陳 程，東泳杉，閆夢(mèng)茹，羅國(guó)平，李偉澤,

（1. 西安醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，陜西 西安 710021；2. 江蘇微納醫(yī)藥科技有限公司，江蘇 揚(yáng)中 212218）

參仁安神顆粒（Shenren Anshen Granules，SRG）來(lái)源于臨床經(jīng)驗(yàn)方劑，由西洋參、酸棗仁、蓮子心、甘草四味藥材組成，方中君藥為西洋參，臣藥為酸棗仁，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、寧心安神的功效。該方以湯劑長(zhǎng)期應(yīng)用于臨床，效果良好。但湯劑存在一定的不足之處，一是臨時(shí)煎煮使用不便，二是口感差，三是質(zhì)量不穩(wěn)定不易保存[1-3]。因此擬開(kāi)發(fā)為顆粒劑，可保持傳統(tǒng)湯劑的特點(diǎn)，且服用量減小，安全有效，質(zhì)量可控[4-6]。本文將方中西洋參全粉入藥，酸棗仁、蓮子心、甘草三味藥采用煎煮法進(jìn)行提取，選取煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)、加水倍量為考察因素，以酸棗仁總皂苷含量和干膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取工藝。按優(yōu)選提取工藝條件得到煎煮液，將煎煮液濃縮至浸膏，將方中西洋參細(xì)粉加入得到稠膏。以藥輔比例（稠膏:輔料）、混合輔料比例、乙醇濃度為考察因素，以外觀評(píng)價(jià)、顆粒合格率、顆粒休止角、顆粒吸濕性和顆粒堆密度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選成型工藝。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-2012PSC型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（尤尼柯儀器有限公司）；ACC22104電子天平（北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；DZKW-D-2型水浴箱（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）；KQ3200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DHG9140B型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海安亭科技儀器有限公司）。

1.2 試藥

處方中藥材均購(gòu)自陜西誠(chéng)合藥業(yè)有限公司并由中藥教研室教師鑒定；酸棗仁皂苷A對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司，批號(hào)：20210433）；淀粉，糊精（安徽山河藥用輔料有限公司）；木糖醇（山東福田藥業(yè)有限公司）；乙醇（食品級(jí)）；水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 酸棗仁總皂苷的含量測(cè)定

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取酸棗仁皂苷A 2.5 mg，置于10 ml量瓶，加甲醇配制成濃度為0.25 mg/ml的對(duì)照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備 稱(chēng)取處方量酸棗仁、蓮子心和甘草，加適量水，煎煮，將水煎液濃縮至50 ml，采用水飽和正丁醇多次萃取，合并正丁醇層，用甲醇定容至10 ml，搖勻，作為供試品溶液。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取對(duì)照品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 ml，分別置于10 ml量瓶中，水浴揮干溶劑，分別加入5 %香草醛冰醋酸溶液0.2 ml，再加入高氯酸溶液0.8 ml，60 ℃水浴加熱15 min，取出，立即冰浴冷卻10 min，加冰醋酸5 ml，搖勻，隨行試劑為標(biāo)準(zhǔn)空白，采用紫外分光光度計(jì)于540 nm處測(cè)定吸光度。以對(duì)照品量（X）為橫坐標(biāo)，吸光度（Y）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程：Y=0.974X+0.1112（r=0.9996），結(jié)果表明酸棗仁總皂苷在0.025～0.125 mg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.4 樣品含量測(cè)定 準(zhǔn)確吸取適量供試品溶液，按2.1.3項(xiàng)下方法操作，測(cè)定吸光度值，并計(jì)算酸棗仁總皂苷含量（mg/g）。

2.2 干膏得率的測(cè)定[7]

按處方量稱(chēng)取藥材，采用水煎煮法提取，將水煎液濃縮至50 ml，精密吸取濃縮液10 ml至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干并于105 ℃干燥6 h，將其置于干燥器中冷卻1 h，迅速稱(chēng)重，按下式計(jì)算干膏得率。

式中，W為浸膏質(zhì)量，M為藥材質(zhì)量。

2.3 提取工藝的考察[8-10]

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和文獻(xiàn)資料，本次試驗(yàn)中以加水倍數(shù)（A）、煎煮次數(shù)（B）、煎煮時(shí)間（C）為考察因素，分別選取3個(gè)水平，按L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)。因素水平表見(jiàn)表1，正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，方差分析見(jiàn)表3。

表1 因素水平表

表2 L9（34）正交表及試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析

由正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析可知，影響因素主次為B＞C＞A，其中B（煎煮次數(shù)）、C（煎煮時(shí)間）因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著性影響。綜合考慮，確定最佳組合為A1B2C3，即6倍量水煎煮2次，每次90 min。稱(chēng)取處方量藥材，按最佳組合提取3份，經(jīng)計(jì)算平均酸棗仁總皂苷含量為19.11 mg/g，干膏得率為15.32 %（n=3）。

2.4 成型工藝的研究

2.4.1 顆粒的制備 按上述最優(yōu)提取工藝，稱(chēng)取處方量酸棗仁、蓮子心和甘草，煎煮，煎煮液濃縮至相對(duì)密度1.12～1.15（80 ℃）浸膏，將西洋參粉碎過(guò)80目篩，加入浸膏中混合均勻，即得稠膏，備用。按試驗(yàn)設(shè)計(jì)稱(chēng)取各物料，混合，過(guò)14目篩制濕顆粒，60 ℃烘干2 h，整粒，即得。

2.4.2 顆粒評(píng)價(jià)指標(biāo) 查閱文獻(xiàn)[11-13]，選取外觀評(píng)價(jià)、顆粒合格率、顆粒休止角、顆粒吸濕性和顆粒堆密度5個(gè)參數(shù)，采用多指標(biāo)綜合加權(quán)法進(jìn)行顆粒成形工藝的評(píng)價(jià)，權(quán)重系數(shù)分配和綜合評(píng)分計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 顆粒評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2.4.2.1 外觀評(píng)價(jià) 以10分制為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)顆粒的均勻度、色澤進(jìn)行外觀評(píng)價(jià)。

2.4.2.2 顆粒合格率 按《中國(guó)藥典》2020年版四部[14]0104顆粒項(xiàng)下粒度檢查方法測(cè)定，篩選合格顆粒（能通過(guò)1號(hào)篩而不通過(guò)5號(hào)篩的顆粒為合格顆粒）。合格率（%）=合格顆粒質(zhì)量/總顆粒質(zhì)量×100。

2.4.2.3 顆粒休止角 采用固定漏斗法[15]進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算休止角（α）。

2.4.2.4 顆粒吸濕性（率） 取干燥且恒定質(zhì)量的稱(chēng)量瓶，置于盛有NaCl過(guò)飽和溶液的干燥器中。取約0.5 g樣品顆粒，精密稱(chēng)定（M1）后平鋪于扁形稱(chēng)量瓶。稱(chēng)量瓶蓋打開(kāi)放于干燥器，恒溫恒濕（25 ℃，相對(duì)濕度 75 %）條件下吸濕至質(zhì)量不變時(shí)，稱(chēng)定顆粒質(zhì)量M2。吸濕性=（M2-M1）/M1。

2.4.2.5 顆粒溶化率 取合格顆粒5 g，加熱水100 ml，攪拌5 min，離心5 min，取上清20 ml，置于恒定質(zhì)量蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，60 ℃真空干燥至恒定質(zhì)量，稱(chēng)重并計(jì)算溶化率，溶化率=溶化顆粒質(zhì)量/顆粒質(zhì)量。

2.4.3 成型工藝的考察[16]以藥輔比例（A，稠膏:輔料）、混合輔料比例（B，木糖醇:糊精）、乙醇濃度（C）為考察因素，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果分別選取3個(gè)水平，按L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表5，正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6，方差分析見(jiàn)表7。

表5 因素水平表

表6 L9（34）正交表及試驗(yàn)結(jié)果

表7 方差分析

由正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析可知，影響因素主次為B＞A＞C，即其中A（藥輔比例）、B（混合輔料比例）因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著性影響。綜合考慮，確定最佳組合為A3B2C1，即藥輔比例（稠膏:輔料）1:2，混合輔料比例（木糖醇:糊精）1:1.3，以75 %乙醇為潤(rùn)濕劑制軟材（手握成團(tuán)，觸之即散），過(guò)14目篩制濕顆粒，60 ℃烘干2 h，整粒。按最佳組合制備顆粒3份。本品為淡黃色顆粒，色澤一致，顆粒大小均勻，無(wú)吸潮結(jié)塊現(xiàn)象，經(jīng)計(jì)算平均顆粒合格率為92.1 %，吸濕率為7.88 %，休止角30.12°（n=3），顆粒熔化率為92.28 %。

3 討論

參仁安神顆粒以湯劑長(zhǎng)期應(yīng)用于臨床，但存在一定的不足之處，因此擬開(kāi)發(fā)為顆粒劑。從方中各藥味的理化性質(zhì)、藥理作用和節(jié)省輔料等方面考慮，本研究將方中君藥西洋參全粉入藥，其余3味藥水煎煮并濃縮至浸膏，采用部分藥材細(xì)粉與稠浸膏混合濕法制粒。酸棗仁為本方臣藥，考慮到中藥成分多、靶點(diǎn)多的特點(diǎn)，選取酸棗仁總皂苷和干膏得率為提取工藝的評(píng)價(jià)指標(biāo)。顆粒劑的成型工藝考察，立足于該疾病發(fā)病的年齡特點(diǎn)，考慮該人群可能存在高血糖癥，故選擇無(wú)糖型輔料；另本文充分考慮到單一采用顆粒合格率作為成型工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的缺點(diǎn)，選擇顆粒合格率、顆粒休止角、顆粒吸濕性和顆粒堆密度物理屬性參數(shù)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用多指標(biāo)綜合加權(quán)法對(duì)成型工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)。