張瑞紅 張海濤

山東省成武縣人民醫(yī)院 1 婦產(chǎn)科 2 病理科 274200

我國(guó)子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率約為14%,5年生存率約為20%,且呈年輕化趨勢(shì),由于早期臨床癥狀不明顯導(dǎo)致大部分患者確診時(shí)已發(fā)展至晚期[1-2]。目前以手術(shù)治療為主,由于局部復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移導(dǎo)致疾病轉(zhuǎn)歸不一,因而尋找預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌疾病轉(zhuǎn)歸的潛在標(biāo)志物有助于改善患者預(yù)后?？扇苄訲細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白3(sTim-3)屬于免疫抑制分子,可負(fù)向調(diào)節(jié)Th1細(xì)胞增殖,抑制腫瘤相關(guān)免疫反應(yīng),其高表達(dá)與多種惡性腫瘤不良預(yù)后有關(guān)[3]。淋巴細(xì)胞激活基因3(LAG-3)屬于免疫球蛋白超家族成員,可抑制T細(xì)胞增殖、活化,并可能參與宮頸鱗癌等多種腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程[4]。目前sTim-3、LAG-3與子宮內(nèi)膜癌相關(guān)研究報(bào)道較少。本研究主要觀察子宮內(nèi)膜癌患者血清sTim-3、LAG-3水平變化,分析其與臨床病理特征及疾病轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性,旨在為子宮內(nèi)膜癌免疫治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年2月—2021年3月于本院接受手術(shù)治療的52例子宮內(nèi)膜癌患者為對(duì)象,依據(jù)術(shù)后1年疾病轉(zhuǎn)歸情況分為良好組34例、不良組18例。良好組：年齡44～65(54.31±3.26)歲,體質(zhì)量指數(shù)18～26(22.35±1.16)kg/m2,是否絕經(jīng)：是18例、否16例。不良組：年齡43～63(53.27±3.18)歲,體質(zhì)量指數(shù)18～28(23.01±1.38)kg/m2,是否絕經(jīng)：是10例、否8例。兩組一般資料比較無(wú)明顯差異(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合子宮內(nèi)膜癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[5],且經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診;原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌;術(shù)前經(jīng)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查顯示陽(yáng)性;經(jīng)陰道鏡檢查顯示無(wú)宮頸惡性病變者;接受腹腔鏡手術(shù)治療者;術(shù)前未接受放化療或激素治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重內(nèi)外科合并癥者;合并其他部位惡性腫瘤者;精神障礙者;合并免疫缺陷疾病者。

1.3 方法

1.3.1 治療方法。腹腔鏡手術(shù)治療：陰道內(nèi)留置舉宮器建立人工氣腹,于患者側(cè)下腹置入第2、3套管針,同時(shí)探查腹腔,留取腹腔沖洗液(100ml)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查,腹腔鏡下切除子宮雙附件、盆腔淋巴結(jié),放置引流管,使用生理鹽水沖洗盆腹腔,腹腔鏡退出,術(shù)后予以抗生素治療。術(shù)后1年觀察疾病轉(zhuǎn)歸情況,其中患者無(wú)復(fù)發(fā)為預(yù)后良好;出現(xiàn)復(fù)發(fā)或死亡為預(yù)后不良。

1.3.2 采集血液樣本。分別于術(shù)前、術(shù)后1d、術(shù)后1個(gè)月采集兩組空腹靜脈血5ml,4℃條件下經(jīng)3 000r/min離心(10min)留取血清,儲(chǔ)存于-80℃冰箱。

1.3.3 檢測(cè)血清sTim-3、LAG-3水平。采用ELISA法檢測(cè)血清sTim-3水平,上海臻科生物科技有限公司提供檢測(cè)試劑盒。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清LAG-3水平,杭州齊譽(yù)生物科技有限公司提供檢測(cè)試劑盒。

1.4 觀察指標(biāo) (1)分析兩組術(shù)前、術(shù)后1 d、術(shù)后1個(gè)月血清sTim-3、LAG-3水平。(2)分析術(shù)前不同臨床病理特征患者血清sTim-3、LAG-3水平,其中臨床病理特征包括腫瘤大小、臨床FIGO分期、組織學(xué)分級(jí)、分化程度、肌層浸潤(rùn)深度。(3)分析血清各指標(biāo)(術(shù)前)與臨床病理特征相關(guān)性及其(術(shù)后1個(gè)月)對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸的預(yù)測(cè)價(jià)值。(4)分析各指標(biāo)對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸不良發(fā)生危險(xiǎn)度的影響。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清sTim-3、LAG-3水平比較 與術(shù)前比較,術(shù)后1d、術(shù)后1個(gè)月兩組血清sTim-3、LAG-3水平降低(P<0.05);與良好組比較,術(shù)后1d、術(shù)后1個(gè)月不良組血清sTim-3、LAG-3水平升高(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 兩組血清sTim-3、LAG-3水平比較

2.2 不同臨床病理特征患者血清sTim-3、LAG-3水平比較 隨著臨床FIGO分期升高、組織學(xué)分級(jí)升高、分化程度降低及發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,血清sTim-3、LAG-3水平升高(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 不同臨床病理特征患者血清sTim-3、LAG-3水平比較

2.3 血清各指標(biāo)水平與臨床病理特征相關(guān)性 血清sTim-3、LAG-3水平與臨床FIGO分期、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P<0.05),而與分化程度呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 血清各指標(biāo)水平與臨床病理特征相關(guān)性

2.4 血清各指標(biāo)對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸的預(yù)測(cè)價(jià)值 以不良組18例為陽(yáng)性樣本,以良好組34例為陰性樣本,繪制ROC曲線,結(jié)果顯示,術(shù)后1個(gè)月血清sTim-3、LAG-3水平聯(lián)合預(yù)測(cè)疾病轉(zhuǎn)歸不良的AUC大于單項(xiàng)預(yù)測(cè)(P<0.05),見(jiàn)表4。

表4 血清各指標(biāo)對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸的預(yù)測(cè)價(jià)值

2.5 血清各指標(biāo)不同表達(dá)者疾病轉(zhuǎn)歸不良的危險(xiǎn)度分析 以2.4結(jié)果中各指標(biāo)截?cái)嘀禐榉纸?患者分為高表達(dá)者、低表達(dá)者。sTim-3、LAG-3高表達(dá)者疾病轉(zhuǎn)歸不良的危險(xiǎn)度分別是低表達(dá)者的1.789倍、1.737倍,見(jiàn)表5。

表5 血清各指標(biāo)不同表達(dá)者疾病轉(zhuǎn)歸不良的危險(xiǎn)度分析

3 討論

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制與抑癌基因失活、致癌基因活化、先天性/適應(yīng)性免疫細(xì)胞改變有關(guān),免疫相關(guān)因子可參與T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞活化及腫瘤免疫耐受過(guò)程,同時(shí)機(jī)體內(nèi)持續(xù)炎性狀態(tài)可增強(qiáng)腫瘤免疫原性,促使子宮內(nèi)膜細(xì)胞損傷,進(jìn)一步促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展[6]。

Tim-3可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),誘導(dǎo)免疫耐受,介導(dǎo)效應(yīng)T細(xì)胞凋亡,并可促進(jìn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞M2極化,阻斷自然殺傷細(xì)胞功能,還可通過(guò)白細(xì)胞介素-6(IL-6)自分泌方式,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及侵襲[7]。Tim-3配體包括半乳凝素-9(Gal-9)、癌胚抗原細(xì)胞黏附分子1(CEACAM1)等,Tim-3與配體結(jié)合可激活鈣—鈣蛋白酶—含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)通路,介導(dǎo)效應(yīng)T細(xì)胞凋亡,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸[8]。本研究結(jié)果顯示,術(shù)后不良組血清sTim-3水平高于良好組,表明sTim-3水平變化可反映疾病轉(zhuǎn)歸情況。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),隨著臨床FIGO分期升高、組織學(xué)分級(jí)升高、分化程度降低及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生,血清sTim-3水平明顯升高,表明sTim-3可能參與子宮內(nèi)膜癌發(fā)展進(jìn)程,并可能在一定程度上反映子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移情況。其原因可能為：sTim-3可參與子宮內(nèi)膜癌免疫應(yīng)答過(guò)程,可能通過(guò)內(nèi)源性或外源性途徑,介導(dǎo)腫瘤相關(guān)炎性因子生成,改變腫瘤炎性微環(huán)境,增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞侵襲性,導(dǎo)致其逃避免疫監(jiān)視。早期臨床試驗(yàn)證實(shí)采用免疫抑制因子抑制劑可抑制腫瘤轉(zhuǎn)移,治療后監(jiān)測(cè)免疫抑制因子水平對(duì)評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能及治療效果具有重要意義[9]。Chen等[10]的研究報(bào)道顯示,血清sTim-3水平升高可能作為預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的潛在指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示,血清sTim-3水平預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌疾病轉(zhuǎn)歸不良的AUC為0.735,提示sTim-3對(duì)子宮內(nèi)膜癌疾病轉(zhuǎn)歸不良具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值,但仍需結(jié)合其他指標(biāo)共同預(yù)測(cè),以此提高預(yù)測(cè)效能。

LAG-3可抑制T細(xì)胞增殖及其相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá),負(fù)向調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能,參與腫瘤免疫逃逸過(guò)程,并可激活一系列信號(hào)通路,抑制免疫細(xì)胞活化及分泌抗體[11]。LAG-3與腫瘤臨床病理特征相關(guān),可在一定程度上影響腫瘤發(fā)生發(fā)展[12]。本研究結(jié)果顯示,術(shù)后不良組血清LAG-3水平高于良好組,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較低分化程度者LAG-3水平分別高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較高分化程度者,且臨床FIGO分期、組織學(xué)分級(jí)越高,LAG-3水平越高,這與王聰?shù)萚13]研究結(jié)果相似。提示LAG-3高表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、浸潤(rùn)等一系列過(guò)程密切相關(guān)。但吳玲等[14]發(fā)現(xiàn),LAG-3水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果顯示血清LAG-3水平與臨床FIGO分期、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),而與分化程度呈負(fù)相關(guān),與上述研究結(jié)果不一致[14]。原因可能為：不同類型腫瘤患者體內(nèi)免疫微環(huán)境不同,選取檢測(cè)診斷方法不同,此外,LAG-3對(duì)腫瘤的作用機(jī)制可能存在雙向作用。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)血清sTim-3、LAG-3聯(lián)合預(yù)測(cè)疾病轉(zhuǎn)歸不良的AUC大于單項(xiàng)預(yù)測(cè),提示聯(lián)合檢測(cè)血清sTim-3、LAG-3水平可提高子宮內(nèi)膜癌疾病轉(zhuǎn)歸的預(yù)測(cè)效能。

綜上所述,子宮內(nèi)膜癌患者血清sTim-3、LAG-3水平升高,且與臨床病理特征密切相關(guān),其聯(lián)合預(yù)測(cè)對(duì)子宮內(nèi)膜癌疾病轉(zhuǎn)歸不良具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值,可為臨床對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者轉(zhuǎn)歸結(jié)局預(yù)測(cè)提供可靠依據(jù)。