劉正平 ，楊雪華 ，陳倩倩，毛楷凡 ，薛 松 ，李大偉 ,

（1. 山東省藥學(xué)科學(xué)院 新型緩控釋制劑與藥物靶向遞送系統(tǒng)山東省工程研究中心，山東 濟(jì)南 250101；2. 山東省化學(xué)藥物緩釋制劑工程技術(shù)研究中心，山東 濟(jì)南 250101；3. 國(guó)家藥監(jiān)局藥物制劑技術(shù)研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250101）

2019年國(guó)際糖尿病聯(lián)盟（IDF）發(fā)布的全球糖尿病地圖（第9版） 顯示，2019年全球約4.63億20～79歲成人患糖尿?。?1個(gè)人中有1個(gè)為糖尿病患者）。糖尿病患者數(shù)正以驚人的速度在迅速增長(zhǎng)，糖尿病尤其是2型糖尿病目前已成為嚴(yán)重影響人類身心健康的主要公共衛(wèi)生問(wèn)題。輕度糖尿病患者可通過(guò)飲食控制，堅(jiān)持運(yùn)動(dòng)及控制體重等來(lái)控制血糖水平，但血糖控制不良患者需結(jié)合口服降糖藥或胰島素來(lái)維持足夠的血糖水平[1]。我國(guó)現(xiàn)階段所使用的口服降糖藥包括雙胍類、磺酰脲類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷酮類等[2-3]。

格列齊特（gliclaizide）屬于第二代磺酰脲類長(zhǎng)效口服降糖藥物，臨床可用于單用飲食療法不足以控制血糖的非胰島素依賴型糖尿?。?型）患者的一線用藥，也可與其他降血糖藥物一起或與胰島素配伍使用[4]。口服后2～6 h血藥濃度達(dá)高峰，t1/2約10～12 h，主要由腎排出。對(duì)成年型糖尿病人有降血糖作用，能降低血小板黏附力，降低血漿比黏度，減少ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，改善甲皺微循環(huán)。普通格列齊特片每日服用160 mg，分2次口服，存在使用頻次高，臨床使用不方便，血藥濃度波動(dòng)大，生物利用度低等問(wèn)題。將格列齊特制備成緩釋片，臨床使用具有緩慢釋放，減少患者服藥量和服藥次數(shù)，血藥濃度相對(duì)穩(wěn)定，從而提高患者用藥安全性和依從性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 8454 UV-Vis分光光度計(jì)（美國(guó)安捷倫公司）；G10實(shí)驗(yàn)型濕法混合制粒機(jī)（深圳市信宜特科技有限公司）；ZP10A型旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)（北京國(guó)藥龍力科技有限公司）；YD-20KZ片劑硬度儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；Logan 860DL溶出自動(dòng)取樣系統(tǒng)[祿根儀器（鎮(zhèn)江）有限公司]；Seven Excellence pH計(jì)[梅特勒托利多儀器（上海）有限公司]。

1.2 試藥

格列齊特原料藥（浙江九州藥業(yè)有限公司，批號(hào)：14W18091501）；格列齊特對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：1969-9701）；羥丙甲纖維素K4M（HPMC K4M，上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司，批號(hào)：PDR480737）；羥丙甲纖維素K100LV（HPMC K100LV，上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司，批號(hào)：PDR484708）；二水磷酸氫鈣（德國(guó)瑞登梅爾父子公司，批號(hào)：18J/225-P2X）；麥芽糊精（連云港ROQUETE公司，批號(hào)：1642C）；二氧化硅（SH-CD1，安徽山河藥用輔料有限公司，批號(hào)：181206）；硬脂酸鎂（SH-YM-M，安徽山河藥用輔料有限公司，批號(hào)：190126）；格列齊特緩釋片[達(dá)美康，施維雅（天津）制藥有限公司，規(guī)格：30 mg，批號(hào)：2013982]。

2 方法與結(jié)果

2.1 格列齊特緩釋片的制備

稱取處方量格列齊特、二水磷酸氫鈣、麥芽糊精、羥丙甲纖維素于濕法混合制粒機(jī)中，開啟攪拌和剪切，混勻物料；再向濕法混合制粒機(jī)中加入純化水制軟材，過(guò)20目篩制粒；將濕顆粒置60 ℃烘箱中干燥，過(guò)20目篩整粒，加入處方量的二氧化硅和硬脂酸鎂，混勻，壓片，即得，每片含主藥30 mg。

2.2 格列齊特緩釋片釋放度測(cè)定方法

依據(jù)《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0931溶出度與釋放度測(cè)定法第二法[5]，以900 ml pH 7.4磷酸鹽緩沖液作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為（37±0.5）℃。依法操作，于2，4，6，8，10 h和12 h分別取溶液10 ml，經(jīng)0.45 μm濾膜濾過(guò)，并及時(shí)補(bǔ)液10 ml，棄去初濾液，取續(xù)濾液適量，以溶出介質(zhì)稀釋至一定濃度，作為供試品溶液。另精密量取格列齊特對(duì)照品約13.00 mg，置500 ml量瓶中，加乙腈5 ml振搖使溶解后，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置10 ml量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。取供試品溶液和對(duì)照品溶液，照《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0410紫外-可見分光光度法[5]在228 nm和290 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，求出二者之差，分別計(jì)算格列齊特的累積釋放度。

2.3 制備工藝研究

緩釋片釋藥行為的重要影響因素包括緩釋材料的種類、型號(hào)、用量，填充劑種類及用量等，其中以緩釋材料的遴選和制備工藝的研究尤其重要。本研究以HPMC作為格列齊特緩釋片的骨架材料，考察不同型號(hào)HPMC組合對(duì)緩釋片釋放度的影響；在此基礎(chǔ)上，對(duì)填充劑和潤(rùn)濕劑進(jìn)行了比較研究，最終確定格列齊特緩釋片的處方和制備工藝。

2.3.1 緩釋材料HPMC的影響 本研究選擇不同型號(hào)的HPMC作骨架緩釋材料，保持緩釋材料總用量20 %，設(shè)計(jì)5個(gè)方案，分別考察單獨(dú)使用HPMC K4M或HPMC K100LV，及HPMC K4M與HPMC K100LV的比例為1:3，1:1，3:1時(shí)的釋放度，試驗(yàn)方案見表1，結(jié)果見圖1。

表1 緩釋骨架材料的選擇

圖1 緩釋材料種類及比例對(duì)緩釋片釋放度的影響

按《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》[6]中非模型依賴相似因子（f2）方法，對(duì)自制樣品和參比制劑的釋放度進(jìn)行對(duì)比研究，結(jié)果見表2。

表2 自研產(chǎn)品相似性分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，保持處方中緩釋材料總量不變，HPMC黏度對(duì)緩釋片釋藥速率有明顯影響。HPMC分子量越大，其黏度越大，藥物釋放越慢；不同黏度的HPMC進(jìn)行組合，可以調(diào)整其釋放度。HPMC K4M和HPMC K100LV比例（1:1），制得的格列齊特緩釋片與參比制劑累積釋放曲線相似。故最終確定二者比例為1:1。

2.3.2 填充劑用量的影響 固定處方其他輔料的用量不變，分別考察加入二水磷酸氫鈣（60 %）、糊精（60 %）、二水磷酸氫鈣（50 %）/糊精（10 %）合用時(shí)對(duì)樣品釋放度的影響。設(shè)計(jì)了3個(gè)方案，對(duì)自制樣品和參比制劑的釋放度進(jìn)行了對(duì)比研究。結(jié)果見表3，圖2。

表3 填充劑的選擇

圖2 填充劑種類對(duì)緩釋片釋放度的影響

采用相似因子法進(jìn)行相似性判定，結(jié)果見表4。

表4 自研產(chǎn)品相似性分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，填充劑種類對(duì)藥物釋放度略有影響。根據(jù)與參比制劑釋放度相似性比較，確定填充劑選擇二水磷酸氫鈣用量為50 %，糊精用量為10 %。

2.3.3 潤(rùn)濕劑的選擇 采用濕法制粒工藝，分別選用純化水、50 %乙醇溶液、70 %乙醇溶液進(jìn)行濕法制粒，對(duì)制得的顆粒性狀及片劑的釋放度進(jìn)行考察。方案見表5，結(jié)果見表6，表7。

表5 潤(rùn)濕劑的選擇

表6 不同潤(rùn)濕劑對(duì)顆粒性狀的影響

圖3 潤(rùn)濕劑對(duì)緩釋片釋放度的影響

采用相似因子法進(jìn)行相似性判定，結(jié)果見表 7。

表7 自研產(chǎn)品相似性分析

根據(jù)顆粒性狀及累積釋放度結(jié)果，確定采用50 %乙醇溶液作為潤(rùn)濕劑，效果較好。

2.4 自制樣品與參比制劑體外釋放行為對(duì)比

按確定的處方和工藝制備格列齊特緩釋片，按2.2項(xiàng)下方法分別測(cè)定其在pH 7.4磷酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和水中的釋放度，與參比制劑釋放度進(jìn)行對(duì)比，計(jì)算其f2分別為78.9，80.1，79.3，82.2。根據(jù)《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》，非模型依賴相似因子f2值高于50 時(shí)，可認(rèn)為兩條曲線具有相似性，故自制樣品與參比制劑體外釋放相似。

圖4 自制格列齊特緩釋片在4種溶出介質(zhì)中釋放度測(cè)定結(jié)果

2.5 釋藥機(jī)制研究

采用模型擬合來(lái)判斷自制樣品與參比制劑的釋放機(jī)制是否相同，以此判斷兩者釋放行為的相似性，從而為BE試驗(yàn)提供參考。根據(jù)優(yōu)化后的處方，將自制樣品和參比制劑的釋放度采用零級(jí)方程、一級(jí)方程、Higuchi 方程進(jìn)行曲線擬合，根據(jù)相關(guān)系數(shù)（r）判斷其擬合程度，r2越大，擬合效果越好。釋藥曲線擬合結(jié)果見表8。

由表8可見，自制樣品與參比制劑的釋藥曲線均符合Higuchi方程，且相關(guān)系數(shù)的r2最大，說(shuō)明自制格列齊特緩釋片與參比制劑體外釋放均以Higuchi 擴(kuò)散為主，兩者釋藥機(jī)制相同。

表8 釋藥曲線擬合結(jié)果

3 討論

HPMC是緩釋制劑中理想的水凝膠骨架材料，高黏度HPMC可作為親水凝膠骨架緩釋片的阻滯劑，低黏度HPMC可用作緩釋片劑致孔劑，用于緩釋、控釋制劑，可延長(zhǎng)有效藥物濃度平臺(tái)期，增加藥效持續(xù)時(shí)間。HPMC遇水時(shí)水化形成凝膠層，凝膠擴(kuò)散、溶蝕后釋放藥物，從而達(dá)到緩釋、控釋目的[7]。

以HPMC為緩釋骨架材料，采用濕法制粒壓片的格列齊特緩釋片釋放機(jī)制研究結(jié)果表明，HPMC種類和用量對(duì)格列齊特緩釋片體外釋放速率影響顯著，其體外釋放符合Higuchi方程。

自制格列齊特緩釋片最佳處方和制備工藝為：HPMC K4M和K100LV的比例為1:1， 二水磷酸氫鈣用量為50 %，糊精用量為10 %，潤(rùn)濕劑為50 %乙醇溶液，濕法制粒。制備的格列齊特緩釋片在pH 7.4磷酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液及水4種釋放介質(zhì)中的相似因子f2均大于70，與參比制劑體外釋放行為相似。