◎ 方 凌，朱月輝，常婷婷

（銅陵市食品藥品檢驗(yàn)中心，安徽 銅陵 244000）

隨著生活水平的提高，人們對(duì)個(gè)人健康越來越關(guān)注。為擺脫對(duì)化學(xué)藥品的依賴性及長(zhǎng)時(shí)間服藥可能引起的諸多不良反應(yīng)，高血壓患者往往優(yōu)先考慮購買、食用輔助降血壓類食品。然而，受利益驅(qū)動(dòng)，一些不法商家為達(dá)到快速降壓的“奇效”[1]，在產(chǎn)品中非法添加降壓類藥物成分，用法用量不加控制，患者若長(zhǎng)時(shí)間服用此類產(chǎn)品或?qū)е轮貜?fù)用藥，會(huì)嚴(yán)重危害人們的生命安全和身體健康。

銅陵市食品藥品檢驗(yàn)中心在近5 年的食品非法添加藥物監(jiān)檢工作中發(fā)現(xiàn)，某些不法分子除了非法添加市場(chǎng)上常見的化學(xué)藥品外，還在食品中加入國(guó)外常用但未在國(guó)內(nèi)上市的化學(xué)藥品，具有隱蔽性，且缺乏相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法，難以發(fā)現(xiàn)并追究其違法行為。本文運(yùn)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)[2]，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描方式[3]，建立同時(shí)檢測(cè)食品中5 種降壓類藥物成分的方法。其中，托拉塞米、坎地沙坦酯、拉西地平在我國(guó)已批準(zhǔn)上市，作為藥品管理多年；阿齊沙坦是一種血管緊張素II 受體拮抗劑，多用于治療高血壓癥，且具有平穩(wěn)持久降壓作用[4-6]，于2021 年在國(guó)內(nèi)獲批上市；美托拉宗臨床使用已達(dá)30 年，一直被美國(guó)藥典所收載，未在我國(guó)上市，國(guó)內(nèi)對(duì)其檢驗(yàn)研究較少。該方法簡(jiǎn)單快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，以期為發(fā)現(xiàn)并打擊非法添加行為，完善食品行業(yè)監(jiān)管體系提供技術(shù)支持[7]。

1 材料與方法

1.1 對(duì)照品與試劑

托拉塞米（批號(hào)：100605- 201402；純度：100%；來源：中檢院）；拉西地平（批號(hào)：100741- 201903；純度：100%；來源：中檢院）；美托拉宗（批號(hào)：1214-RB-0042；純度：99.1%；來源：CATO）；阿齊沙坦（批號(hào)：H20D11S134845，純度：98%；來源：源葉生物）；坎地沙坦酯（批號(hào)：Y16A9C58724，純度：99%；來源：源葉生物）；甲酸：色譜級(jí)；乙腈：質(zhì)譜級(jí)；乙酸銨：色譜級(jí)；水：超純水。

1.2 儀器

XEVO TQ/S 超高效液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters 公司）；BSA224S-CW 電子天平（德國(guó)Sartorius 公司）；KQ-250DV 超聲洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；3-30KS 離心機(jī)（德國(guó)Sigma 公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 色譜條件

色 譜 柱：C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）； 流動(dòng)相：A 為含0.1%甲酸的20 mmol·L-1乙酸銨溶液，B 為0.1%甲酸的乙腈溶液，梯度洗脫程序見表1；流速：0.2 mL·min-1；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

表1 梯度洗脫程序表

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：ESI 電噴霧離子源；檢測(cè)方式：ESI+模式下MRM 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；毛細(xì)管電壓：3.0 kV；離子源溫度：160 ℃；脫溶劑氣溫度：450 ℃；脫溶劑氣流量：550 L·Hr-1；5 種目標(biāo)化合物優(yōu)化后質(zhì)譜參數(shù)見表2。

表2 5 種成分質(zhì)譜參數(shù)表

1.3.3 溶液制備

（1）對(duì)照品溶液制備。避光條件下分別精密稱取5 種藥物成分標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg 于10 mL 棕色容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成1 mg·mL-1單一成分標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于-20 ℃避光貯存，有效期3 個(gè)月。根據(jù)實(shí)際工作需要，用乙腈水溶液（1 ∶1）配制系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

（2）樣品溶液制備。避光條件下取試樣適量混勻，研細(xì)，精密稱取1 g（精確至0.001 g）置于50 mL棕色容量瓶中，加乙腈適量，超聲提取30 min，放冷至室溫，用乙腈定容，轉(zhuǎn)移至50 mL 離心管中，4 000 r·min-1離心5 min，上清液經(jīng)微孔濾膜過濾（0.22 μm，有機(jī)相），取續(xù)濾液，根據(jù)實(shí)際濃度用乙腈水溶液（1 ∶1）適當(dāng)稀釋至線性范圍內(nèi)，備用，樣品經(jīng)處理后在48 h 內(nèi)盡快測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍、檢出限、定量限

取1.3.3（1）項(xiàng)下單一成分對(duì)照品溶液配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在0.5 ～10.0 ng·mL-1線性范圍內(nèi)，以質(zhì)量濃度（ng·mL-1）為橫坐標(biāo)x，以目標(biāo)成分的峰面積為縱坐標(biāo)y，進(jìn)行線性回歸，得到不同基質(zhì)下各組分的回歸方程；取1.3.3（1）項(xiàng)下單一成分對(duì)照品溶液逐步稀釋，進(jìn)行測(cè)定，在組分有明顯響應(yīng)的前提下，根據(jù)3 倍信噪比（S/N=3）和10 倍信噪比（S/N=10）分別計(jì)算檢出限和定量限。由表3 可知，各種目標(biāo)成分在線性范圍內(nèi)的相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.99，其中拉西地平、托拉塞米、阿奇沙坦線性范圍為1.0 ～10.0 ng·mL-1、檢 出 限 均 為25 μg·kg-1、定 量 限 均 為50 μg·kg-1；美托拉宗、坎地沙坦酯線性范圍為0.5 ～5.0 ng·mL-1、檢出限均為12.5 μg·kg-1、定量限均為25 μg·kg-1。

表3 5 種成分線性方程、檢出限以及定量限結(jié)果表

2.2 回收率以及精密度實(shí)驗(yàn)

取空白樣品加標(biāo)，美托拉宗、坎地沙坦酯的添加水平為25 μg、50 μg、250 μg，拉西地平、托拉塞米、阿齊沙坦的添加水平為50 μg、100 μg、500 μg；每個(gè)添加水平共6 組，按照樣品處理后進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，考察方法的回收率及精密度。由表4 可知，5 種成分的平均加標(biāo)回收率為92.66%～111.17%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.99%～5.00%，適用于測(cè)定要求。

表4 5 種成分回收率以及精密度結(jié)果表

2.3 樣品測(cè)定結(jié)果

用該方法對(duì)近期收集的市場(chǎng)及網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)銷售的50 批降壓類食品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果有6 批樣品檢出上述5 種非法添加，為其中1 ～4 種混合添加。

3 結(jié)論

本方法簡(jiǎn)便快捷，靈敏度高，檢出限、定量限、線性、精密度和回收率均符合日常檢測(cè)工作要求，可為稽查執(zhí)法部門發(fā)現(xiàn)、打擊此類非法添加行為起到技術(shù)支撐作用。