◎ 史文青，崔 誠

（1.陜西省農(nóng)村科技開發(fā)中心，陜西 西安 710000；2.陜西普恩檢測技術(shù)有限公司，陜西 西安 710000）

大米是我國的主要農(nóng)產(chǎn)品，也是我國非常重要的主食之一。水稻生長的環(huán)境比較溫暖和潮濕，容易受到病蟲和雜草的危害。敵草索作為一種人工合成的苯甲酸類除草劑，常常被種植者用于芽前處理，過度使用可能會危害人們的身體健康，同時還會造成土壤和環(huán)境的污染[1-3]。因此，建立一種快捷、準(zhǔn)確、穩(wěn)定性較好的測定大米中敵草索殘留量的方法具有重要的意義。

目前，國內(nèi)研究主要采用氣相色譜法和液相色譜法測定大米中的農(nóng)藥殘留量，且主要是對有機氯和有機磷類農(nóng)藥殘留進行檢測[4-6]。黃錦殷[7]采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中敵草素殘留，回收率在86.0%～101.6%。本文采用QuEChERS 前處理方法對大米中敵草索殘留進行提取和凈化，利用特征離子和保留時間定性，外標(biāo)法定量分析，方法簡單、高效，可為大米中殘留的敵草索檢測提供方法依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

無水硫酸鎂，分析純；醋酸鈉，分析純；乙腈、正己烷，色譜純；C18粉末，40 μm；PSA 粉末，40 μm；敵草索標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg·mL-1），上海安譜實驗科技股份有限公司。

580-CLARUS SQ8S 型氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國鉑金埃爾默公司；MTN-2800D 氮吹儀；MS 3-digitel 渦旋儀；TDL-40B 低速離心機。

1.2 樣品測定方法

1.2.1 前處理方法

（1）提取。稱取粉碎之后的大米樣品5 g 于離心管中，在離心管中加入10 mL 水混合均勻，靜置30 min，加10 mL 乙腈（含0.1%冰醋酸）、6 g 無水硫酸鎂、1.5 g 醋酸鈉及1 顆陶瓷均質(zhì)子，渦旋振搖5 min。以5 000 r·min-1離心5 min，分離上清液待凈化。

（2）QuEChERS 凈化。將上述上清液轉(zhuǎn)移至含12 g 硫酸鎂、0.4 g PSA 及0.4 g C18的離心管中，渦旋2 min，以4 200 r·min-1離心5 min，吸取全部上清液于10 mL 試管中，40 ℃水浴氮吹至近干。用1 mL 的正己烷定容殘渣，上氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進行測定。

1.2.2 殘留量計算

大米中敵草索殘留量的計算公式為

式中：X為大米樣品中殘留的敵草索濃度，mg·kg-1；c為樣品溶液中敵草索的濃度，μg·mL-1；v為最終定容體積，v=1 mL；m為稱取的大米樣品質(zhì)量，g。

1.3 儀器條件

1.3.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件

（1）色譜條件。色譜柱：DB-1MS 石英毛細管色譜柱（30 m×250 μm，0.25 μm）；升溫程序：初溫60 ℃保持3 min，以15 ℃·min-1升溫至180 ℃，再以10 ℃·min-1升到240 ℃，最后以20 ℃·min-1升到270 ℃，保持5 min。載氣：高純氦氣（純度大于99.999%），流速1.0 mL·min-1；進樣口溫度：280 ℃；進樣方式：不分流進樣；進樣體積：1.0 μL。

（2）質(zhì)譜條件。電離方式：電化學(xué)電離（CI 源）；反應(yīng)氣：甲烷，流速2.0 mL·min-1；離子源溫度：250 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；掃描模式：選擇性掃描SIM；特征離子：332m/z（定量）、330m/z（定性）、334m/z（定性）、300m/z（定性）。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立

儲備液的配制： 用移液槍準(zhǔn)確吸取1 mL 1 000 μg·mL-1的敵草索溶液于10 mL 容量瓶中，用正己烷進行定容混勻，儲備液的最終濃度為100 μg·mL-1，至于-18 ℃的冰箱保存3 個月。

標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制：用移液槍準(zhǔn)確吸取不同體積的儲備液，稀釋成濃度為0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)系列，供氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，以敵草索的峰面積Y對濃度X（μg·mL-1）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

在上述儀器條件下，建立的外標(biāo)法定量的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖1 和圖2。線性回歸方程為Y=1 691X+0.526 8，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 3，試樣溶液在0.02 ～1.00 μg·mL-1線性關(guān)系良好。敵草索的保留時間在14.34 min，峰形和分離度較好。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖

圖2 敵草索標(biāo)液（1.0 μg·mL-1）的色譜圖

2.2 方法的檢出限

在10 份空白大米樣品中均加入0.008 mg·kg-1的敵草索，按照QuEChERS 前處理方法進行提取、凈化、濃縮、定容，上機測定，計算標(biāo)準(zhǔn)偏差。根據(jù)《合格評定化學(xué)分析方法確認和驗證指南》（GB 27417—2017）的要求，以3 倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差確定檢出限（LOD），得到方法的檢出限為0.001 mg·kg-1。

2.3 方法的準(zhǔn)確度和精密度

稱取粉碎后的大米樣品18 份，每份5 g，在空白大米樣品中分別添加低（0.008 mg·kg-1）、中（0.020 mg·kg-1）、高（0.040 mg·kg-1）3 個水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進行加標(biāo)回收實驗，結(jié)果如表1 所示。3 個水平下敵草索的加標(biāo)回收率分別為92.2%～104.6%、96.7%～105.8%、83.1%～108.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為4.6%、3.4%、8.9%，可滿足實驗室日常檢測的要求。

表1 加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表（n=6）

2.4 定性驗證

稱取3 份粉碎后的大米樣品各5 g，分別加入濃度為0.008 mg·kg-1、0.020 mg·kg-1和0.040 mg·kg-1敵草素，按照QuEChERS 前處理方法進行提取、凈化、濃縮，定容上機進行定性確認。如表2 所示，樣品溶液中敵草索的保留時間和標(biāo)準(zhǔn)溶液中基本一致，且定性特征離子330、300 和334 的相對豐度比偏差滿足定性的要求，表明該方法對陽性樣品的定性較準(zhǔn)確。

表2 加標(biāo)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液中特征離子的相對豐度比表

3 結(jié)論

本文建立了一種QuEChERS- 氣相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法分析大米中敵草索殘留量的方法，采用QuEChERS前處理方法對粉碎后的大米樣品進行提取、凈化、濃縮，定容測定，該方法前處理方法簡單，檢測限、準(zhǔn)確性和精密度較好，適用于大米中敵草索殘留量的分析。