張艷陽(yáng),嚴(yán)勝利,張麥利,韓曉燕

陜西省渭南市中心血站,陜西渭南 714000

采供血機(jī)構(gòu)對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本采用血清學(xué)和核酸聯(lián)合檢測(cè)的策略[1]可降低經(jīng)血疾病傳播風(fēng)險(xiǎn),保障臨床輸血安全[2-4]。分析檢測(cè)結(jié)果不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征,調(diào)整獻(xiàn)血前征詢(xún)和初篩策略,可以有效避免不合格血液的采集,節(jié)約血液資源,降低血站運(yùn)營(yíng)成本[5]。現(xiàn)將本實(shí)驗(yàn)室2017年1月至2021年12月無(wú)償獻(xiàn)血人群血液檢測(cè)結(jié)果及人群結(jié)構(gòu)特征報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1血液標(biāo)本來(lái)源 2017年1月至2022年12月渭南地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者219 948例,年齡18～60歲,健康情況均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB/18467)。

1.2儀器與試劑 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)檢測(cè)設(shè)備:Beckman Coulter AU480全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司);血清學(xué)檢測(cè)設(shè)備:TECAN EVO/150全自動(dòng)加樣儀(瑞士帝肯公司),FAME24/20全自動(dòng)酶免分析儀(瑞士哈美頓公司);核酸檢測(cè)設(shè)備:瑞士Roche Cobas s201全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng),包括Hamilton MICROLAB STAR全自動(dòng)混樣儀,COBAS Amplipre核酸提取儀及COBAS Taqman核酸擴(kuò)增儀;輔助設(shè)備:低速離心機(jī)(型號(hào)KDC-1044),血液冷藏箱(型號(hào)HXC-258),試劑冰箱(YCD-280,SC-276),生物安全柜(蘇凈蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司,BHC-1300)。ALT檢測(cè)試劑為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司產(chǎn)品;乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)、人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體(抗-HIV)和梅毒螺旋體抗體(抗-TP)的一檢試劑為北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份公司產(chǎn)品,二檢試劑分別為意大利索靈、珠海麗珠、法國(guó)伯樂(lè)和英科新創(chuàng)公司產(chǎn)品;核酸檢測(cè)試劑為Roche TaqScreen MPX Test(version 2.0)試劑盒。所用試劑嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。ALT檢測(cè)所用質(zhì)控品為英國(guó)朗道公司產(chǎn)品,血清學(xué)4項(xiàng)和核酸檢測(cè)質(zhì)控品均來(lái)自康徹思坦公司。

1.3方法 采用速率法對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行1次ALT檢測(cè);采用ELISA對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),且由不同人員用2種試劑對(duì)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV(包括P24抗原)和抗-TP項(xiàng)目進(jìn)行兩次檢測(cè),分別稱(chēng)為一檢和二檢,并嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件執(zhí)行。ELISA 4項(xiàng)單試劑有反應(yīng)性標(biāo)本用原試劑做雙孔復(fù)查;復(fù)查結(jié)果至少1孔有反應(yīng)性和雙試劑有反應(yīng)性標(biāo)本均判讀為初篩有反應(yīng)性,抗-HIV項(xiàng)目單試劑和雙試劑有反應(yīng)性標(biāo)本及核酸檢測(cè)不合格標(biāo)本送渭南市疾病預(yù)防控制中心(CDC)進(jìn)行確認(rèn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示,多個(gè)標(biāo)本率之間的比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.12017-2021年無(wú)償獻(xiàn)血人群血清學(xué)和核酸檢測(cè)不合格率 2017-2021年血清學(xué)共檢測(cè)219 948例無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本,血清學(xué)檢測(cè)不合格率為1.31%(2 885/219 948),不同年份間血清學(xué)總不合格率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。2017-2021年核酸檢測(cè)共218 951例無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本,總不合格率為0.72‰(157/218 951),不同年份間核酸檢測(cè)不合格率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP的總不合格率分別為0.33%、0.43%、0.13%、0.16%和0.25%,不同年份間除了抗-HCV項(xiàng)目外,ALT、HBsAg、抗-HIV和抗-TP不合格率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表2。

表1 2017-2021年無(wú)償獻(xiàn)血人群血清學(xué)和核酸檢測(cè)不合格率比較

表2 2017-2021年無(wú)償獻(xiàn)血人群血清學(xué)項(xiàng)目不合格率比較[n(%)]

2.2ELISA 4項(xiàng)血液檢測(cè)結(jié)果不合格情況 對(duì)2 152例獻(xiàn)血者標(biāo)本HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP項(xiàng)目檢測(cè)不合格情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP檢測(cè)項(xiàng)目一檢有反應(yīng)性二檢陰性[一檢(+)二檢(-)]、二檢有反應(yīng)性一檢陰性[一檢(-)二檢(+)]和雙試劑均有反應(yīng)性[一檢(+)二檢(+)]占總不合格人數(shù)的比例比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 ELISA 4項(xiàng)血液檢測(cè)結(jié)果不合格情況統(tǒng)計(jì)分析

2.3核酸檢測(cè)混樣有反應(yīng)性標(biāo)本的拆分陽(yáng)性率 將294個(gè)混樣有反應(yīng)性pool的Ct值分為6個(gè)區(qū)間,分別統(tǒng)計(jì)各區(qū)間的拆分陽(yáng)性率,不同混檢Ct值分布區(qū)間拆分陽(yáng)性率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表4。

表4 核酸檢測(cè)混樣陽(yáng)性標(biāo)本的Ct值分布及拆分陽(yáng)性率結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析

2.43 042例血液檢測(cè)結(jié)果不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征分析 2 885例血清學(xué)檢測(cè)不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征,不同獻(xiàn)血次數(shù)的獻(xiàn)血者ALT不合格率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),不同性別、年齡、文化程度及職業(yè)的獻(xiàn)血者ALT不合格率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);不同性別獻(xiàn)血者HBsAg不合格率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),不同年齡、文化程度、職業(yè)和獻(xiàn)血次數(shù)的獻(xiàn)血者HBsAg不合格率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);不同性別、年齡、文化程度、職業(yè)和獻(xiàn)血次數(shù)的獻(xiàn)血者抗-HCV和抗-TP不合格率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);抗-HIV項(xiàng)目中,不同性別和文化程度的獻(xiàn)血者不合格率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),不同年齡、職業(yè)和獻(xiàn)血次數(shù)的獻(xiàn)血者不合格率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01。見(jiàn)表5。分析157例核酸檢測(cè)不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征,不同性別、年齡、文化程度及職業(yè)的獻(xiàn)血者核酸檢測(cè)不合格率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),不同獻(xiàn)血次數(shù)的獻(xiàn)血者核酸檢測(cè)不合格率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表6。

表5 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征分析[n(%)]

表6 核酸檢測(cè)結(jié)果不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征分析[n(%)]

3 討 論

經(jīng)血傳播疾病的血清學(xué)和核酸檢測(cè)結(jié)果是血液安全的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)。回顧性分析血液檢測(cè)結(jié)果及不合格結(jié)果獻(xiàn)血人群的結(jié)構(gòu)特征,可制訂精準(zhǔn)、合理的無(wú)償獻(xiàn)血招募及健康教育策略,節(jié)約血液資源,確保臨床用血安全。需進(jìn)一步加強(qiáng)血液檢測(cè)過(guò)程中的質(zhì)量管理,優(yōu)化檢測(cè)流程,合理選用ELISA檢測(cè)試劑,降低血液檢測(cè)成本。

表1～2結(jié)果顯示,2017-2021年無(wú)償獻(xiàn)血人群血清學(xué)檢測(cè)總不合格率1.31%(2 885/219 948),高于濟(jì)南地區(qū)的0.66%(1 076/162 713)[6],低于嘉興地區(qū)的2.05%(6 558/320 312)[7]和廣州地區(qū)的3.01%(87 988/2 918 469)[4];血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目不合格率以HBsAg項(xiàng)目最高(0.43%,955/219 948),ALT項(xiàng)目次之(0.33%,733/219 948),抗-HCV最低(0.13%,296/219 948)。2017-2021年核酸檢測(cè)總不合格率為0.72‰,高于承德地區(qū)的0.40‰(31/77 886)[8]和濟(jì)南地區(qū)的0.37‰(105/280 818)[9],但低于本實(shí)驗(yàn)室2016年核酸檢測(cè)不合格率(0.96‰,33/34 251)[10]。不同年份間核酸檢測(cè)不合格率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。本實(shí)驗(yàn)室血液檢測(cè)結(jié)果不同于其他地區(qū)的原因分析:(1)不同地區(qū)間經(jīng)血傳播疾病的流行率、血液檢測(cè)設(shè)備、血液檢測(cè)試劑及血液檢測(cè)模式等存在差異;(2)因血清學(xué)檢測(cè)不合格結(jié)果未經(jīng)過(guò)確證,所以血清學(xué)檢測(cè)不合格率的高低在一定程度上可反映實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力,高于其他地區(qū)的不合格率提示需進(jìn)一步提升本實(shí)驗(yàn)室的血液檢測(cè)能力;(3)核酸檢測(cè)對(duì)隱匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)有很好的檢出率,所以隨著核酸檢測(cè)的開(kāi)展,多次獻(xiàn)血者人群中的OIB者逐步被屏蔽,核酸檢測(cè)不合格率理論上呈逐年降低趨勢(shì),本實(shí)驗(yàn)室的核酸檢測(cè)結(jié)果也符合此規(guī)律。

表3 ELISA 4項(xiàng)血液檢測(cè)結(jié)果不合格情況分析顯示,HBsAg的一檢(-)二檢(+)占比最高,抗-TP的一檢(+)二檢(-)占比最高,抗-HCV和抗-HIV項(xiàng)目一檢(+)二檢(+)占比最高,提示:(1)抗-TP和HBsAg項(xiàng)目的一檢二檢試劑有差異,這種單試劑反應(yīng)性較高的情況也提示采用1種ELISA試劑進(jìn)行酶免4項(xiàng)檢測(cè),可能存在漏檢風(fēng)險(xiǎn)[11];(2)本站對(duì)所有無(wú)償獻(xiàn)血人群采取的HBsAg和抗-TP聯(lián)合金標(biāo)試紙條初篩措施有效;(3)抗-HCV和抗-HIV項(xiàng)目根據(jù)采血區(qū)縣差異有針對(duì)性地加做快速初篩檢測(cè),從低危獻(xiàn)血者中采集血液是下一步本實(shí)驗(yàn)室的研究方向。

表4結(jié)果顯示,2017-2021年無(wú)償獻(xiàn)血人群核酸檢測(cè)總拆分陽(yáng)性率為53.40%(157/294),低于同為羅氏全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng)的溫州地區(qū)(64.09%,389/607)[12]和惠州地區(qū)(56.94%,324/569)[13],高于京津冀血站實(shí)驗(yàn)室核酸拆分陽(yáng)性率平均值(48.94%)[14];混檢有反應(yīng)性pool的Ct值越低,拆分陽(yáng)性率越高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。拆分陽(yáng)性率作為質(zhì)量控制指標(biāo)可監(jiān)控和評(píng)價(jià)核酸檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性[15],本實(shí)驗(yàn)室可從以下幾個(gè)方面改進(jìn)和提升:(1)質(zhì)控品混勻后先離心再開(kāi)蓋,減少氣溶膠污染,減少高Ct值混樣有反應(yīng)性pool數(shù);(2)標(biāo)本放置時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕緩,防止濺液造成交叉污染;(3)做好脫帽機(jī)、標(biāo)本架的清潔,減少累積污染;(4)相對(duì)固定核酸檢測(cè)人員,提升人員責(zé)任心。

分析表5～6中3 042例血液檢測(cè)結(jié)果不合格獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)特征,應(yīng)采取以下措施:(1)在不同性別無(wú)償獻(xiàn)血人群中,應(yīng)加強(qiáng)男性獻(xiàn)血者飲食及作息的征詢(xún),以降低ALT不合格率;應(yīng)加強(qiáng)女性獻(xiàn)血者丙型肝炎患病史及高危行為征詢(xún),從低危人群中采集血液;(2)在不同年齡段的無(wú)償獻(xiàn)血人群中,應(yīng)加強(qiáng)35歲以下人群的健康教育,宣傳規(guī)律飲食、充足睡眠、適當(dāng)鍛煉及其他良好的生活習(xí)慣對(duì)自身健康及血液安全的重要影響;宣傳鼓勵(lì)>45～60歲人群補(bǔ)充接種乙型肝炎疫苗;(3)在不同職業(yè)無(wú)償獻(xiàn)血人群中,宣傳教育農(nóng)民群體定期體檢,加強(qiáng)該人群HBsAg項(xiàng)目的初篩檢測(cè),在團(tuán)體獻(xiàn)血?jiǎng)訂T活動(dòng)中,應(yīng)做好高風(fēng)險(xiǎn)獻(xiàn)血者保密性棄血的宣傳提示;(4)ELISA 4項(xiàng)的首次獻(xiàn)血者不合格率高于重復(fù)獻(xiàn)血者,充分證明ELISA對(duì)血液安全的重要性;(5)核酸檢測(cè)首次和重復(fù)獻(xiàn)血者不合格率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義可能與核酸檢測(cè)結(jié)果不合格人群中OBI較多有關(guān),不合格獻(xiàn)血者進(jìn)一步的追蹤驗(yàn)證及歸隊(duì)研究是筆者今后的研究的方向。

綜上所述,對(duì)>45～60歲低學(xué)歷初次獻(xiàn)血人群加強(qiáng)既往患病史征詢(xún),嚴(yán)格落實(shí)初篩檢測(cè)的質(zhì)量控制;提升服務(wù)質(zhì)量,促進(jìn)重復(fù)獻(xiàn)血者定期獻(xiàn)血,采集低危人群血液,從源頭上降低經(jīng)血疾病傳播風(fēng)險(xiǎn);評(píng)價(jià)ELISA檢測(cè)試劑的靈敏度和準(zhǔn)確性,降低單試劑反應(yīng)性標(biāo)本的不合格率,節(jié)約檢測(cè)成本,保護(hù)血液資源,保障臨床血液供應(yīng)充足安全。