洪 勇, 唐 谷

（1. 貴州省安順市種子管理站, 貴州 安順 561000；2. 貴州省安順市農(nóng)業(yè)科學院, 貴州 安順 562100）

貴州是我國長江流域油菜優(yōu)勢主產(chǎn)區(qū)，也是全國油菜主產(chǎn)省之一。貴州省常年油菜種植面積約43 萬hm2，種植面積居全國第5 位。種子質(zhì)量是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中至關重要的因素，油菜種子質(zhì)量是提高油菜產(chǎn)量、增加油菜種植收入的基本保證。隨著大量品種的審定、引進和品種加速更替，雜交油菜品種呈現(xiàn)井噴之勢。品種純度是評價種子質(zhì)量的重要指標，對產(chǎn)量及品質(zhì)均有直接而明顯的影響[1]，開展品種純度鑒定是保證良種遺傳特性充分發(fā)揮、防止良種混雜退化、提高種子質(zhì)量和品質(zhì)的必要手段[2]。目前，我國鑒定種子純度常用的方法有小區(qū)種植鑒定法和鹽溶蛋白電泳法。鹽溶蛋白電泳法雖然檢測成本低廉，但區(qū)分能力較弱，難以區(qū)分異型株，對部分品種也無法鑒定自交苗。小區(qū)種植鑒定法可在花期同時觀測多個性狀，有較多的性能用于純度鑒定[3]，是經(jīng)典的表型鑒定方法。盡管田間小區(qū)種植鑒定法費工費時，但在一定時期內(nèi)仍然是商品種子純度鑒定唯一認可的方法[4]。田間小區(qū)種植鑒定應用廣泛，國內(nèi)已有多篇報道總結田間小區(qū)種植法開展玉米[5]、水稻[6]、小麥[7]、大豆[8]、辣椒[9]等作物品種純度鑒定程序和關鍵技術，但油菜品種田間小區(qū)種植鑒定方法鮮見報道。安順市種子管理站多年來承擔貴州省油菜種子純度田間小區(qū)種植鑒定任務，通過試驗實踐探索積累，已掌握關鍵技術環(huán)節(jié)。為油菜品種純度田間小區(qū)種植鑒定規(guī)程的制定與應用提供參考，總結油菜品種純度田間小區(qū)種植鑒定的鑒定程序及田間操作技術要點。

1 鑒定地塊選擇

鑒定地塊應選擇具備油菜品種廣泛種植的生產(chǎn)條件和自然環(huán)境條件，不易發(fā)生自然災害。選擇地勢平坦、土壤疏松、均勻、肥力中等偏下、交通便利、水源有保障、排灌方便良好的田塊。鑒定地塊前作最好是玉米或水稻，不能選擇前作為十字花科同科（種）作物的地塊。地塊形狀規(guī)則，未發(fā)生過嚴重病蟲害。

2 種子樣品準備

為加強種子質(zhì)量源頭監(jiān)管，全面掌控油菜種子質(zhì)量，使品種特征特性得到客觀、真實的反映，貴州省種子管理部門定期對市場銷售量大、推廣種植面積較大及群眾反饋疑似有問題的品種進行扦樣，嚴格按照規(guī)定的程序、數(shù)量進行，做好鑒定油菜品種信息收集、登記工作，妥善保存樣品。所有樣品統(tǒng)一編號，并將樣品保存在陰涼、通風的室內(nèi)，避免因環(huán)境變化影響種子質(zhì)量。在播種前，再次對參加種植鑒定的油菜種子樣品數(shù)量、品種名稱、樣品編號、種子質(zhì)量標簽標注值等進行核查，確保油菜樣品準確性。根據(jù)播種粒數(shù)隨機選取種子粒數(shù)，試驗種子樣品不得進行包衣、浸種、選種等處理[7]。

為確保田間小區(qū)種植試驗的有效性，同時考慮節(jié)約占地成本，應合理確定播種數(shù)量。測定品種純度百分率，田間設計應滿足GB/T 3543.2—1995 鑒定品種純度的基本株數(shù)，計算公式為鑒定株數(shù)=4×100/（100-純度標注值）；田間種植粒數(shù)≥鑒定株數(shù)/發(fā)芽率。GB 4407.2—2008中規(guī)定了油菜種子的質(zhì)量要求、檢驗方法和檢驗規(guī)則，大田用種中油菜雜交種的品種純度不低于85%，常規(guī)種的品種純度不低于95%，即種植株數(shù)達80 株即可。在實際工作中，為提高準確度，保證種植總數(shù)量在300株以上。

3 小區(qū)設計

為保證油菜品種的特征特性得到充分表現(xiàn)，需有足夠的行株距保證植株正常生長，密度過小，不利于植株性狀的表現(xiàn)和專家開展現(xiàn)場鑒定；密度過大，則造成土地浪費，增加成本。經(jīng)過多年試驗實踐得出，每個樣品為1 個小區(qū)，每個小區(qū)種植4～6 行，種植密度90 000 株/hm2左右。小區(qū)之間走道80 cm，便于觀察鑒定和田間管理。鑒定地塊四周設置80 cm 的保護行，避免鑒定地塊受人畜危害。田間小區(qū)采用隨機區(qū)組排列設計，并繪制田間小區(qū)示意圖。設2次重復，有條件的可設置3 次重復，同一樣品的2 次重復不能在同一垂直線上。

4 田間種植技術

4.1 播種

按貴州省當?shù)厣鷳B(tài)及栽培條件，當?shù)赝痉N植鑒定一般安排在9月下旬至10月上旬播種?？刹捎弥辈セ蛴缫圃苑绞剑辈シ绞叫鑶瘟２シN；育苗移栽方式播種時，可采用穴盤育苗或漂浮盤育苗，育苗盤須消毒處理后再使用。為培育壯苗，應做好育苗大棚溫度管理，溫度高時注意大棚防風，防止燒苗，苗旺盛生長期應適當降溫，防止徒長，保持白天溫度20～30℃，夜間13～18℃，視墑情適當補水，需在每個小區(qū)或每個營養(yǎng)缽（穴盤）上標注種植編號，經(jīng)核查無誤后將小區(qū)標識牌插在行（區(qū)）頭，再次核查無誤后開始單株移栽。移栽時隨機取單株種植，不得選苗。根據(jù)種植總數(shù)量要求，綜合考慮油菜發(fā)芽率、成苗率等因素，建議育苗總數(shù)量在種植總數(shù)量的基礎上增加40%～50%，若個別品種發(fā)芽率低，播種量應當適當增加，避免移栽定植時缺苗。

4.2 田間管理

種植前精細整地，旋耕2 遍以上，深度達15 cm 以上，耕后平整土地。澆足底墑水，保持土壤相對含水量為70%～80%。合理施肥，小區(qū)種植鑒定只要求觀察品種的特征特性，不要求高產(chǎn)，土壤肥力不宜過高。整個生育期間盡量少施化肥，特別是氮肥，若需施用化肥，要求施肥均勻一致。

整個生長周期不補種、不勻苗、不間苗、不去雜，不得使用除草劑和植物生長調(diào)節(jié)劑。 種植后加強田間管理，及時中耕除草、培土、保持土壤疏松。及時澆水，保持土表濕潤，同時注意排澇，下雨及時清溝，確保田間無明顯積水?？稍诶俎菲诤统趸ㄆ趪娛?.2%速樂硼50～60 kg/667m2，栽培管理要求一致，同一管理措施應在同一天內(nèi)完成。

4.3 病蟲害防治

加強田間調(diào)查，及時及早開展病蟲害防治，特別注意防治苗期菌核病、病毒病，生長期霜霉病、白粉病等病害，蚜蟲、菜青蟲、菜粉蝶等蟲害，以保護油菜正常生長，充分表現(xiàn)其品種的特征特性[10]。在生長中后期階段，清理病葉、老葉并帶出田塊集中處理，防止病菌的擴散和蔓延。

5 鑒定

5.1 鑒定時期

花期和成熟期是品種特征特性表現(xiàn)最明顯的時期，也是鑒定的最佳時期，在花期或成熟期集中組織專家鑒定。

5.2 鑒定程序

5.2.1 初步篩查 鑒定專家根據(jù)《農(nóng)作物種子質(zhì)量監(jiān)督抽查管理辦法》《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 真實性和品種純度鑒定》（GB/T 3543.5—1996）等規(guī)定，按照科學、公正、公平的原則，對田間生長情況進行整體巡檢，確保符合鑒定要求后，分組開展初步篩查。對所有樣品的種植小區(qū)，仔細觀察本品種植株和非本品種植株（包括自交株、非典型株）的主要特征，并對其進行篩查鑒定，對初步確認為非本品種的植株進行標記并計數(shù)。初步篩查鑒定結果填寫在《品種純度田間種植鑒定原始記載表》中，對實測值＋容許誤差＜標準值的，列為初步篩查疑似不合格樣品。

5.2.2 復查不合格樣品 對照品種純度判斷規(guī)則，對初步篩查結果進行判定，將預期可能不合格的種子樣品列為復查對象。所有鑒定專家組成復核組，對疑似不合格樣品進行復查并計數(shù)。若復查結果與初篩結果無顯著差異，以復查結果作為最終鑒定結果，復查專家組負責對最終確定的非本品種植株予以明顯標記。若復查結果與初篩結果差異顯著，報鑒定組織者進行會商后確定檢查方案再進行鑒定，最終結果以末次鑒定為準。

5.2.3 鑒定結果的計算與判定 根據(jù)《農(nóng)作物種 子標 簽通 則》（GB 20464—2006）和《農(nóng)作物種子質(zhì)量標準》（GB 4404.1—2008）的規(guī)定，按照種子標簽標注值和國家種子質(zhì)量標準規(guī)定值就高不就低的原則，對田間小區(qū)種植鑒定計算出的品種純度值逐一進行判定，判定采用規(guī)定的容許誤差。鑒定嚴格按照GB/T 3543.5—1995 執(zhí)行，逐行逐株進行鑒別，記錄調(diào)查品種總株數(shù)、變異株數(shù)。品種純度結果以百分率表示。計算公式：

品種純度=［（本品種總株數(shù)-變異株數(shù)）/本品種總株數(shù)］×100%

式中，T為容許誤差，p為表格中純度標準值，q=100-p，N為鑒定株數(shù)。

5.2.4 結果填報與匯總 將計算數(shù)值和判定結果填入品種純度田間小區(qū)種植鑒定記載表，并根據(jù)各檢驗機構分工對鑒定結果進行分類匯總。根據(jù)原始記載表填寫純度鑒定結果匯總表和鑒定意見，結果匯總表及鑒定意見由所有鑒定專家簽字。對不合格樣品每個樣品單獨填寫《品種純度田間種植鑒定原始記載表》，并由初次鑒定專家及記錄人在初次鑒定結果欄鑒定人處簽字。根據(jù)初步篩查和復核結果，填寫《品種純度田間種植鑒定結果匯總表》，鑒定地點填寫詳細至村，所有復核專家在復核結果欄鑒定人處簽字。參與鑒定的所有專家及工作人員在《品種純度田間種植鑒定簽到表》上簽到。

5.2.5 檔案資料管理 田間種植鑒定結果是農(nóng)業(yè)行政管理部門行使行政管理職責，進行種子執(zhí)法的重要依據(jù)，需強化保密原則和可追溯原則。在田間鑒定期間和鑒定結果未正式公布前，不得事先轉換種植編號，不得查詢樣品所屬企業(yè)等相關信息，應對相關事宜予以保密，所有人員禁止以任何形式向外透露鑒定結果的相關信息。建立生產(chǎn)檔案及田間現(xiàn)場鑒定檔案，生產(chǎn)檔案應實事求是記錄品種的田間管理事項、農(nóng)事、氣象、病蟲害發(fā)生等情況，田間現(xiàn)場鑒定檔案應記錄好品種總株數(shù)、變異株數(shù)。做好數(shù)據(jù)整理匯總，形成鑒定意見，鑒定結束后，將品種純度田間種植鑒定簽到表、品種純度田間種植鑒定意見、品種純度田間種植鑒定結果匯總表、品種純度田間種植鑒定原始記載表等田間小區(qū)種植鑒定原始記錄和生產(chǎn)記錄保存好，保證田間鑒定結果、相關記載信息均能溯源到原始樣品，保證可追溯。

6 結果通知與異議處理

6.1 結果通知

根據(jù)種植編號信息轉換成樣品登記號，確認純度不合格的種子樣品和企業(yè)信息，在現(xiàn)場將鑒定結果電話通知被抽查對象，被抽查對象不是該品種的種子生產(chǎn)經(jīng)營者的，同時通知種子生產(chǎn)經(jīng)營者。在鑒定結束后，將結果通知單書面材料按程序快遞給企業(yè)，并做好相應的收發(fā)記錄。

6.2 異議處理

不合格樣品所屬企業(yè)提出異議，要求到現(xiàn)場查看結果的，檢驗機構應告知其要在3日內(nèi)到達鑒定現(xiàn)場，跟蹤處理并根據(jù)不合格樣品的鑒定意見做好釋疑工作。田間小區(qū)種植鑒定承擔單位負責有異議企業(yè)查看現(xiàn)場的接洽工作，并確保鑒定小區(qū)在鑒定異議期結束前保持完好，不被破壞。

7 小結

科學規(guī)范的種植方法與合理的管理技術是保障種子純度種植鑒定結果準確性的關鍵。油菜小區(qū)種植鑒定法在花期同時觀測多個性狀，可直觀地判定品種真?zhèn)?。實施油菜種子純度田間小區(qū)種植鑒定試驗必須把握好每個關鍵環(huán)節(jié)，確保準確到位，保障鑒定結果真實可靠。對鑒定不合格的樣品批次進行封存，有效防止假冒偽劣油菜種子在市場上流通，防止低純度的油菜種子對油菜生產(chǎn)造成不良影響，保障秋冬季油菜用種安全，切實保障農(nóng)民切身利益，為油菜產(chǎn)業(yè)持續(xù)穩(wěn)定健康發(fā)展提供保障。