王新寧,蘇艷艷,吳忠蘭,曹 慜,李龍山,裴建新,馬學(xué)平

呼吸道感染疾病是由致病微生物侵入呼吸道并進(jìn)行繁殖導(dǎo)致的,90%以上由細(xì)菌以外的病原體引起,其中病毒感染約占80%[1-2]。病毒性呼吸道傳染病在短時間內(nèi)會在人群中引起大規(guī)模流行,危害人類健康[3],所以監(jiān)測呼吸道病毒對于疾病防控具有重大公共衛(wèi)生意義。流感樣病例(ILI)是急性呼吸道感染(ARTI)癥狀監(jiān)測的對象,但符合流感樣病例癥狀的急性呼吸道感染不一定僅由流感病毒引起,引起急性呼吸道感染的病毒還包括呼吸道合胞病毒、鼻病毒、人偏肺病毒、呼吸道腺病毒、副流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、博卡病毒等30多種不同的病毒[4]。本研究利用寧夏流感網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測平臺,選擇呼吸道副流感病毒Ⅰ/Ⅲ型(PIVⅠ/PIVⅢ)、呼吸道腺病毒(HAdv)、人偏肺病毒(HMPV)、人鼻病毒(HRV)、呼吸道合胞病毒(RSV)6種呼吸道病毒進(jìn)行檢測,分析銀川市常見呼吸道病毒病原譜,及時采取措施對癥治療,降低疾病負(fù)擔(dān),對于呼吸道感染發(fā)熱患者的診治具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料:收集2021年1月至2021年12月在銀川市2家流感監(jiān)測哨點醫(yī)院(銀川市第一人民醫(yī)院、自治區(qū)人民醫(yī)院西夏醫(yī)院)收治的符合流感樣病例診斷標(biāo)準(zhǔn)的監(jiān)測病例,共收集了1 100份標(biāo)本。流感樣診斷標(biāo)準(zhǔn)為發(fā)熱(體溫≥38 ℃),伴咳嗽或咽痛之一者。出現(xiàn)發(fā)熱的時間應(yīng)在本次急性發(fā)熱病程內(nèi),體溫認(rèn)定包括患者自測體溫和醫(yī)療機構(gòu)檢測體溫。

1.2 標(biāo)本采集與處理:采樣對象為發(fā)病3天內(nèi)的流感樣病例。標(biāo)本包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子,采集后放入含3～4 mL采樣液的采樣管中。采集后應(yīng)當(dāng)在2個工作日內(nèi)運送至流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室,保存溫度為2～8 ℃;如未能在48 h內(nèi)送至實驗室的,應(yīng)當(dāng)置-70 ℃或以下保存,并保證采集的標(biāo)本1周內(nèi)送至網(wǎng)絡(luò)實驗室。標(biāo)本應(yīng)當(dāng)避免反復(fù)凍融,接收標(biāo)本并登記后,將標(biāo)本置于室溫溶解,充分震蕩后備用。

1.3 標(biāo)本病毒核酸提取:使用碩世全自動核酸提取儀、碩世生物科技股份有限公司核酸快速提取試劑盒(磁珠法)(貨號:SDKF60101),按照儀器操作手冊和試劑盒說明書要求,提取標(biāo)本中病毒的總核酸。

1.4 呼吸道病毒核酸檢測:使用上海伯杰醫(yī)療有限公司生產(chǎn)的核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)檢測呼吸道副流感病毒Ⅰ/Ⅲ型(PIVⅠ/PIVⅢ)、呼吸道腺病毒(HAdv)、人偏肺病毒(HMPV)、人鼻病毒(HRV)、呼吸道合胞病毒(RSV)6種常見呼吸道病毒,按照說明書進(jìn)行操作。所有標(biāo)本的病原體檢測方法均未發(fā)生改變,以保證檢測結(jié)果的一致性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法:采用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件,以率描述計數(shù)資料,以χ2檢驗比較率的差異,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病毒檢出情況:1 100例呼吸道標(biāo)本中共檢出248例陽性標(biāo)本(22.55%),其中混合感染檢出14例(1.27%),均為2種病毒混合感染,共有8種混合類型。234例單一病毒感染的陽性標(biāo)本中,鼻病毒最為常見,陽性率為7.64%,其次為合胞病毒,陽性率為4.64%,見表1。6種呼吸道病毒病例數(shù)及病毒總陽性率的月份分布顯示。4月、10月病毒總陽性率較高,分別為42.86%、34.92%,11月檢出率最低為2.11%。3月份病毒總病例數(shù)最多,有61例。6種呼吸道病毒不同月份陽性率分布顯示,見圖2(目錄后)。RSV 1月份陽性率最高,為19.12%;HAdv、HMPV 4月份陽性率最高,分別為5.71%、17.14%;HRV 9月份陽性率最高,為27.50%;PIVⅠ、PIVⅢ 10月份陽性率最高,分別為11.90%、6.35%。其中HRV每月均可檢出。

表1 呼吸道病毒檢出情況

2.2 呼吸道病毒檢出的分布:555例男性患者中檢出病毒127例 ,545例女性患者中檢出病毒121例,不同性別的呼吸道病毒感染總陽性率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。各年齡組間陽性率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),不同季節(jié)陽性率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中春季陽性率最高為29.50%,見表2。6種呼吸道病毒陽性率的季節(jié)分布顯示,見表3。PIV Ⅰ在夏季陽性率最高,為6.00%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=11.77,P<0.05);HAdv在春季陽性率最高,為2.88%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=9.78,P<0.05);HMPV在春季陽性率最高,為10.07%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=40.54,P<0.05);HRV在春季陽性率最高,為12.95%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=29.45,P<0.05);不同季節(jié)PIVⅢ的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.95,P>0.05);RSV在冬季陽性率最高,為11.59%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=56.09,P<0.05)。

表2 呼吸道病毒檢出的分布

表3 不同呼吸道病毒陽性率的季節(jié)分布[n(%)]

3 討論

世界衛(wèi)生組織指出,新型冠狀病毒肺炎的全球大流行給人類敲響了警鐘,我們應(yīng)該合理利用全球流感網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測平臺加強對常見呼吸道傳染病毒的監(jiān)測,防患于未然。寧夏地區(qū)近幾年加大了對呼吸道多病原的研究,但是目前尚未有系統(tǒng)完整的呼吸道病原監(jiān)測體系,各地相關(guān)論文多集中報道兒童呼吸道病原,對于全年齡段人群的呼吸道感染狀況研究鮮有報道。本研究依托于銀川市兩家流感監(jiān)測醫(yī)院,對全年齡段人群呼吸道標(biāo)本進(jìn)行6種常見呼吸道病毒檢測,有助于了解銀川市呼吸道病毒的感染現(xiàn)狀。本研究結(jié)果表明,1100例呼吸道標(biāo)本中共檢出248例陽性標(biāo)本(22.55%),其中鼻病毒最為常見,陽性率為7.64%,其次為合胞病毒,陽性率為4.64%。本研究呼吸道病毒總陽性率高于前期寧夏地區(qū)[5]報道的陽性率(12.78%)。近年來,各地區(qū)對全年齡段人群的呼吸道病毒感染也有研究,李海明[6]等人對北京地區(qū)上呼吸道感染病例采用PCR等方法檢測8種主要呼吸道病毒,結(jié)果顯示,呼吸道病毒檢出總陽性率為49.35%,其中檢出率最高的病原體為呼吸道合胞病毒,陽性率為15.30%。對張掖市[7]呼吸道病毒感染病人開展病毒監(jiān)測分析,呼吸道病毒總陽性率為39.2%,鼻病毒檢測率最高為12.7%。分析揚州地區(qū)[8]住院肺炎患者呼吸道病原監(jiān)測結(jié)果,1 479例咽拭子樣本中,陽性195例(13.18%)。攸小瑾[9]等人對廣州市6種常見非流感呼吸道病毒感染監(jiān)測分析,總陽性率為15.48%,其中腺病毒陽性率最高(7.85%),其次為人偏肺病毒(3.87%),與本研究病原譜結(jié)果相差甚大。各地區(qū)病原譜的差異性可能與采樣納入的人群不同、地區(qū)氣候環(huán)境不同、病毒試劑的靈敏度有關(guān)。

本研究中,5歲以下患兒呼吸道病毒的陽性率高,研究人群為全年齡段人群的有關(guān)報道[7-11]也表明,呼吸道病毒好發(fā)于低年齡段人群,0～5歲為易感人群。分析原因為0～5歲兒童身體機能尚未發(fā)育成熟,抵抗病毒的能力相對較弱,尤其是嬰幼兒腸道菌群尚未建立,皮膚黏膜難以發(fā)揮正常屏障保護功能,病毒入侵風(fēng)險較大。本研究中,男性呼吸道病毒的陽性率為22.88%,略高于女性呼吸道病毒陽性率(22.20%),不同性別的呼吸道病毒感染的陽性率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。在研究人群為全年齡段人群的報道中[7,10-11],結(jié)論均與本研究一致。黃瑤[8]研究結(jié)果則表明,不同性別的呼吸道病毒感染總陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。寧夏地區(qū)呼吸道病毒好發(fā)于冬春季,春季陽性率最高(29.50%)。中國各地因氣候特征的不同,不同緯度間呼吸道病毒具有不同的季節(jié)流行特征,北方省份以冬春季好發(fā)為主,南部的省份以4～6月好發(fā);中部緯度地區(qū)在每年1～2月和6～8月發(fā)病率較高,呈雙峰流行趨勢[12]。此外,不同類型的呼吸道病毒感染具有不同的季節(jié)性特征,本研究中,PIVⅢ的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義,PIVⅠ夏秋季好發(fā),HAdv春夏季好發(fā),HRV春秋季好發(fā),RSV、HMPV冬春季好發(fā)。孝感市[13]研究結(jié)果表明,RSV好發(fā)于冬春季,HAdv好發(fā)于春夏季,與本研究結(jié)果一致,PIVⅢ好發(fā)于春夏季。李云珍[14]等人研究表明,廣東省RSV秋冬季高發(fā),PIVⅠ、PIVⅢ春季高發(fā),HAdv沒有明顯的季節(jié)特征。江西省[15]人偏肺病毒好發(fā)于冬春季,河南省[16]鼻病毒秋季好發(fā),與本研究結(jié)果一致。

本研究存尚在一些不足之處,標(biāo)本僅來源于銀川市一年的流感監(jiān)測標(biāo)本,樣本數(shù)量過少,監(jiān)測時間短,對研究結(jié)果的分析可能會造成一些偏差,這些將在以后的研究中加以完善。

綜上所述,因所處的地理環(huán)境、氣候等因素不同,呼吸道病毒的流行特點在不同地區(qū)存在較大差異。銀川市呼吸道病毒感染的主要病原體為HRV、RSV和HMPV。0～5歲患者呼吸道感染率發(fā)生最高,故疾病防控工作中需重點防控5歲以下小兒呼吸道感染,合理利用流感網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測平臺,做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療,減少呼吸道病毒的流行。