楊 陽,陳伊靈,好善鑫,趙安冉,劉雨露,朱小燕,2*,李相前,2*
1.淮陰工學(xué)院生命科學(xué)與食品工程學(xué)院,江蘇 淮安 223003;2.江蘇省益生制劑重點建設(shè)實驗室,江蘇 淮安 223003
棕櫚粕作為棕櫚油生產(chǎn)過程中的一種副產(chǎn)品,具有豐富的營養(yǎng)成分,其價格低廉且蛋白價效高[1],可作為飼料添加劑使用[2]。但棕櫚粕高含量的纖維素會影響動物飼料營養(yǎng)成分的消化率,對動物生長產(chǎn)生不良影響[3],所以棕櫚粕多用于反芻動物[4]。微生物發(fā)酵處理可以降解棕櫚粕中粗纖維成分,降解粗蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)為氨基酸與小分子肽,產(chǎn)生大量益生菌及有機酸,使棕櫚粕具有更好的營養(yǎng)性能、消化率及適口性,部分可替代魚粉、玉米和大豆等傳統(tǒng)蛋白原料,減少飼料成本[5]。全文綜述了各種微生物發(fā)酵棕櫚粕降解抗?fàn)I養(yǎng)因子及其在動物飼料中的應(yīng)用,旨在為微生物發(fā)酵棕櫚粕的研究發(fā)展提供參考。
棕櫚粕含有蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪和氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)[6]。因其產(chǎn)地及加工方式有所區(qū)別,蛋白含量相比于豆粕、花生粕等蛋白質(zhì)含量偏低,約為14%~20%[7-8]。棕櫚粕含有大量動物生長所需的氨基酸,如賴氨酸、蘇氨酸、胱氨酸和精氨酸等,這些氨基酸可以促進動物肌肉的生長,提高動物的免疫功能,增強畜禽動物生產(chǎn)性能[9]。棕櫚粕還含有礦物質(zhì),其含量約為1.00%~2.00%,主要包括鈣、鎂、磷和鉀等[10]。
粗纖維可以用來預(yù)測棕櫚粕飼料的飼料價值和營養(yǎng)物質(zhì)消化率的指標(biāo),纖維和營養(yǎng)物質(zhì)與動物消化率之間存在相反關(guān)系。棕櫚粕的粗纖維含量約為6.00%~24.90%,其中,中性洗滌纖維約占66.70%,酸性洗滌纖維約占43.70%,木質(zhì)素約占21.10%。棕櫚粕纖維主要成分為非淀粉多糖(Non-starch polysaccharides,NSPs)[11]。其中纖維素、甘露聚糖、葡萄糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖含量分別約為12%、78%、3%、3%,甘露聚糖包括葡甘露聚糖、純甘露聚糖、半乳甘露聚糖以及半乳葡甘露聚糖,這些非淀粉多糖會降低畜禽動物對棕櫚粕的消化率及營養(yǎng)利用率,降低動物生產(chǎn)性能[3]。纖維素和甘露聚糖具有較強的水合能力,會增加動物的飲水量,有可能導(dǎo)致動物腹瀉,影響動物消化系統(tǒng)的健康[12]。棕櫚粕中粗纖維含量較高,造成飼料的適口性較差,導(dǎo)致動物攝食量與代謝能力降低,影響動物的生長速度,不適于配制雛雞和仔豬飼糧[13]。因此,棕櫚粕中雖含有蛋白質(zhì)和脂肪等營養(yǎng)物質(zhì),但其高含量的纖維會對動物的生產(chǎn)性能產(chǎn)生不良影響,不能直接用作動物飼料原料。
微生物在植物飼料的發(fā)酵方面已有大量的應(yīng)用研究[14]。這些微生物能夠利用粕類等植物原料中的纖維素、甘露聚糖、木聚糖等降解粗纖維,分泌多種水解酶降解大分子物質(zhì),降低抗?fàn)I養(yǎng)因子的水平,產(chǎn)生易于消化和有活性的小分子物質(zhì)和代謝產(chǎn)物,提升植物蛋白飼料原料的營養(yǎng)品質(zhì),增加其應(yīng)用價值。在固態(tài)發(fā)酵中,常用菌屬為芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌及曲霉菌。芽孢桿菌產(chǎn)酶能力極強,在固態(tài)發(fā)酵過程中,能夠產(chǎn)生木聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、漆酶、蛋白酶和脂肪酶等[15-17]。芽孢桿菌具有較強的抗逆性,可以高溫制粒[18],此外,部分芽孢桿菌還會產(chǎn)生抗菌肽類物質(zhì),能在一定程度上抑制有害菌繁殖[19]。酵母菌具備無機氮轉(zhuǎn)化能力,可以合成蛋白,同時酵母菌富含營養(yǎng)氨基酸、維生素多糖等豐富營養(yǎng)物質(zhì)[20],能夠提升固態(tài)發(fā)酵飼料的營養(yǎng)特性[21]。乳酸菌是一類常見的發(fā)酵微生物,發(fā)酵后能產(chǎn)乳酸類物質(zhì)[22],具有調(diào)節(jié)腸道菌群的功能,能夠抑制有害菌群的產(chǎn)物代謝,提高飼料利用率及動物抗病能力[23]。在處理高粗纖維含量的飼料原料時常使用曲霉菌[24]。其中,黑曲霉、米曲霉是常用菌株,在固態(tài)發(fā)酵菜籽粕過程中會分泌糖化酶、植酸酶等10 余種酶,顯著降低抗?fàn)I養(yǎng)因子含量[25]。
黑曲霉和米根霉協(xié)同處理棕櫚粕10 d 后,粗蛋白由18%提高到27%,NDF 和ADF 的含量分別從74%和43%降低到56%和37%[26]。棕櫚粕使用沙福芽孢桿菌、高地芽孢桿菌、維德曼芽孢桿菌,在36 ℃混菌發(fā)酵4 d 后,粗纖維與對照組相比下降了26.33%,粗蛋白、粗灰分、總酸及酸溶蛋白分別提高了25.45%、34.33%、498.44%、253.86%。此外,天冬氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸及酪氨酸也增加了9.23%~16.67%[27]。啤酒酵母和乳酸菌在30 ℃混菌發(fā)酵棕櫚粕5 d 后,同時粗蛋白由未發(fā)酵對照組7.20%提高至18.63%,其粗脂肪、鈣、磷也得到了提升,粗纖維、粗灰分由對照組26.20%、5.20%降低至6.50%、3.86%,總活菌數(shù)可達7.2×1010CFU/g[28]。植物乳桿菌、釀酒酵母與酶在30 ℃協(xié)同發(fā)酵棕櫚仁粕5 d 后,其粗蛋白、粗脂肪較于對照組提高了15.10%、18.43%,粗纖維、NDF 分別降低了25.10%、21.96%,同時,甘氨酸、天冬氨酸、蘇氨酸等氨基酸有一定幅度的升高[6]。利用黑曲霉與釀酒酵母在35.06 ℃混菌發(fā)酵棕櫚粕7.34 d,發(fā)酵產(chǎn)物半纖維素、NDF、ADF 分別降低了24.66%、13.00%、1.36%,粗蛋白、水分及粗灰分分別提高了58.20%、9.06%、59.26%[29]。黑曲霉、白地霉和產(chǎn)朊假絲酵母在30 ℃混菌發(fā)酵含有少量羽毛粉的棕櫚粕底物48 h,粗蛋白由13.41%提高至46.74%,粗纖維由20.35%降低至8.12%,粗脂肪由5.50%降低至2.78%,其余營養(yǎng)成分與抗?fàn)I養(yǎng)因子有不同程度的提高和降低[30]。經(jīng)黑曲霉在30 ℃發(fā)酵48 h 后,棕櫚粕粗蛋白含量由19.1%提高到21.3%,粗纖維、粗脂肪由24.60%、20.10%降低至19.80%、13.40%,粗蛋白消化率較對照組提高了23.64%,能量值可達18 413 J/g,甘露聚糖酶可達205.70 U/g,還原糖由0.80%提高至5.10%[31]。采用米曲霉、啤酒酵母、枯草芽孢桿菌、黑根霉、植物乳桿菌混菌在30 ℃發(fā)酵24 h 后于37 ℃發(fā)酵24 h,再于25 ℃厭氧發(fā)酵6 d,棕櫚粕粗蛋白可達32%,較于對照組提高59%,淀粉酶活性、蛋白酶活性可達103 U/g、123 U/g,乳酸菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌活菌數(shù)為4.70 ×1011CFU/g、1.30×1010CFU/g、1.80×104CFU/g[32]。使用EM 菌粉(含光合細菌、乳酸菌、固氮菌、酵母菌和芽孢桿菌)30 ℃避光發(fā)酵30 d,較對照組粗蛋白、無氮提取物及總能量分別提高了20.79%、40.07%、19.58%,粗脂肪、粗纖維和灰分分別降低15.65%、36.45%、29.54%[33]??偟膩碚f,曲霉菌在發(fā)酵棕櫚粕中應(yīng)用較多,可能與其高效的產(chǎn)酶能力和豐富的酶系有關(guān)。微生物發(fā)酵可以提升棕櫚粕的粗蛋白、氨基酸及微量元素等營養(yǎng)成分,降低粗纖維、NDF 及ADF 等抗?fàn)I養(yǎng)因子,進而提升棕櫚粕的品質(zhì)。
通過微生物固態(tài)發(fā)酵可大幅提高棕櫚粕營養(yǎng)價值,與魚粉、豆粕等蛋白原料相比,其在畜禽養(yǎng)殖及水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)具有更高的經(jīng)濟效益[34]。多粘類芽孢桿菌ATCC 842 發(fā)酵棕櫚粕替代肉雞日糧飼喂后,其纈氨酸、組氨酸、蛋氨酸和精氨酸的消化率分別為70.42%、71.50%、71.92%和81.15%,粗蛋白消化率提高了61.83%;在日糧中飼喂比例達到15%時,肉雞體重增加和飼料轉(zhuǎn)化率提高了1.75%、1.91%,腸道內(nèi)腸桿菌和乳酸菌有不同程度降低和提高,達到4.03 CFU/g、5.56 CFU/g,較大豆和玉米日糧無明顯差異[35]。廣西黃雞日糧中添加一定比例的經(jīng)丁酸梭菌與枯草芽孢桿菌發(fā)酵的棕櫚粕飼料,較對照組日增重提高了6.80%,料重比降低了6.12%,死淘率降低了16.67%,對廣西黃雞十二指腸、空腸及回腸絨毛有提高的趨勢[36]。在肉雞腸道菌群中添加甘露寡糖與棕櫚粕可以提升雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù),降低腸桿菌菌落數(shù),同時使雛雞的腸炎沙門氏菌定植敏感性提高[37]。日糧中添加15%發(fā)酵棕櫚粕飼養(yǎng)45 d對櫻桃谷肉鴨的生產(chǎn)性能有所提高,其出欄重較對照組增加102 g/只,料重比較對照組降低1.67%[38]。使用50%發(fā)酵棕櫚粕替代豆粕飼喂蛋雞12 周,蛋雞采食量和增質(zhì)量較對照組分別提高4.91%、4.82%,日產(chǎn)蛋率、單蛋質(zhì)量、蛋殼厚度、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色較對照組無顯著影響,飼料成本降低14.54%,飼料效率提高5.80%,血液中總蛋白、白蛋白及球蛋白較對照組分別提高了28.87%、27.78、32.00%[39]。肉牛養(yǎng)殖中使用棕櫚粕發(fā)酵飼料取代秸稈在10%、20%、30%后飼養(yǎng)80 d 對肉牛育肥均無顯著影響[40]。沙福芽孢桿菌、高地芽孢桿菌和維德曼芽孢桿菌發(fā)酵棕櫚粕4 d 后在肉雞日糧中替代10%飼養(yǎng)42 d,肉雞平均日增重和料重比較對照組提高了5.26%、降低了3.90%,平均日采量較對照組無顯著差異;對肌肉品質(zhì)、嫩度及顏色無顯著影響;對體長、臟器、重量、血清及血常規(guī)無顯著影響[27]。在日糧中添加50% EM 菌發(fā)酵棕櫚粕投喂紅羅非魚12周,與對照組相比,其存活率與日增重分別提高2.00%、4.17%,全魚蛋白、全魚脂肪分別降低11.36%、19.70%,肌肉總蛋白、肌肉球蛋白分別提高20.23%、19.40%,胃蛋白酶及胰蛋白酶分別提高184.00%、24.58%,體長、肥滿度、飼料利用率均無顯著變化[33]??梢?,發(fā)酵棕櫚粕可以用于飼喂畜禽動物、反芻動物及水產(chǎn)動物,提升了動物的飼料消化率、蛋白消化率、肌肉、腸道及血液等生產(chǎn)性能。
微生物發(fā)酵可大幅降解棕櫚粕抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高粗蛋白等營養(yǎng)成分,改善棕櫚粕營養(yǎng)品質(zhì)及生物利用度。發(fā)酵棕櫚粕具有較高經(jīng)濟效益,在畜禽動物及水產(chǎn)動物中已有部分研究。在現(xiàn)有基礎(chǔ)上,深入研究微生物在棕櫚粕中的發(fā)酵機理及協(xié)同機制、優(yōu)化發(fā)酵工藝、引入蒸汽爆破等預(yù)處理手段,以及建立完備的動物應(yīng)用評價體系,使棕櫚粕有望進一步提高營養(yǎng)價值后替代魚粉、豆粕等傳統(tǒng)蛋白原料,推動畜禽養(yǎng)殖及水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)健康發(fā)展。