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        高效液相色譜儀檢測(cè)器進(jìn)展及其在藥物分析中的應(yīng)用

        2023-04-07 05:41:53陳尚坤
        健康之友 2023年1期
        關(guān)鍵詞:分析檢測(cè)

        翟 義 陳尚坤

        (吉林省松原市食品藥品檢驗(yàn)所 吉林 松原 138000)

        社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,促使我國(guó)的醫(yī)療水平不斷提升,臨床重視研究開(kāi)發(fā)新的檢測(cè)技術(shù),以期進(jìn)一步提升醫(yī)療水平、拓寬醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。高效液相色譜法屬于一種有機(jī)化合物分析技術(shù),具有檢測(cè)耗時(shí)短、分析速度較快、分離效率較高等特點(diǎn),是目前藥物分析的常用手段,有利于快速檢測(cè)和分析藥物成分,了解藥物代謝情況,明確藥物質(zhì)量,具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[1]。近些年來(lái),隨著現(xiàn)代西藥學(xué)及中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展和完善,加上患病人數(shù)的增加,促使藥物在臨床的應(yīng)用范圍擴(kuò)大,隨之而來(lái)的藥物安全問(wèn)題成為臨床關(guān)注的重點(diǎn)。故臨床重視高效液相色譜法檢測(cè)器的研究是非常必要的,有利于確保臨床用藥的安全性。對(duì)此,本文就高效液相色譜儀檢測(cè)器進(jìn)展及其在藥物分析中的應(yīng)用效果作一綜述,詳細(xì)報(bào)告如下。

        1 概述高效液相色譜儀

        高效液相色譜法在上個(gè)世紀(jì)六七十年代首次出現(xiàn),其屬于一種現(xiàn)代化分析方法,因具有較高的敏感度以及良好的分離度而被廣泛用于藥物分析和化工生產(chǎn)等領(lǐng)域。高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái),其參照了氣相色譜的工作原理,并將流動(dòng)相改為高壓輸送[2]。高效液相色譜法的色譜柱是借助特殊的方法使用小粒徑填充而成,相較于經(jīng)典液相色譜,高效液相色譜法色譜柱的效果大大提升,且色譜柱后連接敏感度極高的檢測(cè)器,能夠連續(xù)檢測(cè)流出物,提高檢測(cè)效果[3]。高效液相色譜儀主要包括五個(gè)部分,分別是色譜柱、色譜泵及控制器、檢測(cè)器、進(jìn)樣器、數(shù)據(jù)處理及控制。高效液相色譜儀的分離原理為:在一個(gè)物理過(guò)程中,流動(dòng)相帶領(lǐng)著等待被分析的化合物及其他共存物質(zhì)通過(guò)色譜柱,由于不同物質(zhì)在固定相上的停留時(shí)間存在主體差異,使得出峰時(shí)間不同,利用此差異完成分離,隨后將分離的成分通過(guò)檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),最終檢測(cè)出各種化合物的濃度,并對(duì)化合物進(jìn)行分析[4]。

        2 闡述評(píng)估高效液相色譜儀檢測(cè)器質(zhì)量的指標(biāo)

        檢測(cè)器作為高效液相色譜儀的重要組成部分,其質(zhì)量的好壞將直接影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和敏感度,因此,檢測(cè)人員需要全面了解高效液相色譜儀檢測(cè)器的結(jié)構(gòu),掌握檢測(cè)器的使用方法,從而提高檢測(cè)效率和檢測(cè)準(zhǔn)確率。另外,檢測(cè)人員在日常工作中,還需要重視高效液相色譜儀檢測(cè)器的保養(yǎng)和維護(hù),避免因儀器質(zhì)量而出現(xiàn)檢測(cè)誤差,延長(zhǎng)檢測(cè)器的使用壽命。現(xiàn)階段,臨床評(píng)估高效液相色譜儀檢測(cè)器質(zhì)量的指標(biāo)有:①噪音:主要是指在沒(méi)有樣品時(shí),檢測(cè)器的最大輸出信號(hào);②信噪比;③靈敏度;④漂移:是指檢測(cè)器在一段時(shí)間內(nèi)響應(yīng)值的變化情況;⑤最小檢測(cè)限:是指當(dāng)樣品出現(xiàn)兩倍或三倍的噪音信號(hào)時(shí)的濃度:⑥線性動(dòng)態(tài)范圍:是指最大線性相應(yīng)與最小檢出限之比[5]。值得注意的是,最小檢測(cè)限并不僅僅是評(píng)估檢測(cè)器質(zhì)量的指標(biāo),而且還是衡量整個(gè)色譜系統(tǒng)的指標(biāo),是一個(gè)包括色譜系統(tǒng)在內(nèi)的綜合性指標(biāo),信噪比也是一樣的。

        3 分析高效液相色譜儀檢測(cè)器的種類(lèi)及其在藥物分析中的應(yīng)用效果

        隨著臨床對(duì)高效液相色譜法的深入研究,目前已研制出多種高效液相色譜儀檢測(cè)器,并在臨床廣泛應(yīng)用,在藥物分析中發(fā)揮著重要的作用。

        3.1紫外線檢測(cè)器

        在高效液相色譜法的臨床應(yīng)用過(guò)程中,紫外線檢測(cè)器是最為常用的檢測(cè)器,當(dāng)樣品組分通過(guò)流通池時(shí)吸收特定波長(zhǎng)的紫外線,發(fā)生透過(guò)強(qiáng)弱的變化,從而獲取濃度-時(shí)間曲線[6]。相較于其他檢測(cè)器,紫外線檢測(cè)器的敏感度較好,但只適用于能夠吸收紫外線波長(zhǎng)的組分。上個(gè)世紀(jì)八十年代,研制出一種新型的紫外線檢測(cè)器,即二極管陣列檢測(cè)器,利用二極管陣列檢測(cè)器能夠獲取樣品的色譜圖、每個(gè)色譜圖組分的吸收光譜,其中色譜圖用于定量分析,光譜圖用于定性分析。陳玲等[7]在一項(xiàng)研究中,利用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)人體血漿中美羅培南的濃度,結(jié)果顯示在濃度為0.515μg/ml~103.1μg/ml的美羅培南的線性關(guān)系兩阿紅,美羅培南的定量下限為0.515μg/ml。由此看出,高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器的敏感度較高,定量準(zhǔn)確,用于藥物分析的效果確切,可用于監(jiān)測(cè)人體內(nèi)藥物濃度,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果及時(shí)調(diào)整藥物方案,提高臨床用藥的安全性。

        3.2蒸發(fā)光散射檢測(cè)器

        蒸發(fā)光散射檢測(cè)器在上個(gè)世紀(jì)九十年代首次出現(xiàn),其通過(guò)利用流動(dòng)相與受檢物質(zhì)之間蒸汽壓的差異性,在流動(dòng)相揮發(fā)除去易揮發(fā)性組分粒子后,對(duì)于不易揮發(fā)性組分粒子,能夠從激光光源中發(fā)出的光受到散射,利用硅光二極管標(biāo)記受到散射的光信號(hào),并通過(guò)信號(hào)輸出,輸出時(shí)分為霧化、蒸發(fā)以及檢測(cè)三個(gè)階段[8]。相較于其他檢測(cè)器,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器可以檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物,并且揮發(fā)性低于流動(dòng)相的物質(zhì)都可以進(jìn)行檢測(cè),有效拓寬了高效液相色譜法在藥物分析中的檢測(cè)范圍。王瑩等[9]在研究中對(duì)比分析了高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器與電噴霧檢測(cè)器在注射用益氣復(fù)脈中糖成分測(cè)定中的應(yīng)用價(jià)值,結(jié)果顯示上述兩種方法都能準(zhǔn)確測(cè)定注射用益氣復(fù)脈中的4種含糖量,明確注射用益氣復(fù)脈中包含果糖、葡萄糖、麥芽糖以及蔗糖。由此看出,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器用于藥物分析的效果良好,有利于準(zhǔn)確檢測(cè)藥物中的糖類(lèi)、高級(jí)脂肪酸及甘油三酯等,幫助醫(yī)務(wù)人員了解藥物成分,避免出現(xiàn)用藥錯(cuò)誤。

        3.3化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器

        化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器是近些年來(lái)常用的高效液相色譜儀檢測(cè)器,具有高敏感性、高選擇性等特點(diǎn),其設(shè)備比較簡(jiǎn)單。由于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器自身可以發(fā)光,無(wú)需光源,故檢測(cè)價(jià)格便宜,臨床應(yīng)用前景廣闊。化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器將流出色譜柱的組分與發(fā)光試劑混合后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng),光輻射可以借助光導(dǎo)纖維進(jìn)行傳輸,利用光電倍增管進(jìn)行檢測(cè),從而獲取檢測(cè)信號(hào)。相較于其他檢測(cè)器,化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的線性范圍較寬,敏感度高,且重復(fù)性良好,適用于復(fù)方制劑的分析。黃敏文等[10]在研究中使用高效液相色譜-脈沖安培電化學(xué)檢測(cè)器法測(cè)定硫酸新霉素,結(jié)果顯示電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器可以發(fā)現(xiàn)硫酸新霉素的活性組分。由此看出,化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器用于藥物分析的效果顯著,有利于了解藥物成分,明確藥物定量。

        3.4質(zhì)譜檢測(cè)器

        質(zhì)譜檢測(cè)器是一種新型的高效液相色譜儀檢測(cè)器,其在靈敏度、通用性及選擇性等方面的優(yōu)點(diǎn)突出,近些年來(lái)已發(fā)展成為一種高度自動(dòng)化的分析方法,并廣泛用于各個(gè)領(lǐng)域。隨著各種軟離子化技術(shù)的發(fā)展,促使高效液相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)器快速發(fā)展,在中醫(yī)藥研究中發(fā)揮著重要作用。姜春鳳等[11]在一項(xiàng)研究中,利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)器分析了柴胡郁金香顆粒在抑郁癥大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué),該方法的檢測(cè)耗時(shí)短、檢測(cè)速度快、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,可快速明確柴胡郁金香顆粒中9個(gè)成分在抑郁癥大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)。范先煜等[12]研究表明超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)器的準(zhǔn)確性和精密度良好,敏感度較高,操作方便,可以快速檢測(cè)人血漿中伊立替康及其主要代謝產(chǎn)物的濃度。由此看出,質(zhì)譜檢測(cè)器用于藥物分析的效果確切,適用于治療藥物監(jiān)測(cè),提高藥物安全性。

        3.5核磁共振檢測(cè)器

        高效液相色譜-核磁共振檢測(cè)器的歷史發(fā)展較長(zhǎng)久,其在上個(gè)世紀(jì)八十年代初期就已經(jīng)開(kāi)始研究,然而,因核磁共振檢測(cè)器的敏感度較低下,加上氘代試劑的價(jià)格昂貴、溶劑信號(hào)對(duì)樣品的干擾等,導(dǎo)致高效液相色譜-核磁共振檢測(cè)器的發(fā)展比較緩慢。近些年來(lái),隨著核磁共振技術(shù)的快速發(fā)展,磁場(chǎng)強(qiáng)度的不斷提升,使得高效液相色譜-核磁共振檢測(cè)器在臨床廣泛應(yīng)用。陳航等[13]研究表明,核磁共振檢測(cè)器能夠快速檢測(cè)氯唑沙宗的未知成分,督促原料生產(chǎn)單位嚴(yán)格把控藥材質(zhì)量,保證氯唑沙宗臨床用藥的安全性。王跨陡等[14]研究表明,核磁共振檢測(cè)器可以快速鑒別樣品中的麻黃堿和偽麻黃堿,測(cè)定樣品中麻黃堿和偽麻黃堿的含量。由此可知,核磁共振檢測(cè)器用于藥物分析的效果顯著,有利于快速檢測(cè)藥品的成分,明確藥品中的雜質(zhì),督促藥物生產(chǎn)廠家嚴(yán)格把控原材料質(zhì)量,提高藥物的安全性。

        3.6示差折光檢測(cè)器

        示差折光檢測(cè)器是高效液相色法的檢測(cè)儀器之一,其通過(guò)利用流動(dòng)相與組分之間折射率的差異來(lái)進(jìn)行檢測(cè),獲取信號(hào)。雖然示差折光檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器,且對(duì)多數(shù)物質(zhì)的敏感度較低,但對(duì)少數(shù)物質(zhì)的敏感度較高,比如糖類(lèi),主要用于藥物的糖類(lèi)分析[15]。

        4 小結(jié)

        綜上所述,高效液相色譜法是臨床常用的有機(jī)化合物分析技術(shù),具有分離速度快、敏感度高、操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn),目前已用于藥物分析和化工生產(chǎn)等領(lǐng)域。隨著臨床對(duì)高效液相色譜法的深入研究,已研發(fā)出多種檢測(cè)器,比如紫外線檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器、質(zhì)譜檢測(cè)器、核磁共振檢測(cè)器以及示差折光檢測(cè)器等,不同檢測(cè)器的適用范圍存在差異,臨床需結(jié)合具體情況選擇合適的檢測(cè)器,不斷提高藥物分析效果。

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