時顯效較快，無明顯毒副作用，是理想的抗禽霉形體的復方藥。田玲等[4]用鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素注射液治療仔豬腹瀉，結果治愈率達到96.7%，總有效率達到100%，顯著好于痢菌凈和氟苯尼考。章壽民等[5]發(fā)現(xiàn)林可—壯觀合劑能有效防治豬支原體肺炎。鹽酸林可霉素－硫酸大觀霉素混懸注射液除具有治療作用外，還能促進豬、雞生長及顯著改善飼料報酬，使料肉比降低 5.39%[6]。

大觀霉素對部分支原體（如雞毒支原體、火雞支原體、滑液支原體等）敏感，對多種革蘭氏陰性菌有抑制作用[7]；作用于細菌核蛋白體30s亞單位，有效抑制細菌細胞蛋白質合成[8]。大觀霉素有關物質來源于發(fā)酵過程，主要有（4R）-雙氫大觀霉素和（4S）-雙氫大觀霉素，前者是有效組分，后者為雜質[9-10]。大觀霉素對熱較敏感，尤其水溶液中半縮酮結構非常不穩(wěn)定，易發(fā)生開環(huán)和閉環(huán)[11]。鹽酸林可霉素主要針對革蘭氏陽性菌，抗菌性可與大觀霉素有效協(xié)同，對一部分革蘭氏陰性菌也有一定抗性[6]；容易富集于骨組織，對各種厭氧菌有很好的抗菌作用[12]。林可霉素與細菌核糖體的 50s亞基相互作用，抑制細菌的蛋白質合成[7]。鹽酸林可霉素理化性質非常穩(wěn)定，在70 ℃保質期可以到6個月，并且保存過程中無需遮光，其水溶液在室溫下保持2年不失活[13]。

因大觀霉素內(nèi)服吸收率僅7%，林可霉素生物利用度為30%～40%[7]，兩者口服生物利用度都比較低，所以臨床經(jīng)常溶于油乳劑滅活疫苗注射使用。鹽酸大觀霉素結晶水多（5個結晶水，水分16%～20%）[1]，使得鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉含水分高，在生產(chǎn)、儲運和使用過程中極易結塊變色，發(fā)生性狀、有關物質和含量等指標的變化，甚至出現(xiàn)不符合質量標準的情況。本文就鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉不同制劑工藝和生產(chǎn)條件對產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響進行試驗，以確定更好的工藝條件，避免不恰當?shù)纳a(chǎn)方式給產(chǎn)品帶來不利影響。

1? 儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫高效液相色譜儀1260II[G7111A型號四元泵，G7129A型號自動進樣器，G7116A型號柱溫箱，G7114A型號檢測器，C.01.10（287）版本色譜工作站]，抑菌圈測量儀（北京先驅威鋒技術有限公司），生化培養(yǎng)箱（德國賓德），水分測定儀（北京先驅威鋒技術有限公司），十萬分之一天平（梅特勒公司），薄層成像系統(tǒng)（德國德賽克科技有限公司）。

1.2 試驗藥品及試劑

大觀霉素標準品，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，批號：K0261705，效價：644單位/mg。林可霉素，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，批號：K0102002，含量：84.9%。其余試劑：甲醇，色譜級；硼砂、磷酸、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀，都為分析純。

2? 樣品及方法

2.1 樣品的制備

鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉，規(guī)格：5 g；大觀霉素2 g（200萬IU）與林可霉素1 g（按C18H34N2O6S計）。原料：鹽酸大觀霉素，批號3232009035，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司。鹽酸林可霉素，批號190122022，河南天方藥業(yè)有限公司。

2.1.1 樣品1 鹽酸大觀霉素、鹽酸林可霉素和葡萄糖粉按《中國獸藥典》中本品制法制作樣品，完成配制、混合，并即時用市售產(chǎn)鋁箔袋（單面14絲，PET 2絲+VMPET 2+PE 8絲+PET 2絲）分裝封口。生產(chǎn)環(huán)境濕度45%±5%，溫度21℃±2℃，標記為樣品1，三批的批號分別為21010401、21010402、21010403。

2.1.2 樣品2 制樣環(huán)境同樣品1。按樣品1制法，混合后在平盤均勻放置，厚度不超過0.5 cm，在環(huán)境濕度65%±2%暴露4 h，標記為樣品2，三批的批號分別為21010501、21010502、21010503。

2.1.3 樣品3 制樣環(huán)境同樣品1。鹽酸大觀霉素、鹽酸林可霉素和葡萄糖粉分別進行粉碎，全部通過六號篩（100目），再完成配制、混合，并即時用市售產(chǎn)品鋁箔袋分裝封口，標記為樣品3，三批的批號分別為21010601、21010602、21010603。

2.1.4 樣品4 制樣環(huán)境同樣品1。制樣過程中用羥丙基倍他環(huán)糊精替代總制樣量中6%葡萄糖粉，增強產(chǎn)品抗結性，標記為樣品4，三批的批號分別為21010701、21010702、21010703。

2.1.5 樣品5 制樣環(huán)境同樣品1。? 按樣品1制法，用塑料袋（單面15絲，PE3絲+PET12絲）包裝封口后，在北京鴻儀四方輻射技術股份有限公司經(jīng)60Co-r射線用5kGy輻照劑量滅菌0.5 h，標記為樣品5，三批的批號分別為21010801、21010802、21010803。

2.2 試驗方法

加速試驗：按照《中國獸藥典》在溫度40℃±2℃，相對濕度75%±5%的條件下放置6個月。在試驗期間第0、1、2、3、6個月取樣檢測[1]。

依據(jù)《中國獸藥典》中鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉的質量標準，考察5個樣品穩(wěn)定性，監(jiān)測性狀（白色或類白色粉末）、外觀均勻度（色澤均勻，無花紋與色斑）、粒度[100%通過五號篩（80目）]、水分（小于等于15%）、林可霉素B含量（不得超過林可霉素與林可霉素B峰面積和的5.0%）、大觀霉素含量（應為標示量的90.0%～110.0%）和林可霉素含量（應為標示量的90.0%～110.0%）[1]。

3? 試驗結果

3.1 穩(wěn)定性結果

樣品1、樣品2、樣品3、樣品4、樣品5的加速試驗結果分別見表 1、表2、表3、表4、表5。

表1樣品1結果顯示，在符合獸藥GMP要求的環(huán)境和規(guī)程條件下生產(chǎn)的鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉，在6個月考察期中，各監(jiān)測項均符合質量標準要求。其中，水分、林可霉素B略有上升，大觀霉素和林可霉素含量有較明顯下降。

樣品2模擬生產(chǎn)或使用過程產(chǎn)品在較高濕度環(huán)境下靜態(tài)裸露4 h，從3個月開始，性狀、外觀均勻度和粒度項均不符合標準要求。雖然水分項始終合格，但在0～6個月時所有指標均比樣品1有明顯提高。

樣品3參考部分企業(yè)的工藝對所有物料都進行粉碎，以增加溶解度。在6個月時，樣品3的性狀、外觀均勻度和粒度項均不符合標準要求。樣品3的穩(wěn)定性好于樣品2，說明物料粉碎全部通過六號篩，對穩(wěn)定性的影響小于產(chǎn)品暴露在濕度65%±2%的環(huán)境4 h。但樣品3的穩(wěn)定性，明顯低于樣品1。

樣品4添加了水溶性抗結劑，各時間段的所有項目都符合要求。結果顯示各項優(yōu)于樣品1，明顯優(yōu)于樣品2和3。

樣品5參考個別企業(yè)的工藝對產(chǎn)品進行輻照滅菌，便于臨床應用于注射，發(fā)現(xiàn)輻照滅菌對產(chǎn)品穩(wěn)定性產(chǎn)生了非常明顯的影響。其中，性狀、外觀均勻度和粒度在1個月時不符合標準要求，6個月時所有項目基本都不達標。

3.2 溶解性

樣品1～5號0個月溶解度見表6。

4? 結論

（1）鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉生產(chǎn)過程中，如樣品1按照獸藥GMP要求嚴格控制物料裸露環(huán)境的溫濕度，試驗結果皆符合要求。樣品2在六個月考察過程中，水分項都符合要求；但在3個月時，產(chǎn)品中出現(xiàn)黃色粉粒，外觀均勻度檢測發(fā)現(xiàn)黃色色斑，不符合要求。

（2）通過粉碎（100%通過五號篩提高到通過六號篩）有助于提高產(chǎn)品溶解性，純化水中樣品3溶解度比樣品1增加了1.5 g。但因物料表面積增加，吸濕性增強，在6個月時性狀、外觀均勻度和粒度都不符合要求。

（3）產(chǎn)品中添加6%羥丙基倍他環(huán)糊精，比較明顯地增強了產(chǎn)品的穩(wěn)定性和溶解性。在長期穩(wěn)定性考察過程中，36個月時樣品1和4依然合格，但樣品4各項指標變化幅度更小、更穩(wěn)定，同時溶解性依然最優(yōu)。

（4）鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉經(jīng)60Co-r用5kGy輻照滅菌，無菌檢測項符合要求，但對產(chǎn)品穩(wěn)定性造成了極大影響。產(chǎn)品在1個月時，性狀、外觀均勻度和粒度都不符合要求；林可霉素B在3個月時兩批不符合要求；基本所有項目在6個月時都不符合要求。含水量高的制劑，因照射而產(chǎn)生水的輻照分解物H和OH自由基或H2O2、H2O過氧基等，都會快速增加有機成分的分解率。因此，水分含量高的獸藥產(chǎn)品，很難既滅菌消毒又能保全產(chǎn)品[14]。

（5）林可霉素中有A、B等組分，其中林可霉素中A有最高的藥效和最低的毒性；但林可霉素B組分，其藥效只有A組分的四分之一，而毒性要大很多，而且B組分是生產(chǎn)林可霉素最主要的副產(chǎn)品[15]。林可霉素在不同pH值和溫度范圍內(nèi)降解機理不同，會降解為含林可霉素B在內(nèi)的有關物質，降解反應服從一級反應動力學規(guī)律。降解為需能過程，給予能量會提高降解速度[16-17]。

鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉水分高，生產(chǎn)儲運過程中控制不當容易出現(xiàn)有效期內(nèi)產(chǎn)品不合格的情況，穩(wěn)定性明顯差于鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素預混劑[100 g：（2.2+2.2）g]。預混劑穩(wěn)定性試驗結果顯示，林可霉素含量下降不高于1.59%，大觀霉素含量下降不高于1.08%，其他項目變化不明顯[18]。分析原因應是預混劑含量低、產(chǎn)品水分少以及性狀為淡褐色導致有色度微小變化表現(xiàn)不明顯等有關。上述試驗結果確認了本品生產(chǎn)過程中需要嚴格控制環(huán)境溫濕度和物料暴露時間，即溫度控制在18～23℃、濕度為35%～50%，僅在除塵投料口和制劑分裝過程中瞬時暴漏，保證在獸藥GMP規(guī)范要求的相對封閉設備中完成自動化生產(chǎn)。本品適宜用粒度達標的鹽酸大觀霉素、鹽酸林可霉素、水溶性抗結劑和所需葡萄糖等原輔料直接混合包裝，不宜用或粉碎為過細物料，否則影響產(chǎn)品穩(wěn)定性。如果能適量添加水溶性抗結劑，有助于提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和溶解度，嚴禁對本品進行輻照滅菌，否則將很快失效。儲運過程中也要遵守常溫密閉保存的要求，才能保證產(chǎn)品始終符合標準要求。希望通過本試驗，給予鹽酸大觀霉素鹽酸林可霉素可溶性粉生產(chǎn)、儲運和使用環(huán)節(jié)一些指導，使得產(chǎn)品能有更好的臨床效果。

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Spectinomycin Hydrochloride and Lincomycin Hydrochloride Soluble Powder Preparation Technology and Stability Study

CHENG Haipeng，YANG Jinyue，GENG Jiurong

（Beijing Kang Mu Biotechnology Co.， LTD，Beijing? ?101109， China）

Abstract： Spectinomycin hydrochloride and lincomycin hydrochloride soluble powder is one of the few compound antibiotic veterinary drugs listed in the Chinese Veterinary Pharmacopoeia. Its antibacterial spectrum and activity are broader and stronger than that of monotherapy preparation， and it is one of the models of antibiotic combined application. Some products on the market adopt grinding technology to increase the solubility while others adopt the addition of anti-caking agent to prevent binding， and a small number of products are sterilized by irradiation for injection. In this paper， the preparation technology and stability of spectinomycin hydrochloride and lincomycin hydrochloride soluble powder were studied in order to provide some guidance for the process and field use of this product.

Keywords：? Spectinomycin hydrochloride; Lincomycin hydrochloride; Preparation process; Clinical application