劉 鑫,張亞紅,袁 苗,劉 帥,葛 靜,周 娟

(1.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院,銀川 750021;2.寧夏大學(xué)食品與葡萄酒學(xué)院,銀川 750021)

【研究意義】我國(guó)是葡萄(VitisviniferaL.)最大生產(chǎn)國(guó),近年來設(shè)施葡萄迅速發(fā)展,成為推動(dòng)葡萄產(chǎn)業(yè)繁榮的新動(dòng)力[1]。但設(shè)施中的弱光環(huán)境導(dǎo)致設(shè)施‘紅地球’葡萄栽培連續(xù)形成花芽能力差、分化數(shù)量少,成為設(shè)施葡萄栽培生產(chǎn)中的突出問題[2]。因此,花芽分化不良已成為阻礙設(shè)施‘紅地球’葡萄產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的瓶頸,能否形成量多質(zhì)優(yōu)的花芽已成為設(shè)施葡萄栽培取得成功的關(guān)鍵?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】‘紅地球’葡萄對(duì)光反應(yīng)敏感,設(shè)施弱光環(huán)境下的花芽更多形成卷須,導(dǎo)致成花率下降,目前主要通過選用一些耐弱光品種[3]或采取更新修剪措施[4],但兩種措施都存在局限性,前者缺乏適合西北地區(qū)的優(yōu)質(zhì)耐弱光品種,后者對(duì)設(shè)施‘紅地球’葡萄萌發(fā)新梢成花規(guī)律尚未展開研究。光照作為必不可少的環(huán)境因子,影響園藝作物生長(zhǎng)發(fā)育[5],也是最容易調(diào)控的設(shè)施環(huán)境因素。光照強(qiáng)度直接影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育和形態(tài)特征[6];光照周期影響植物的生育進(jìn)程和營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)[7];光質(zhì)調(diào)節(jié)激素平衡、光合產(chǎn)物累積等改變植物內(nèi)部因子,從而調(diào)控成花基因的表達(dá)[8-9],是花芽分化的重要影響因素。不同光質(zhì)對(duì)園藝植物成花的影響不同[10]。藍(lán)光通過改變?nèi)~片中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累,抑制了蘋果開花,而紅光對(duì)蘋果開花影響不大[11]。紅光處理可促使茉莉花提前開花且增加花蕾數(shù)量,而藍(lán)光延遲茉莉開花但花蕾數(shù)量減少[12]。因此,不同光質(zhì)對(duì)長(zhǎng)日照植物成花誘導(dǎo)的影響取決于所涉及的物種,而紅光與藍(lán)光的結(jié)合可形成適合植物光合作用和形態(tài)發(fā)生的光譜吸收峰,激活植物中復(fù)雜的光系統(tǒng),啟動(dòng)生理和生化反應(yīng),形成完全發(fā)育的花芽[13-14]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】LED能精準(zhǔn)提供植物所需波長(zhǎng)的光質(zhì)、光強(qiáng)和光長(zhǎng),在設(shè)施園藝光環(huán)境調(diào)控中具有重要意義和作用[15]。目前,使用不同光質(zhì)LED提高產(chǎn)量和品質(zhì)在花卉和蔬菜[16-18]上已有廣泛應(yīng)用,在果樹上也有一些研究[19-20]。但利用LED光照措施提升設(shè)施內(nèi)的光環(huán)境,改善設(shè)施葡萄花芽分化的研究較少,且對(duì)設(shè)施葡萄花芽分化過程中內(nèi)源物質(zhì)變化及基因?qū)用娴难芯窟€較欠缺,因此,深入研究LED光質(zhì)對(duì)調(diào)控葡萄花芽分化具有重要意義?！緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究通過不同紅藍(lán)光處理,對(duì)花芽分化進(jìn)程進(jìn)行組織學(xué)、生理指標(biāo)和成花相關(guān)基因研究,進(jìn)而了解紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄花芽分化的調(diào)控機(jī)理,為設(shè)施‘紅地球’葡萄連年優(yōu)質(zhì)穩(wěn)產(chǎn)提供理論依據(jù)和解決方案。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2020年4—10月在銀川市賀蘭縣園藝產(chǎn)業(yè)園15號(hào)陰陽結(jié)合型日光溫室的陰棚內(nèi)進(jìn)行(106°16′ E,38°20′ N),屬中溫帶大陸性氣候。陰棚坐南朝北,東西走向,東西長(zhǎng)度90 m,南北跨度9 m,脊高4.5 m,覆蓋材料為聚氯乙烯薄膜(PVC),年平均日照時(shí)數(shù)2800～3000 h,年平均氣溫9.7 ℃。試驗(yàn)材料為日光溫室9年生的‘紅地球’(Vitisviniferacv.‘Red Globe’)葡萄,主干傾斜L樹形,株行距為0.8 m×1.5 m。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)計(jì)5種不同比例紅藍(lán)光,紅光波長(zhǎng)620 nm,藍(lán)光波長(zhǎng)435 nm。分別為紅(R)、藍(lán)(B)、紅藍(lán)2∶1(R2B1)、紅藍(lán)4∶1(R4B1)、紅藍(lán)6∶1(R6B1)的LED植物燈,以溫室自然光作為對(duì)照(CK),不同處理間以遮光膜相隔。共72株樹,分6個(gè)小區(qū),每個(gè)小區(qū)12株,3次重復(fù),在每組試驗(yàn)行樹體上方30 cm安置燈管,葉面光照強(qiáng)度300 μmol/(m2·s),時(shí)長(zhǎng)14 h/d,光照時(shí)段為8:00—22:00。選取健康、長(zhǎng)勢(shì)相同的葡萄植株掛牌標(biāo)記,觀察試驗(yàn)植株情況,新梢長(zhǎng)至10葉時(shí)進(jìn)行摘心,副梢留1葉摘心,進(jìn)行常規(guī)水肥管理。

1.3 生理指標(biāo)測(cè)量

‘紅地球’葡萄從萌發(fā)開始光照,到果實(shí)成熟(2020年9月15日)采收結(jié)束光照。新梢展葉時(shí)(2020年4月15日)開始采集長(zhǎng)勢(shì)相近、基部粗度一致的枝條,隨機(jī)取樣,每個(gè)處理采集20只枝條。選擇4～6節(jié)花芽和葉片,用鋒利刀片取下,剝?nèi)ネ獠亏[片,取下主芽放入FAA液(90 mL 70%乙醇+5 mL 38%甲醛+5 mL冰乙酸)固定液中,用于制作花芽切片。

花芽石蠟切片和花芽分化進(jìn)程劃分參照朱維等[21]的方法;將不同節(jié)位葉片混勻,可溶性糖和淀粉含量采用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定,可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測(cè)定,類黃酮含量采用分光光度法測(cè)定,所有測(cè)量指標(biāo)3次重復(fù),具體步驟參考王學(xué)奎等[22]的方法。

1.4 成花相關(guān)基因的表達(dá)分析

選擇成熟期(2020年9月15日)9:00 取各處理第5節(jié)花芽,以減少由于晝夜節(jié)律而導(dǎo)致基因表達(dá)差異的可能性。將取下的花芽立即置于液氮中,用OminiPlant RNA Kit(DNase I)試劑盒(北京康為世紀(jì)生物科技有限公司)提取樣品的RNA,利用Nanodrop 2000檢測(cè)RNA的濃度和純度,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA完整性,使用Agilent 2100測(cè)定RIN值。根據(jù)Genbank發(fā)表的葡萄基因序列,利用Primer 6.0軟件設(shè)計(jì)成花基因特異性引物(表1)[23],由生物工程(上海)股份有限公司合成,選用VvACTIN1(GenBank:XP_008654957.1)為內(nèi)參基因,采用2-ΔΔCt法計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。qRT-PCR使用ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix試劑盒(南京諾唯贊生物科技有限公司),PCR反應(yīng)體系為20 μL:one step RT-qPCR Master Mix 10 μL,上游引物和下游引物各0.4 μL,Template(RNA)1 μL,RT enzyme Mix 0.65 μL,ddH2O 7.55 μL。反應(yīng)程序?yàn)?0 ℃反轉(zhuǎn)錄5 min,95 ℃預(yù)變性10 min,95 ℃變性10 s,60 ℃退火延伸30 s,40次循環(huán),3次重復(fù)。

表1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR基因引物序列Table 1 Primer sequences for the quantification of transcripts by real-time PCR

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 25.0進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA),Duncan法進(jìn)行多重比較(α=0.05),Origin Pro 2021軟件進(jìn)行制圖,數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。采用Cytoscape 3.8.0軟件,選取相關(guān)性大于0.6的基因,構(gòu)建基因間相互作用網(wǎng)絡(luò),使用CytoHubba工具(Method:MNC),找出節(jié)點(diǎn)基因,并將基因按總關(guān)聯(lián)度大小進(jìn)行排序。

2 結(jié)果與分析

2.1 ‘紅地球’葡萄花芽分化進(jìn)程劃分

通過對(duì)不同處理下‘紅地球’葡萄各節(jié)位花芽分化觀察,將花芽分化進(jìn)程分為未分化期、始分化期、花原始體發(fā)育期、花序主軸發(fā)育期和花序二級(jí)軸發(fā)育期5個(gè)階段(圖1)。

a.未分化期;b.始分化期;c.花原始體發(fā)育期;d.花序主軸發(fā)育期;e.花序二級(jí)軸發(fā)育期。A.生長(zhǎng)點(diǎn);LP.葉原基;IP.花序原基;BR.苞片;BP.分枝原基。a.Undifferentiated stage; b.Beginning of differentiation; c.Flower anlagen development; d.Formation of main cob of inflorescene; e.Formation of second cob of inflorescene; A.Apex; LP.Leaf primordium; IP.Inflorescence primordium; BR.Bracts; BP.Branching primordium.圖1 ‘紅地球’葡萄花芽分化進(jìn)程切片F(xiàn)ig.1 Paraffin section of flower bud differentiation process of ‘Red Globe’ grape

2.2 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第4節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響

‘紅地球’葡萄的花芽分化是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程,且各階段持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。從圖2可以看出,對(duì)照和紅藍(lán)光處理下的第4節(jié)花芽于5月15日開始進(jìn)入始分化期,并且同期R4B1和R6B1處理已有花芽進(jìn)入花原始體發(fā)育期。6月15日,所有處理進(jìn)入花序主軸發(fā)育期,6月30日,R4B1和R6B處理已經(jīng)進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期,7月15日所有處理進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期,其中,R4B1和R6B1處理所占比例為40%和35%,對(duì)照為10%,而R和B處理僅為5%。所有處理于7月30日通過始分化期,8月30日通過花原始體發(fā)育期。

圖2 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第4節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響Fig.2 Effect of different proportions of red and blue light on flower bud differentiation process in section 4 of ‘Red Globe’grape

2.3 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第5節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響

由圖3可以看出,紅藍(lán)光處理下‘紅地球’葡萄第5節(jié)花芽分化速度差異明顯。4月30日,所有處理均沒有進(jìn)入分化期,R4B1和R6B1處理在5月15日已有花芽進(jìn)入花原始體發(fā)育期,而其他處理在5月30日才開始有花芽進(jìn)入花原始體發(fā)育期。R2B1、R4B1和R6B1處理在6月30日開始進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期,進(jìn)入分化期的花芽分別占比為75%、90%和90%,而CK、R和B處理進(jìn)入分化期的花芽占比為75%、65%和55%。7月15日,所有處理均進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期,并在8月30日通過花原始體發(fā)育期。

圖3 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第5節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響Fig.3 Effect of different proportions of red and blue light on flower bud differentiation process in section 5 of ‘Red Globe’ grape

2.4 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第6節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響

由圖4可以看出,紅藍(lán)光處理下的‘紅地球’葡萄第6節(jié)花芽在5月15日全部進(jìn)入始分化期,5月30日進(jìn)入花原始體發(fā)育期,6月15日進(jìn)入花序主軸發(fā)育期。其中,R4B1和R6B1處理分化速度大于其他處理,6月15日時(shí),R和B處理仍有部分花芽未進(jìn)入分化期。7月15日,所有處理均進(jìn)入花芽分化期,且R2B1、R4B1和R6B1處理全部通過始分化期。7月30日,全部處理均通過始分化期,進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期,R4B1和R6B1處理進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期的花芽占比分別為55%和45%,CK為20%,而B處理僅為10%。8月15日,R4B1處理全部進(jìn)入花序主軸發(fā)育期和花序二級(jí)軸發(fā)育期。

圖4 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄第6節(jié)花芽分化進(jìn)程的影響Fig.4 Effect of different proportions of red and blue light on flower bud differentiation process in section 6 of ‘Red Globe’ grape

2.5 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄成花率的影響

不同紅藍(lán)光處理下‘紅地球’葡萄各節(jié)位成花率差異顯著(圖5),單一紅、藍(lán)光補(bǔ)光處理下成花率降低,紅藍(lán)光組合補(bǔ)光處理下成花率升高,第5節(jié)成花率高于第4和第6節(jié)。不同處理下,第5節(jié)以單一藍(lán)光成花率最低,為38%,R2B1處理和CK成花率相等,為50%,R6B1和R4B1處理均顯著高于CK,分別為62%和66%,表明R4B1和R6B1處理能顯著提高‘紅地球’葡萄成花率。

圖5 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄成花率的影響Fig.5 Effect of different proportions of red and blue light on flowering rate of ‘Red Globe’ grape

2.6 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄葉片可溶性糖和淀粉含量的影響

從圖6可以看出,CK葉片可溶性糖含量在花芽未分化時(shí)上升,花芽分化前期含量持續(xù)下降,進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期后開始上升,直到花芽分化末期;不同紅藍(lán)光處理下葉片可溶性糖含量變化趨勢(shì)基本相同,花芽分化前期可溶性糖含量持續(xù)上升,進(jìn)入花原始體發(fā)育期后含量開始下降,進(jìn)入花序二級(jí)軸發(fā)育期后開始上升。不同處理下葉片的淀粉含量變化趨勢(shì)相同,在花芽分化前期淀粉含量持續(xù)上升,進(jìn)入花原始體分化期后迅速下降,隨后在花序二級(jí)軸發(fā)育期開始上升。進(jìn)入花序原基分化期后,消耗了大量的糖和淀粉,R4B1和R6B1處理下的可溶性糖和淀粉含量高于其他處理,這些較高水平的碳水化合物為前期花芽分化提供了能量。

圖6 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄葉片可溶性糖和淀粉含量的影響Fig.6 Effect of different proportions of red and blue light on soluble sugar and starch content of ‘Red Globe’ grape leaves

2.7 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄葉片可溶性蛋白和類黃酮含量的影響

由圖7可以看出,不同處理后葉片可溶性蛋白含量變化趨勢(shì)相同,花芽分化前期至花序二級(jí)軸分化期葉片可溶性蛋白含量不斷上升,在花芽分化后期下降后趨于穩(wěn)定,整個(gè)過程中R4B1和R6B1處理含量高于其他處理,CK和R處理含量最低。葉片類黃酮含量在花芽分化開始前水平較低,在花芽始分化期迅速上升,進(jìn)入花原始體發(fā)育期后含量開始下降,最高點(diǎn)分別為:R處理在花原始體發(fā)育期、R2B1處理在花序主軸發(fā)育期,其他處理在花序二級(jí)軸發(fā)育期。

圖7 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄葉片可溶性蛋白和類黃酮含量的影響Fig.7 Effect of different proportions of red and blue light on soluble protein and flavonoid contents of ‘Red Globe’ grape leaves

2.8 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄成花基因表達(dá)量的影響

以CK成花基因表達(dá)量為對(duì)照,對(duì)不同補(bǔ)光組合下花芽成花基因表達(dá)進(jìn)行了實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析(圖8)。在不同補(bǔ)光組合處理下,花芽中VvAP2、VvSOC1表達(dá)量均顯著提高,VvLFY表達(dá)量顯著降低。在R和B處理下,花芽中VvAP2和VvAP3表達(dá)量最高;在R2B1處理下,花芽中VvAP1表達(dá)量最高;在R4B1處理下,花芽中VvFT、VvAG、VvAP2和VvSOC1表達(dá)量最高;在R6B1處理下,花芽中VvFUL、VvFT和VvSPL10表達(dá)量最高。

圖8 不同比例紅藍(lán)光對(duì)‘紅地球’葡萄花芽成花基因表達(dá)量的影響Fig.8 Effects of different proportions of red and blue light on flowering gene expression of ‘Red Globe’ grape

2.9 不同比例紅藍(lán)光下‘紅地球’葡萄成花基因間的相關(guān)性分析及相互作用

對(duì)不同補(bǔ)光組合下的成花率和10個(gè)成花相關(guān)基因的表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析(表2)。CK的成花率與VvAP2表達(dá)量呈顯著正相關(guān),與VvSOC1表達(dá)量呈負(fù)相關(guān);R處理的成花率與VvFT表達(dá)量呈顯著正相關(guān),與VvAP1表達(dá)量呈顯著負(fù)相關(guān);B處理的成花率與VvSOC1表達(dá)量呈顯著正相關(guān),與VvAG表達(dá)量呈負(fù)相關(guān);R2B1處理的成花率與VvAP2表達(dá)量呈負(fù)相關(guān);R4B1處理的成花率與VvFUL、VvFT和VvSPL10表達(dá)量呈顯著正相關(guān);R6B1處理的成花率與VvFUL、VvFT、VvAG和VvSPL10表達(dá)量呈正相關(guān)。

表2 不同比例紅藍(lán)光下‘紅地球’葡萄成花基因與成花率的相關(guān)性分析Table 2 The correlation analysis between flowering gene and flowering rate of ‘Red Globe’ grape under different proportions of red and blue light

續(xù)表2 Continuedtable 2

R4B1和R6B1處理下成花率顯著提高,因此,對(duì)R4B1和R6B1處理下相關(guān)性大于0.6的成花基因進(jìn)一步的相互作用進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析(圖9)。可以看出,R4B1和R6B1處理下,VvAP1、VvAP2和VvSOC1的相對(duì)表達(dá)量較高。此外,在R4B1處理下,VvAP1、VvAP2、VvAP3和VvLFY為節(jié)點(diǎn)基因。其中,VvAP1與VvFT呈正相關(guān),與VvAP2、VvAP3呈負(fù)相關(guān);VvFLC和VvAG呈負(fù)相關(guān),VvFT與VvAP2、VvSOC1和VvSPL10呈正相關(guān)。在R6B1處理下,VvAP1、VvAP2、VvSOC1和VvLFY為節(jié)點(diǎn)基因。其中,VvAP1與VvAP2、VvLFY呈負(fù)相關(guān);VvAP2與VvLFY、VvFT和VvSOC1呈正相關(guān);VvFLC與VvSOC1和VvAG呈負(fù)相關(guān)。

圓代表基因,圓的大小與基因表達(dá)水平呈正相關(guān),圓的顏色深淺與總關(guān)聯(lián)度正相關(guān),粗框圓為節(jié)點(diǎn)基因。連接線粗細(xì)與基因間的相關(guān)性大小呈正相關(guān),紅色為正相關(guān),藍(lán)色為負(fù)相關(guān)。The circle represents genes.The size of the circle is positively correlated with the relative expression level of the gene.The colour depth of the circle is positively correlated with the total correlation degree.The coarse frame circle is the node gene.The thickness of the connecting line is positively correlated with the correlation between genes, and red is positively associated, and blue is negatively correlated.圖9 R4B1和R6B1處理下成花基因相互作用網(wǎng)絡(luò)圖Fig.9 Interaction network of flowering genes under R4B1 and R6B1 treatments

3 討 論

光照是花芽形成的必需條件,光質(zhì)影響植物內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累,進(jìn)而調(diào)節(jié)枝梢營(yíng)養(yǎng)和生殖平衡[24]。眾所周知,碳水化合物代謝涉及淀粉和糖的合成、分解代謝和相互轉(zhuǎn)化,在多個(gè)成花途徑中具有重要的信號(hào)和能量作用[25]?？扇苄蕴鞘腔ㄑ糠只^程中的營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ),與甜櫻桃[26]、駿棗[27]等果樹的花芽分化顯著正相關(guān);淀粉是碳水化合物中最重要的部分,代表著植物體有機(jī)營(yíng)養(yǎng)水平,并根據(jù)植物需要進(jìn)行調(diào)動(dòng)或積累,葉片中較高的淀粉含量促進(jìn)蘋果樹花芽形成[28]。本研究中,可溶性糖和淀粉含量在花芽分化前期持續(xù)上升,進(jìn)入花序原基分化期后下降,在花序二級(jí)軸發(fā)育期開始上升。不同光照處理下的碳水化合物含量均高于CK,其中,R4B1和R6B1處理下碳水化合物含量最高。表明在‘紅地球’葡萄花芽分化中期消耗了大量的碳水化合物,而補(bǔ)光處理下葉片較高的碳水化合物水平促進(jìn)了花芽分化。

可溶性蛋白作為花芽分化的重要生理指標(biāo),與植物性狀表達(dá)密切相關(guān),在植物花芽轉(zhuǎn)變過程中是不可或缺的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[29]。黃酮類化合物在植物體內(nèi)合成代謝起源于光合產(chǎn)物,遍布植物體的各個(gè)組織,對(duì)植物生殖生長(zhǎng)起著重要作用[30]。本研究發(fā)現(xiàn),不同補(bǔ)光處理葉片蛋白含量顯著提高,與劉帥等[31]的研究結(jié)果一致,并在花芽未分化期開始上升至花序二級(jí)軸發(fā)育期達(dá)到最大值;葉片類黃酮含量在花序原基分化期迅速上升,并在花芽分化中后期保持較高水平,表明良好的花芽分化需要積累大量的可溶性蛋白和類黃酮。

控制花芽分化的基因需要特定的外界刺激和內(nèi)部各種生理調(diào)節(jié)后進(jìn)行表達(dá),成花基因的相關(guān)研究有助于從根本上了解光環(huán)境對(duì)花芽分化的影響。FT蛋白作為開花素,促使花分生組織特異性基因的表達(dá),促進(jìn)開花[32]。R4B1和R6B1處理下VvFT基因的表達(dá)水平顯著上調(diào),說明植物光受體在受到紅藍(lán)光刺激后,通過信號(hào)傳遞調(diào)控相關(guān)基因表達(dá),進(jìn)而影響花芽分化[33]。此外,FT還可以激活花整合基因SOC1和花分生組織基因AP1,啟動(dòng)擬南芥的花轉(zhuǎn)換和花芽分化,然后,SOC1激活花分生組織識(shí)別基因LFY,控制花的誘導(dǎo)[34]。SOC1既作為信號(hào)通路的響應(yīng)因子,又作為開花信號(hào)整合因子調(diào)節(jié)擬南芥開花[35];AP1和FUL是花分生組織特征基因,調(diào)控花序分生組織向花分生組織的轉(zhuǎn)變[36];LFY通過整合環(huán)境和內(nèi)源信號(hào),控制植物花的生長(zhǎng)發(fā)育[37]。本研究中R4B1處理下VvFT和VvAP1、VvSOC1表達(dá)呈正相關(guān)。AP2、AP3和AG是花器官特征基因,參與植物花芽分化,FLC是調(diào)控春化作用的關(guān)鍵基因,對(duì)成花基因FT和SOC1有抑制作用[38],SPL10是成花網(wǎng)絡(luò)中赤霉素途徑調(diào)控基因,對(duì)成花有正向調(diào)控作用[39]。成花率較高的R4B1和R6B1處理下成花基因與成花率相關(guān)性分析表明,成花率與VvFUL、VvFT、VvAG和VvSPL10表達(dá)量呈正相關(guān),與VvLFY、VvAP3和VvFLC表達(dá)量呈負(fù)相關(guān),進(jìn)一步的網(wǎng)絡(luò)互作圖表明,VvAP1、VAP2和VvSOC1表達(dá)量和總關(guān)聯(lián)度較高,VvAP1、VvAP2、VvSOC1和VvLFY是成花基因相互作用關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。

4 結(jié) 論

不同比例紅藍(lán)光對(duì)設(shè)施‘紅地球’葡萄的花芽分化和成花基因表達(dá)有顯著影響。其中,R4B1處理下葉片可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、類黃酮含量顯著提高,成花基因VvFUL、VvFT、VvAG、VvAP1、VvAP2、VvSOC1和VvSPL10上調(diào)表達(dá),VvLFY和VvFLC下調(diào)表達(dá),促進(jìn)了‘紅地球’葡萄的花芽分化。成花率與VvFUL、VvFT、VvAG和VvSPL10表達(dá)量呈正相關(guān),VvAP1、VvAP2、VvSOC1和VvLFY是成花基因相互作用關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),但光質(zhì)是如何影響植物體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成轉(zhuǎn)運(yùn)以及成花基因的調(diào)控機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。